小分子伴侣论文_宋昀奚

导读:本文包含了小分子伴侣论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:伴侣,分子,蛋白,复性,休克,分枝,层析。

小分子伴侣论文文献综述

宋昀奚[1](2019)在《几种小分子对铜伴侣蛋白CopC铜调控的影响》一文中研究指出在高浓度铜的环境里种植的、加利福尼亚西红柿中出现的革兰氏阴性菌中发现的铜伴侣CopC含有102个氨基酸残基,分子量约为10 kDa。核磁结构显示,结合Cu~(2+)和Cu~+的CopC在溶液中呈希腊桶状结构,由9股β折叠片形成,两股是平行的,剩下的是反平行的。CopC含有一个疏水的内核,其中含有唯一的Trp83和Tyr79。CopC对Cu~+和Cu~(2+)都有很高的亲和性。Cu~(2+)的结合位点位于CopC的N末端,由His1、His91、Glu27、Asp89四个氨基酸残基组成。桶的另一端是Cu~+结合位点,由Met40、Met43、Met46和Met51四个氨基酸残基组成。CopC作为氧化还原开关参与铜的调控,CopC与小分子的相互作用将影响CopC对铜的调控。本文在本实验室之前研究的HSSC(SSC,水杨醛缩氨基磺酸-阴离子),L1(2,6-吡啶二甲酰肼2-羟基萘甲醛酰腙)和姜黄素与CopC的相互作用的基础上,重点研究了阿霉素与CopC的相互作用及一些小分子对CopC作为氧化还原开关的影响。首先,本文研究了CopC和阿霉素(ADM)的相互作用。荧光光谱、等温滴定量热法(ITC)分析表明CopC和ADM以1:1结合,条件稳定常数约为10~5 L/mol;红外光谱、CD光谱和尿素诱导解折迭实验研究表明阿霉素的结合导致CopC的构象变化,伴随着β-折迭的减少和无规卷曲的增加,CopC的稳定性降低;通过分子对接软件Arguslab模拟发现,ADM与CopC之间主要作用力是氢键和疏水作用力,并且ADM的结合位点位于蛋白质的N端。其次,本文研究了Cu~(2+)和ADM、ADM-CopC的相互作用,荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、等温滴定量热、荧光寿命分析表明Cu~(2+)和ADM以1:2结合,累积条件稳定常数K_([Cu(II)-ADM])为1.90×10~9 L~2/mol~2;动力学和热力学实验共同表明Cu~(2+),ADM和CopC可形成CopC-Cu~(2+)-ADM叁元复合物,并且这个叁元复合物以Cu~(2+)为中心。最后,本文研究了ADM、HSSC、L1、姜黄素对CopC铜调控的影响。紫外还原动力学表明,小分子影响CopC铜调控的主要因素有Cu~(2+)的还原及Cu~+的迁移。结合在CopC的C端的HSSC、结合在CopC的N端的L1和ADM与CopC的结合均会改变CopC的构象,扩大了CopC桶内Cu~+的迁移通道的出口和入口,使得Cu~+容易迁移,而结合在CopC疏水桶中部外侧的姜黄素没有改变Cu~+的迁移通道,不影响Cu~+的迁移速率;通过构建疏水桶中央的氨基酸突变,85位的丙氨酸突变成甲硫氨酸,可形成桶内Cu~+弱结合位点,使得Cu~+的迁移更容易进行,这都表明CopC-Cu~(2+)的还原途径可能是内途径。(本文来源于《山西大学》期刊2019-06-01)

陈尹[2](2018)在《汽车燃油时代新革命—TTC燃油伴侣,小分子燃油催化剂》一文中研究指出TTC创建于1996年,目前已经在德国、英格兰、美国、新加坡等叁十多个国家有了业务往来。TTC燃油伴侣作为TTC公司所研制的全新产品,其具备有其他燃油添加剂所不具备的功能。文章主要介绍了TTC燃油伴侣所具备的功能,以期可以对TTC燃油伴侣有更加清晰的认识。(本文来源于《汽车实用技术》期刊2018年21期)

张金玲[3](2009)在《分子伴侣及小分子伴侣、人工分子伴侣与蛋白复性》一文中研究指出据统计,目前上市的蛋白药物中42%以大肠杆菌作为表达系统[1],该表达系统具有操作简单,生长时间短、成本低、产量高等优点被广泛应用,但是该表达系统存在的最大问题是表达产物往往为不可溶的、无生物活性的包涵体,需要经过变性-复性及进一步的纯化才能获得高纯度的(本文来源于《临床合理用药杂志》期刊2009年17期)

