孙跃峰[1]2004年在《影响桃茎尖培养和子叶再生因子的研究》文中提出苹果套袋可促进果实着色，增加果面光洁度，降低农药残留，提高果品商品价值。除袋时期对套袋果实品质有重要影响。本研究于2002-2003年在渭北苹果产区扶风县对套双层纸袋的短枝红富士苹果进行了不同时期的除袋试验，从9月16日到10月10日共8次除袋时期。并对套袋和对照果实在贮藏期间测定了失重率、可溶性固形物、呼吸强度、花青苷含量及部分相关酶活性。其目的在于筛选渭北果区红富士苹果适宜的除袋时期和探讨套袋苹果的贮藏性能，为果业生产提供依据。研究结果表明：1.除袋时期对短枝红富士苹果外观品质有明显影响。9月20日~10月10日除袋，果实着色快，且随着除袋时间的推迟，果实着色逐渐加快。除袋过早，果实成熟度低，着色较慢；除袋过晚，光照强度不足，气温下降，着色不良。除内袋后6天内，果皮花青苷含量上升迅速，6~8天果面鲜红、光滑，此时采果商品性最好。除内袋10天后，果实外观品质逐渐下降。2. 不同时期除袋对红富士苹果的单果重和果形指数影响不明显。同时期采收的果实，随着除袋时期的推迟，果实硬度和可溶性固形物含量呈下降趋势，但差异不显着。说明套袋能在一定程度上降低果实的硬度和可溶性固形物含量。3. 渭北产区短枝红富士苹果适宜的除外袋时期为9月24日~10月10日，果实的最佳外观商品性采收期为除内袋后6~8天，由此推算除外袋的最佳时期为采收前10~12天，应根据市场需求情况先确定采收期，再根据采收期确定除袋期。4. 套袋对果实的耐藏性有一定影响：除袋后着色时间较短的果实在贮藏过程中花青苷易分解而使果皮变黄；套袋果在贮藏过程中乙烯的产生和呼吸高峰在一定程度上增大，但不影响到达呼吸高峰的时间；相对膜透性和MDA含量前期无差异，在贮藏4~5个月后套袋果高于对照果，经方差分析差异显着；5．套袋果易在后期发生褐变，和对照相比呈极显着水平，套袋果果皮保水能力差，失重率增大。由此看出套袋可降低果实的耐藏性，主要体现在呼吸、PPO和膜脂过氧化程度上。从硬度和PG酶活性上差异不显着。
高春媛[2]2008年在《影响油桃（Prunus persica var.nectarina）茎尖培养和胚轴再生因子的研究》文中研究说明桃的常规育种周期长、工作量大,且很难取得令人满意的结果。随着现代生物技术和基因工程的发展,可有目的地改良某些优良品种的不良性状,在较短时间内得到新品种,从而提高育种效果,而建立高效稳定的再生体系一直是桃基因工程发展所需要攻克的难题之一。本研究以早熟油桃品种华光、曙光以及中熟油桃品种秦光为试材,对影响其茎尖初代培养和继代增殖的主要因素进行试验,旨在为油桃茎尖快繁体系的建立提供更加精确的试验依据。还以秦光种胚胚轴为试材,对其进行离体培养,诱导获得了不定芽。并对下胚轴再生的愈伤组织进行抗氧化酶的测定分析,初步进行了不定芽再生在细胞水平上的研究。研究结果如下:1.华光、曙光和秦光叁种油桃茎尖培养最适宜的取材时期为新梢萌发期,试材为萌发新梢的顶端嫩芽,污染率低,利于成活。用75%酒精30s+0.1%升汞1min+饱和次氯酸钠5min对油桃茎尖进行消毒处理效果最好。2.茎尖初代培养适合的培养基组合为:华光和秦光G+6-BA 0.50 mg/L +IBA0.50mg/L,成活率分别为98.15%和72.34%;曙光G+6-BA 0.50 mg/L+IBA0.125 mg/L,成活率为91.72%。3.茎尖培养适合的增殖培养基组合为:华光和曙光G+6-BA 2.00 mg/L +IBA0.25mg/L ,增殖的平均有效芽数为2.36 , 2.89 ;秦光G+6-BA 1.50 mg/L +IBA0.50mg/L,增殖的平均有效芽数为3.16。4.中熟油桃秦光经过7天常温光下预培养所得下胚轴适宜做再生的外植体;下胚轴形态学上部再生能力较下部差异显着;下胚轴暗培养7—14天左右较适宜诱导产生愈伤组织,进而产生不定芽,平均不定芽数也较其他处理高。5.秦光油桃下胚轴再生以G+TDZ2.5mg/L+NAA0.5mg/L的培养基效果最好,再生率达到38.89%。6.秦光油桃下胚轴再生过程中,在愈伤组织分化不定芽的前期,SOD活性逐渐升高,14d时SOD活性达到最高值,随后SOD活性开始下降;而POD和CAT的活性在愈伤组织开始分化的前期迅速降低,在7-14天之间基本维持在相对稳定的水平。到不定芽生长后期,两者的活性又迅速上升。
