羊口疮病毒青海QH02株ORF011基因的克隆、原核表达及鉴定

论文摘要

目的克隆羊口疮病毒QH02株ORF011基因并进行序列分析及原核表达、鉴定。方法提取羊口疮病毒QH02株的DNA,根据GenBank中（GU320351.1）的序列设计并合成引物,PCR扩增ORF011基因。将测序正确的序列用生物信息学软件对其基因及蛋白的结构进行预测,并将基因构建至pET-32a（+）原核表达载体,转化至大肠埃希菌BL21（DE3）,挑取阳性克隆测序正确后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-d-thiogalactoside, IPTG）诱导表达,经十二烷基硫酸钠-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE）、Western-blot验证重组蛋白反应原性。结果 PCR扩增得到1 137 bp的ORF011基因片段,重组蛋白在大肠埃希菌中以包涵体的形式存在,重组蛋白相对分子质量为60×103,且纯度较高,Western-blot检测结果表明目的蛋白具有较好的反应原性。结论构建的原核表达系统可以成功表达B2L蛋白,经Western-blot验证具有良好的反应原性,可作为羊口疮防控产品研发的候选分子。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 耿嘉谦,贾怀杰,陈国华,何小兵,房永祥,景志忠,王晓霞

关键词: 羊口疮病毒,基因,克隆,生物信息学分析,原核表达

来源: 中国病毒病杂志 2019年03期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 兰州大学公共卫生学院营养与食品卫生学研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

基金: 国家“十三五”重点研发计划项目(2016YFD0500907,2017YFD0500903),国家自然科学基金项目(81501734)

分类号: S852.654

DOI: 10.16505/j.2095-0136.2019.0030

页码: 188-194

总页数: 7

文件大小: 1376K

下载量: 65

相关论文文献

• [1].羊口疮病的诊断及防治[J]. 今日畜牧兽医 2019(01)
• [2].羊口疮病的诊断及防治[J]. 农家参谋 2019(10)
• [3].羊口疮病的诊断与防治对策分析[J]. 当代畜牧 2017(17)
• [4].羊口疮病的诊断与防治[J]. 当代畜牧 2017(23)
• [5].羊口疮病的诊断与防治[J]. 畜牧兽医科技信息 2018(06)
• [6].诊治山羊口疮病例[J]. 中国兽医杂志 2018(06)
• [7].一起羊口疮病的诊断与防治[J]. 中国畜禽种业 2018(09)
• [8].山羊口疮的治疗和预防[J]. 当代畜牧 2018(14)
• [9].关于羊口疮病的流行与综合防治分析[J]. 农民致富之友 2019(05)
• [10].羊口疮治疗和预防措施[J]. 畜牧兽医科学(电子版) 2019(08)
• [11].羊口疮病的诊断与防治对策[J]. 中国动物保健 2018(08)
• [12].羊口疮病毒大足株的分离鉴定[J]. 中国畜牧兽医 2019(12)
• [13].电子显微镜技术在羊口疮病毒研究中的应用进展[J]. 贵州畜牧兽医 2018(02)
• [14].南疆地区羊口疮的防控策略探讨[J]. 新疆畜牧业 2018(06)
• [15].羊口疮病的流行与综合防治研究[J]. 兽医导刊 2019(13)
• [16].羊口疮病的诊断与防治对策[J]. 中兽医学杂志 2018(02)
• [17].羊口疮病临床症状、诊断与防治措施[J]. 畜牧兽医科学(电子版) 2019(12)
• [18].羊口疮病毒的病原特性及诊断[J]. 畜禽业 2012(02)
• [19].羊口疮的免疫防治研究进展[J]. 中国兽药杂志 2019(05)
• [20].羊口疮病毒的研究进展[J]. 中国动物检疫 2008(11)
• [21].羊口疮病毒病的临床症状与防治[J]. 养殖技术顾问 2013(09)
• [22].羊口疮病毒环介导等温扩增高效检测方法的建立[J]. 中国兽医学报 2018(07)
• [23].羊口疮病的流行与综合防治分析[J]. 现代畜牧科技 2018(10)
• [24].羊口疮病毒与支原体肺炎混合感染的诊断与防治[J]. 中国兽医杂志 2020(05)
• [25].羊口疮病毒广东大浦株的分离鉴定及其遗传进化分析[J]. 中国兽医杂志 2017(12)
• [26].山羊口疮病毒的PCR诊断及防治[J]. 中国草食动物科学 2018(05)
• [27].羊口疮病的临床症状和鉴别诊断与防治措施[J]. 当代畜牧 2018(32)
• [28].羊口疮对奶山羊的危害及防治方法[J]. 中国畜禽种业 2019(10)
• [29].羊口疮的防治措施[J]. 中兽医学杂志 2017(05)
• [30].羊口疮病毒安徽株023基因的原核表达与生物信息学分析[J]. 浙江农业学报 2019(01)

标签：羊口疮病毒论文;  基因论文;  克隆论文;  生物信息学分析论文;  原核表达论文;