秦焱,王慧,昌增益[4](2007)在《线虫中的小分子热休克蛋白HSP12.1具有类分子伴侣活性》一文中研究指出很多种类的小分子热休克蛋白(small heat shock protein,sHSP)都能在胁迫条件下抑制蛋白质的聚集,显示出了类分子伴侣活性,这种活性是ATP非依赖型的.从已经进行的实验发现,线虫C.elegans中最小的小分子热休克蛋白家族成员HSP12.1具有类分子伴侣活性,以胰岛素、乙醇脱氢酶和溶菌酶做底物发现HSP12.1能够一定程度地抑制底物的热聚集,虽然这种活性较一些经典的分子伴侣蛋白(线虫中的HSP16.1)要低.与此不同,另外3种和其分子质量相近的sHSP12s(HSP12.2、HSP12.3和HSP12.6)却没有检测出这样的类分子伴侣活性,虽然它们在一级结构上有很高的相似性.另外,在大肠杆菌中表达HSP12.1蛋白能够提高细菌在高温环境下的生存率,45℃处理后的生存率比未表达HSP12.1的菌高4倍左右,不过在线虫中是否发挥同样的功能还不是很清楚.从研究结果来看,C端“尾巴”结构域对sHSP发挥类分子伴侣活性不是必要的,在HSP12.1中没有C端“尾巴”结构域也有类分子伴侣活性就证明了这一点.N端结构域可能在发挥类分子伴侣活性中发挥比较重要的作用,当然α-crystallin结构域也可能参与到发挥这样的功能当中.(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2007年06期)

贾长虹[5](2007)在《人工伴侣与小分子添加剂协同辅助变性溶菌酶复性的研究》一文中研究指出本文在改进溶菌酶标准曲线测定方法的基础上,优化了人工伴侣辅助溶菌酶复性的各种条件,进一步研究了人工伴侣与小分子添加剂协同辅助高浓度溶菌酶的复性。应用改进的方法测定了溶菌酶标准酶活数值,通过一组实验得到了任意温度下的标准酶活,增加了实验的准确性和可比性。考察了人工伴侣辅助溶菌酶复性的各种条件。结果表明,当复性体系中溶菌酶的浓度不同时,得到最大复性收率的GSSG/GSH浓度有所差异。在0.06、0.1、0.2 mg/mL的酶浓度下,随酶带入的还原型DTT的作用可以不予考虑,GSSG/GSH维持在1:1的比值可以得到最大复性收率;在0.6 mg/mL的酶浓度下,应当考虑DTT的作用,此时需将变化后的GSSG/GSH比值维持在1:1,才能得到较大复性收率。当复性体系中酶浓度为0.6 mg/mL、盐酸胍浓度为0.4 mol/L时,在1.2:9.6 mmol/L的CTAB/β-CD处可获得最大复性收率。静止和摇动条件对人工伴侣辅助复性有明显影响:在静止环境下,复性需要较长时间,且β-CD量的增加有助于复性收率的提高;在摇动环境下,较短的时间和较低的β-CD浓度就可以达到较高的复性收率,但这个数值要低于静止条件下长时间、高浓度β-CD下的复性收率。精氨酸、甘油、乙酰胺、硫脲都可以与人工伴侣协同辅助溶菌酶的复性,其中乙酰氨和硫脲的协同作用较好。乙酰氨的协同作用反应较快,在本实验条件下,随乙酰氨浓度的升高,协同作用不断加强;硫脲的协同作用反应较慢,存在最佳协同作用的硫脲浓度。通过对正交试验结果的分析,可知在0.4 mol/L的盐酸胍存在时,使1 mg/mL溶菌酶达到较好复性收率的协同条件是:乙酰胺2.2 mol/L、GSSG/GSH 5:2 mmol/L、CTAB/β-CD 1.2:9.6 mmol/L,复性1h后收率可以达到85%;或者硫脲0.8 mol/L、GSSG/GSH 5:2 mmol/L、CTAB/β-CD 1.2:9.6 mmol/L,复性1h后收率为74%。(本文来源于《天津大学》期刊2007-01-01)