岳海英[3]2007年在《影响油桃（Prunus persica var.nectarina）茎尖培养和胚轴再生因子的研究》文中进行了进一步梳理桃[Prunus persica (L.) Batsch]以其丰富的营养、鲜美的风味而倍受人们欢迎,但在桃育种工作中,常规育种周期长、工作量大,且很难取得令人满意的结果。随着现代生物技术和基因工程的发展,可有目的地改良某些优良品种的不良性状,在较短时间内得到新品种,从而提高育种效果,而建立高效稳定的再生体系一直是桃基因工程发展所需要攻克的难题之一。本文分别以油桃品种华光、曙光、秦光2#为试材,通过对影响茎尖培养的几个因子的研究,初步确立了茎尖培养的初代培养体系,并建立了以晚熟油桃秦光2#下胚轴为外植体的离体再生体系,在筛选培养基上培养秦光2#的有效愈伤组织,进行抗氧化酶的测定分析,并观察不同时期愈伤组织的发育状态,初步探讨不定芽诱导的再生途径。研究结果如下:1.在茎尖培养中,油桃茎尖的消毒以茎尖在75%酒精30s+0.1%升汞5min+饱和次氯酸钠溶液8min中消毒效果较好,且成活率较高,为68.4%。采芽接种最适宜期为2月中旬,接芽状态应为试材为未萌动的1年生枝,室温下进行催芽,待芽萌出小叶后再接种,污染率最低,利于生长分化。2.华光和曙光茎尖培养基为G+6-BA 0.25 mg/L+GA_3 1.00 mg/L+IBA 1.00 mg/L,诱导率分别为57.8%和42.6%;秦光为2#6-BA 0.50 mg/L+GA_3 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,诱导率较高为41.3%。3.在秦光2#种胚萌发试验中,蔗糖质量浓度在30 g/L糖浓度中萌发最高,达到75.66 %;同时,种胚经过在1 600 mg/L的GA溶液中处理24 h萌发率较高,可达到62.3 %;剥去种皮,进行5℃低温处理75d,能够提高胚培养萌发率,使其达到93.33 %。4.在秦光2#油桃的下胚轴再生试验中:下胚轴的上、中、下各部分再生能力逐渐下降;暗培养对胚轴再生的影响不显着;经过低温处理的种胚移至光下常温培养,7d时再生率最高,达到34.38%。5.下胚轴再生的最适培养为QL培养基,再生率达到31.0%,平均再生不定芽数为1.63个;在QL培养基上以TDZ 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L激素组合的下胚轴再生率最高,达到38.67%,平均再生不定芽数量最多,为2.50个。6.在秦光2#油桃体细胞胚发生过程中, SOD活性先升高后降低,POD和CAT恰好与之相反,其活性先降低后又逐渐上升。7.显微观察发现:在愈伤组织产生前期其细胞核小、细胞体积大、细胞质少、液泡化严重;接着细胞核变大,细胞排列分散;然后细胞变得比较松,可以看到有丝分裂;有不定芽点产生时,细胞中二细胞原胚产生和多细胞原胚产生;有不定芽产生时,细胞中开始有胚性细胞形成,产生球形胚。
田增胜[4]2005年在《早熟油桃（Prunus persica var. nectaria）茎尖快繁及胚轴再生技术研究》文中进行了进一步梳理本研究以早熟油桃(Prunus persica var nectaria)品种“华光”、“曙光”为试材,研究外源植物生长调节剂种类及其浓度组合、培养基类型、暗培养时间等因素对茎尖培养增殖效率和试管苗生根的影响;以“华光”、“曙光”不同发育时期的幼胚为试材,研究外源生长调节剂浓度及组合、培养基类型、胚发育时期、低温处理等因素对其胚轴再生的影响。通过试验确立了一套较为完整的早熟油桃茎尖培养快繁体系,并初步建立了早熟油桃胚轴再生体系。 “华光”油桃以G+TDZ 2.0mg/L+KT 1.5mg/L 或G+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0mg/L,为茎尖培养增殖培养基,其增殖率达到100%,平均每个外植体产生有效芽分别为17.5个和16.31个。“华光”油桃在1/2MS+IBA2.0mg/L的培养基上,不经过暗培养,其生根率就能达到100%,平均每个外植体产生有效根7.17 条;当IBA 浓度为2.4mg/L 时,经过9d 暗培养,每个外植体平均产生的有效根8.00条。 “曙光”油桃以G+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0mg/L 为茎尖培养增殖培养基,其增殖率达到100%,平均每个外植体产生有效芽9.93 个。“曙光”油桃在1/2MS+IBA 2.0mg/L 的培养基上,经过9d 暗培养,其生根率达到100%,平均每个外植体产生有效根7.17 条。 较长时间的暗培养(本试验中为>9d)试管苗容易黄化,不利于生根和生根后的幼苗的正常生长。使用较低浓度的IBA(<2.0mg/L)时,在产生的根上能够发生侧根;当IBA 浓度较高(本试验中使用2.4mg/L)时,茎段基部产生较多绿色致密愈伤组织,根由愈伤组织表面产生。 试验表明,74DAFB 是“华光”、 “曙光”油桃幼胚培养的较好时期,胚发育时期在60DAFB 时,胚较小,不易萌发;而当胚发育时期在81DAFB 时,胚已经开始败育,此时胚乳开始变褐,子叶变小或消失,幼胚亦不能萌发。剥去种皮,进行75d 的低温(5℃)处理,有利于幼胚的萌发。上下胚轴在不定芽发生能力上无显着差异。胚轴的形态学上部其再生率和每外植体再生不定芽数量均比下部高。暗培养对胚轴再生的影响不显着。在胚轴再生不定芽的诱导过程中,几乎所有的处理均能产生愈伤组织,其中部分为乳白色或淡黄色球粒状,质地疏松的胚性愈伤组织。产生的愈伤组织转接到附加IBA1.0mg/L+KT1.0 mg/L 的G 培养基中,在继代2～3 次后愈伤组织变褐死亡。 “华光”油桃的上胚轴在G+TDZ 3.0mg/L+KT 1.0mg/L+NAA 3.0mg/L 的培养基中再生率为23.43%, 平均每个外植体产生不定芽1.08 个;在QL+TDZ
赵胜利[5]2008年在《桃梨离体再生体系建立及试管苗种质保存研究》文中指出本试验以木本果树桃和梨的成熟种子、成年茎段为材料，进行桃梨的再生体系建立和离体种质保存研究。试验主要以山毛桃和鸭梨为主要研究对象，进行桃和梨离体再生体系的建立、试管苗离体保存研究，并利用火焰原子吸收分光光度计对桃正常苗与茎尖枯死苗微量元素含量差异分析，以期为桃梨的离体繁殖和离体种质保存提供科学依据。主要研究结果如下：1．桃离体再生体系建立。桃种子最佳消毒方法：75％酒精(30s)+0．1％的HgCl_2(5 min)+无菌水(24 h)+0．1％的HgCl_2(3 min)；种子去除种皮萌发率最高；芽苗的最佳增殖培养基为G+6-BA0．5 mg·L~(-1)+IBA0．2 mg·L~(-1)培养基；桃成年茎段在福州取材的最佳时期为秋季9-10月份，最佳诱导培养基为MS+6-BA1．0 mg·L~(-1)+NAA0．01 mg·L~(-1)。2．桃胚离体培养和种质保存研究。研究表明：桃胚培养苗顶端茎尖枯死在山毛桃、白凤、青州蜜桃等不同品种上普遍存在：培养基G上苗的枯死率小于MS、B5、White培养基；变温或适当低温可以减少或消除顶端茎尖枯死；培养基G附加蔗糖80 g·L~(-1)可以延缓发生时间或减少茎尖枯死的数量；低浓度的6-BA和GA_3能够延缓或减轻茎尖枯死的发生，随着浓度提高枯死率有上升趋势。桃试管苗生根可以延长保存时间，苗也比较健壮；桃最佳保存培养基为G+KT0．5 mg·L~(-1)+IBA0．