关怡新,费峥峥,罗曼,姚善泾[6](2004)在《小分子伴侣协助重组人γ-干扰素体外复性研究》一文中研究指出考察了小分子伴侣在游离和固定化两种情况下 ,对重组人γ 干扰素 (rhIFN γ)体外重折迭复性的作用 .实验结果表明 ,小分子伴侣GroEL191~ 345的加入有效地促进了rhIFN γ的复性 ,在初始蛋白质浓度为 10 0mg/L时 ,rhIFN γ复性后蛋白质回收率提高了 2 2倍 ,总活性提高了近 3倍 ;将小分子伴侣固定化在NHS activatedSepharoseFastFlow凝胶后 ,不但能重复利用 ,而且进一步提高了rhIFN γ复性效率 ,在初始蛋白质浓度为4 0 0mg/L时 ,仍使蛋白质回收率达到 4 6 2 9%和比活达到 1 95× 10 7U/mg .(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2004年10期)

付新苗[7](2004)在《结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3调控分子伴侣活性的结构基础》一文中研究指出分子伴侣蛋白在生物体内的主要功能是帮助新生肽链的折迭以及防止变性蛋白的聚集等。小分子热休克蛋白是分子伴侣蛋白中的一个亚家族,结构特征是含有保守的α-crystallin结构域。本文的工作研究来自人类重要的病原微生物结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的小分子热休克蛋白Hsp16.3调控分子伴侣活性的机制,主要包括叁方面的内容。第一方面研究寡聚体解聚和分子伴侣活性的关系,主要结果为:⑴用化学交联法证明了Hsp16.3九聚体的解聚是发挥活性的必要条件;⑵发现Hsp16.3在维持九聚体大小不变的情况下可以通过调整寡聚体的动力学性质(解聚速度、亚基交换速度)来调节分子伴侣活性;⑶发现Hsp16.3能在生理温度范围内(25°C-37.5°C)调节分子伴侣活性,暗示该蛋白在体内具有结合变性蛋白的能力;⑷建立了一个描述寡聚体解聚和发挥分子伴侣活性的动力学模型,可以解释很多小分子热休克蛋白的实验现象。第二方面研究Hsp16.3蛋白的一级序列和寡聚体结构、分子伴侣活性的关系,主要结果为:⑴证明N端区域(35个氨基酸)包含底物结合位点;⑵N端区域作为一个整体对形成九聚体是必需的,首次观测到至少有叁个亚基的N端区域对九聚体的形成不是必需的;⑶首次发现N端区域可以稳定作为大寡聚体的组装单位——叁聚体;⑷发现C端尾巴保守的IXI motif对寡聚化是必需的;⑸鉴定了保守的LPGV motif的作用,证明59位的Gly位于亚基作用面上;⑹构建了有更高活性的小寡聚体,充分证明了小寡聚体是Hsp16.3的活性形式,而九聚体对活性不是必需的。第叁方面研究Cys在分子伴侣蛋白家族中的进化,主要结果为:⑴发现Cys和Trp在该蛋白家族的含量显着低于其他蛋白家族;⑵首次观察到Cys所形成的二硫键对分子伴侣蛋白的损害作用,从而部分了解释了Cys在分子伴侣蛋白中含量少的进化现象,并揭示了构象柔性对分子伴侣蛋白的重要性。(本文来源于《清华大学》期刊2004-04-01)

张佳艺,关怡新,姚善泾[8](2003)在《小分子伴侣GroEL(191-345)在E.coli中的表达及其培养条件的优化》一文中研究指出小分子伴侣GroEL(191-345)是分子伴侣GroEL顶端区域氨基酸残基191-345的片断,它能显着提高基因工程蛋白蝎毒Cn5、亲环蛋白A和吲哚3-甘油磷酸合成酶等的复性效率,具有广阔的应用前景。为制得大量的小分子伴侣进行蛋白质复性研究,本文对其培养条件进行了优化。结果表明携带小分子伴侣基因的工程菌在含有无机盐和碳源的M9培养基中培养能够显着提高小分子伴侣的表达量,在确定M9为基本培养基之后,对其主要成分进行了优化;同时,考察了发酵温度、供氧量、诱导条件对表达量的影响,将发酵产量提高到556.3mg/L。(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2003年06期)