2 mg·L~(-1)+30 g·L~(-1)蔗糖+6 g·L~(-1)琼脂。3．桃正常苗与顶端茎尖枯死苗子叶微量元素含量差异分析。利用火焰原子吸收分光光度计检测结果表明：在离体培养条件下茎尖枯死苗中铁的含量比正常苗子叶中的含量低，元素Cr的含量比后者高；在离体培养枯死苗子叶中Mn的含量比室外培养正常苗子叶的含量低，而Cu、Zn的含量比后者高；元素Cu和Zn在离体培养条件下死苗的子叶中的含量比未萌发种子中的含量低，而Cr的含量比后者高。4．梨高效再生体系的建立。研究结果表明：梨种子在离体培养时需去除种皮，最佳萌发培养基为MS+30 g·L~(-1)蔗糖+6 g·L~(-1)琼脂，发芽率为86．67％；最佳增殖培养基为L2培养基：MS+6-BA0．5 mg·L~(-1)IBA 0．1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1)，增殖系数为3．12；生根最佳诱导培养基为g3培养基：1／4 MS+NAA 0．3 mg·L~(-1)+IBAO g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1)，生根率为63．26％；生根数最佳诱导培养基为：1／2 MS+NAA0 mg·L~(-1)+IBA0．4 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6 g·L~(-1)，生根数为4．125条／株。5．梨试管苗离体种质保存。研究结果表明：利用光照强度500 lx、添加活性炭3 g·L~(-1)、大量元素减3／4、添加PP_(333) 10～15 mg·L~(-1)、琼脂+水的空白培养基、添加甘露醇10 g·L~(-1)结合30 g·L~(-1)蔗糖、添加琼脂8 g·L~(-1)、添加甘露醇60 g·L~(-1)、添加ABA0．5 mg·L~(-1)等方法对梨试管苗进行了保存，最好的已保存6个月，存活率在95％以上。
马常念[6]2012年在《叁种桃砧木耐涝性的生理基础及其茎尖培养技术的研究》文中研究指明目前,涝灾在自然灾害损失中所占的比例有增长的趋势,这在长江流域中下游平原地区显得尤为突出。桃树为蔷薇科不耐涝的果树树种之一,淹水往往会造成植株落叶、落果甚至死亡。我国南方桃产区的桃砧木主要是‘毛桃’,但其耐涝性甚差。因此,涝害已成为南方多雨地区桃产业发展的主要制约因素之一。本试验以‘砧选1号’、‘东溪小仙桃’和‘毛桃’为试材,通过观察淹水条件下叁种桃砧木的形态特征、涝害指数分析其耐涝性,并对根系活力、叶绿素含量、膜脂过氧化产物、超氧化物酶和过氧化氢酶等生理指标进行测定,分析了叁种桃砧木对淹水的耐受性和生理反应。并在此基础上,以上述叁种材料茎段为外殖体进行桃茎尖培养,研究了不同消毒处理、不同基本培养基、植物激素的种类和浓度对初代、继代和生根培养的影响,从而完成了对初代、继代和生根培养基的筛选,初步建立了叁种桃砧木茎尖培养体系。主要研究结果如下：1.淹水过程中,‘砧选1号’受害症状较轻,且涝害指数低于其余二者,耐涝性最强,‘东溪小仙桃’中等,‘毛桃’对涝害反应敏感。观察发现,‘毛桃’第3天少量叶片开始萎焉,第5天时,叶片开始卷曲,下部叶片有小部分脱落,第7天时,‘毛桃’叶片出现枯萎,下部叶片大量脱落；‘东溪小仙桃’第5天时下部叶片出现少量萎焉,第7天时,出现少量叶片卷曲；‘砧选1号’第7天时出现少量叶片萎焉,出现轻度受害症状。叁种桃砧木在淹水条件下的生理指标的差异与砧木的耐涝性有关,淹水过程中,叁者根系活力、叶绿素含量和叶绿素荧光参数随着淹水时间的延长都呈下降趋势,其中,耐涝性强的‘砧选1号’的降低幅度要小于‘东溪小仙桃’和‘毛桃’；叶片细胞膜透性和膜脂过氧化产物丙二醛含量的变化随着胁迫时间的延长呈递增的趋势,与‘毛桃’和‘东溪小仙桃’相比,‘砧选1号’的增加幅度最小；叁种桃砧木叶片超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性总体呈先升后下降的趋势,其中‘砧选1号’的两种保护酶活性都保持较高水平。