张佳艺[9](2003)在《小分子伴侣的制备及其协助基因工程蛋白体外重折迭的初步研究》一文中研究指出小分子伴侣GroEL(191-345)是分子伴侣GroEL顶端区域氨基酸残基191-345的片断,它能够显着提高基因工程蛋白如蝎毒Cn5、亲环蛋白A和吲哚3-甘油磷酸合成酶的复性效率,具有广阔的应用前景。为深入研究小分子伴侣协助蛋白质复性的机理,提高包涵体的复性收率,本文将小分子伴侣质粒成功转化后,对小分子伴侣培养条件进行了优化、并将纯化后的小分子伴侣初步应用于重组蛋白的体外复性之中。 首先根据载体的特性,我们选择了大肠杆菌BL21作为宿主细胞。在将质粒导入大肠杆菌后,根据小分子伴侣的分子量18kDa和其六聚组氨酸尾能够亲和吸附到Ni-NTA的特性进行了初步鉴定,并根据小分子伴侣表达量的大小选定了菌种。 然后对培养基的种类、组成和培养条件中各项主要因素进行了考察。在基本培养基的选择时,发现携带小分子伴侣基因的工程菌在含有无机盐和碳源的M9培养基中培养能够显着提高小分子伴侣的表达量,在确定M9为基本培养基之后,对其主要成分进行了优化,同时,考察了发酵温度、供氧量、诱导条件等对目标蛋白表达量的影响,在摇瓶培养中将发酵产量提高到了556.3mg/L。 在转速为6000rpm的条件下收集发酵液中的细胞,用缓冲液将其重新悬浮后,超声波破碎,离心取上清,根据小分子伴侣N末端的His_6-Tag的特性进行了Ni-NTA亲和层析。在层析过程中,对其吸附和洗脱进行了咪唑梯度的考察,实现了一步纯化。纯化后的产品用凝胶层析进行了纯度检测,并用MALDI-TOF-MS验证了纯化后产品的分子量18kDa。 最后以基因工程药物重组人IFN-γ作为底物蛋白,对游离小分子伴侣协助蛋白质复性过程中的主要影响因素进行了初步探讨,结果表明IFN-γ在最终浓度为0.22mg/ml的稀释复性中,加入摩尔量为5倍的游离小分子伴侣,可以使其复性效率提高将近10倍,该方法进而可应用于其它基因工程产物及抗体、疫苗等的复性之中。(本文来源于《浙江大学》期刊2003-01-01)

毛启龙,昌增益[10](2001)在《结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的分子伴侣作用机制》一文中研究指出很多疾病的发生都与蛋白质的聚集密切相关.分子伴侣是能够帮助其它蛋白质折迭的蛋白质.小分子热休克蛋白Hsp.16.3是存在于结核杆菌细胞膜上的主要抗原,具有分子伴侣活性,即抑制其它非天然底物蛋白聚集的能力.该蛋白与结核杆菌在巨噬细胞中的长期存活密切相关.体外实验表明是一个以叁个叁聚(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集》期刊2001-09-01)

小分子伴侣论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

TTC创建于1996年,目前已经在德国、英格兰、美国、新加坡等叁十多个国家有了业务往来。TTC燃油伴侣作为TTC公司所研制的全新产品,其具备有其他燃油添加剂所不具备的功能。文章主要介绍了TTC燃油伴侣所具备的功能,以期可以对TTC燃油伴侣有更加清晰的认识。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

小分子伴侣论文参考文献

[1].宋昀奚.几种小分子对铜伴侣蛋白CopC铜调控的影响[D].山西大学.2019

[2].陈尹.汽车燃油时代新革命—TTC燃油伴侣,小分子燃油催化剂[J].汽车实用技术.2018

[3].张金玲.分子伴侣及小分子伴侣、人工分子伴侣与蛋白复性[J].临床合理用药杂志.2009

[4].秦焱,王慧,昌增益.线虫中的小分子热休克蛋白HSP12.1具有类分子伴侣活性[J].生物化学与生物物理进展.2007

[5].贾长虹.人工伴侣与小分子添加剂协同辅助变性溶菌酶复性的研究[D].天津大学.2007

[6].关怡新,费峥峥,罗曼,姚善泾.小分子伴侣协助重组人γ-干扰素体外复性研究[J].生物化学与生物物理进展.2004

[7].付新苗.结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3调控分子伴侣活性的结构基础[D].清华大学.2004

[8].张佳艺,关怡新,姚善泾.小分子伴侣GroEL(191-345)在E.coli中的表达及其培养条件的优化[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2003

[9].张佳艺.小分子伴侣的制备及其协助基因工程蛋白体外重折迭的初步研究[D].浙江大学.2003

[10].毛启龙,昌增益.结核杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3的分子伴侣作用机制[C].中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集.2001

论文知识图

调控里氏木霉胞内铜代谢假想图(...中的线粒体蛋白质的转运一2小分子伴侣shtGroEL191一345叁...一4小分子伴侣纯化SDS一队GE电泳...一l小分子伴侣shtGroEL191一345氨...温度对最终菌浓及小分子伴侣表...

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

小分子伴侣论文_宋昀奚
下载Doc文档

猜你喜欢