2.通过对初代、继代和生根培养中不同影响因子的筛选,初步建立了叁种桃砧木茎尖培养体系。初代培养中,适宜的消毒方法为75%酒精30s+0.1%HgCl23min无菌水冲洗4-5次；外殖体取自植株中部成活率最低,尖端较高,植株下部成活率最高；‘毛桃’合适的IBA浓度为0.5mg/L,‘东溪小仙桃’和‘砧选1号’的IBA浓度为0.2mg/L；继代培养中,‘毛桃’和‘砧选1号’组合为6-BA1.5mg/L+IBA0.2mg/L,‘东溪小仙桃’组合为6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L;生根培养中,1/2MS基本培养基对嫩梢生根诱导效果最好,‘毛桃’和‘砧选1号’适宜的生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L,‘东溪小仙桃’为1/2MS+IBA0.5mg/L.
田国栋[7]2011年在《影响桃（Prunus persica（L.）Batsch）胚轴和叶片再生因子的研究》文中研究说明高效稳定的再生体系是进行转基因技术的基础,但桃属于李属(Prunus spp. )果树中离体再生较困难的树种,影响再生的因子成为研究关键。本研究以桃品种‘秦蜜’、‘沙红’、‘甜桃王’、‘金童5号’和‘97-8-4’(京玉×早红2号)下胚轴为外植体,研究不同基因型、基本培养基及植物生长调节剂组合对下胚轴离体再生不定芽的影响;并以桃品种‘布目早生’、‘甜桃王’、‘瑞江’和‘97-8-4’(优系)、继代培养的试管苗叶片为试材研究影响桃叶片再生不定芽的因子。主要结果如下:1.不同品种的桃下胚轴再生率不同,基因型差异明显。相同培养条件下‘甜桃王’、‘金童5号’和‘97-8-4’的再生率均显着高于‘秦蜜’和‘沙红’。2.基本培养基及生长调节剂对桃下胚轴再生有较大影响。‘甜桃王’、‘金童5号’和‘97-8-4’均在LP培养基中的再生率和不定芽数最高,MS培养基次之,G培养基的再生效果最差;下胚轴再生时,植物生长调节物质使用2.0 mg/ L BA配合0.02 mg/ L NAA再生效果较好,‘甜桃王’、‘金童5号’和‘97-8-4’的下胚轴再生率分别达到65.79%、68.44%和68.98%。3.基因型对桃叶片愈伤组织的诱导和不定芽再生有很大影响。‘97-8-4’和‘甜桃王’叶片愈伤组织诱导率均可达100%,不定芽再生率也较高,分别达18.33%和16.67%;‘布目早生’再生率较低,为10%;‘瑞江’不能再生出不定芽。4.最适于愈伤组织诱导的基本培养基为MS,最适于不定芽再生的基本培养基为LP。‘97-8-4’叶片在MS、LP和G叁种培养基中均可诱导出愈伤组织,且MS中的诱导率最高,LP次之,但在LP中不定芽再生率最高,可达18.33%,显着高于MS和G。5.不同成熟度的叶片再生不定芽的能力不同,完全展开的嫩叶愈伤组织诱导效果最好,不定芽再生率也最高,分别达96.67%和18.33%。未完全展开的嫩叶愈伤组织诱导率较高,达83.33%,可以再生出不定芽。未展开的嫩叶和较成熟的叶片愈伤组织诱导率低,且均不能再生出不定芽。6.叶片不同部位产生不定芽的能力不同,叶柄不定芽再生率最高,叶片基部和叶片中部次之,叶片上部不能再生出不定芽。7.细胞分裂素浓度一定时,随着NAA浓度的升高,叶片愈伤组织诱导率和每个叶片产生的愈伤量总体也呈上升趋势,浓度越高愈伤结构越致密。8.叶片暗培养时最适的生长调节剂组合为2.0 mg/ L BA+ 0.2 mg/ L NAA;光培养时最适的生长调节剂组合为4.0 mg/ L BA+ 0.1 mg/ L NAA或6.0 mg/ L BA+ 0.2 mg/ L NAA。‘97-8-4’、‘甜桃王’和‘布目早生’完全展开的嫩叶在最适培养条件下的不定芽再生率分别为18.33%,16.67%和13.33%。
康卓慧[8]2010年在《桃（Prunus persica（L.）Batsch）子叶和下胚轴再生体系的建立》文中提出本研究以不同成熟期的桃子叶为外植体,研究发育期、品种、植物生长调节剂、黑暗处理等因子对子叶离体再生不定芽的影响;并以桃下胚轴为外植体,研究不同基因型、不同基本培养基及植物生长调节剂组合等对下胚轴离体再生不定芽的影响,建立并优化了桃子叶和下胚轴再生体系,为今后进行遗传转化工作奠定了基础。主要研究结果如下:1.发育期和基因型对桃子叶再生有显着影响。早熟品种‘燕红11’、‘中油4号’和‘双喜红’在盛花期后76天的子叶再生率最高,分别为31.25%、75%和64.58%;中熟品种‘沙红’、‘香珊瑚’和‘瑞光28’在盛花期后80-84天子叶再生率最高,分别为50%,47.92%和20.83%;晚熟品种‘甜桃王’、‘深州红蜜’和‘中油8号’在盛花期后80～84天子叶再生率最高,分别为47.92%、43.75%和54.17%。除‘深州红蜜’子叶在PF为0.6时再生率最高以外,其余品种均在PF为0.7-0.8时子叶再生率最高。不同品种的子叶再生率存在明显差异,‘中油4号’和‘双喜红’子叶再生率高,而‘瑞光28’和‘燕红11’再生率低。2.生长调节剂对桃子叶再生有重要影响。适宜桃子叶再生不定芽的生长调节剂组合为2.0 mg/ L TDZ配合使用0.01～0.04 mg/ L NAA或0.1 mg/ L IBA。‘双喜红’在MS + 2.0 mg/ L TDZ + 0.04mg/ L NAA的培养基中再生率最高,可达64.58%;‘沙红’在MS + 2.0 mg/ L TDZ + 0.1 mg/ L IBA培养基中再生率最高,为56.25%;‘深州红蜜’在MS + 2.0 mg/ L TDZ + 0.01mg/ L NAA的培养基中再生率最高,为45.83%。子叶再生的最佳黑暗培养时间为10天。子叶近胚芽处不定芽发生能力强,而远胚芽的划伤处鲜有不定芽产生。3.不同基因型桃下胚轴再生率差异显着。在相同的培养条件下‘97-8-4’的下胚轴再生率高达90.74%,每个外植体再生的不定芽数也最多;其次为‘甜桃王’和‘金童5号’,二者的下胚轴再生率较高,分别为75.49%和72.60%;‘深州红蜜’、‘秦蜜’和‘华光’再生率较低,分别为64.45%、36.94%和31.11%。4.基本培养基及生长调节剂对桃下胚轴影响较大。QL为‘97-8-4’和‘甜桃王’不定芽再生的最适基本培养基,MS为‘金童5号’不定芽再生的最适基本培养基。下胚轴再生时,植物生长调节物质使用2.0 mg/ L BA配合0.04 mg/ L NAA或单独使用2.0 mg/ L BA的再生效果好。‘97-8-4’下胚轴在QL+2.0 mg/ L BA+0.04 mg/ L NAA +100 mg/L肌醇的培养基中再生率最高,为94.44%;‘甜桃王’下胚轴在QL + 2.0 mg/ L BA + 0.04 mg/ L NAA +100 mg/ L肌醇+ 500 mg/ L CH的培养基中再生率最高,为80.42%;‘金童5号’下胚轴在QL + 2.0 mg/ L BA + 0.04 mg/ L NAA + 200 mg/ L肌醇的培养基中再生率最高,为78.00%。5.在QL + 1.0 mg/ L BA +0.04 mg/ L NAA的增殖培养基中,‘甜桃王’、‘金童5号’和‘97-8-4’的不定芽增殖系数均可达4～5,不定芽在1/2 QL +1.0 mg/ L NAA的培养基中进行生根培养,生根率可达70%以上。
齐贤[9]2015年在《叁种基因型桃不同外植体再生能力初探》文中提出桃是我国重要的经济树种。传统桃树育种由于受到育种周期长、工作量大等因素的限制导致进程缓慢。现代生物技术,尤其是植物组织培养和基因工程的发展,为快速进行桃性状改良提供了可能。高效稳定的再生体系是进行转基因技术的基础,但是桃属于李属(Prunus SPP.)果树中离体再生比较困难的树种,影响再生的因素成为研究的关键,基因型、植物生长调节剂、基本培养基、培养条件等均对桃的再生有影响。本研究以‘黄水蜜’、‘秋蜜红’和毛桃田间材料初代培养的叶片及胚培苗的茎段、叶片、子叶、上胚轴为外植体,建立桃不同外植体再生体系,为桃遗传转化研究奠定基础。主要研究结果如下:1.叁种基因型桃无菌材料的获得本试验研究了取材时期和接芽状态、灭菌方法和培养基四个方面对初代培养的影响,结果表明:采芽接种最适宜的时期为4月下旬;将‘黄水蜜’露出5~7片叶的腋芽的茎段用升汞处理6 min后,接种到MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L中得到最低污染率和最高萌芽率分别为11.1%和为58.7%;将‘秋蜜红’刚抽生嫩梢的茎段用升汞处理7 min后,接种到MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L中得到最低污染率和最高萌芽率分别为16.7%和24.3%;将毛桃露出5~7片叶的腋芽的茎段用升汞处理7 min后,接种到MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L中得到最低污染率和最高萌芽率分别为19.4%和55.7%;2.叁种基因型桃不同外植体离体再生的研究(1)茎段离体再生以‘黄水蜜’桃胚培苗茎段为外植体,探讨了不同植物生长调节剂质量浓度组合对不定芽诱导过程中愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,并采用两步生根法研究不同植物生长调节剂种类对不定根诱导的影响。结果表明,适合‘黄水蜜’桃胚培苗茎段切口处愈伤组织再生的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L,不定芽再生的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L,其愈伤组织形成率和不定芽再生率分别为85%和47%;获得的不定芽先后经WPM+ZT 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+GA3 0.5 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L两步生根法培养后,不定根再生率为50%,平均根数为5.00。初步建立了‘黄水蜜’桃胚培苗茎段再生体系,为桃遗传转化研究奠定基础。(2)叶片离体再生本试验研究了不同植物生长调节剂对桃叶片愈伤组织形成率的影响,试验结果表明:诱导初代培养桃叶片产生愈伤组织的最佳培养基为MS+ZT 3.0 mg/L+2,4-D 0.6 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L,其中毛桃、‘黄水蜜’和‘秋蜜红’,愈伤组织形成率最高分别可达93.3%、70.0%和47.7%,褐化率最低分别为37.3%、50.3%和48.0%;本试验研究了不同植物生长调节剂对‘黄水蜜’、‘秋蜜红’和毛桃叁种不同基因型胚培苗叶片愈伤组织形成率和愈伤组织形态的影响,结果表明:愈伤组织形成率可达100%,根据愈伤组织形态得出胚培苗叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+ZT 4.0 mg/L+2,4-D0.8 mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L;(3)子叶离体再生取培养45 d左右的‘黄水蜜’、‘秋蜜红’和毛桃叁种不同基因型胚培苗子叶,横切2~3刀,远轴面接触培养基接种至MS+NAA 0.1 mg/L+TDZ 2.0 mg/L+Ag NO3 0.5mg/L培养基,培养45 d后发现只有‘秋蜜红’部分子叶切口处产生不定芽;(4)上胚轴离体再生取培养45 d左右的‘黄水蜜’、‘秋蜜红’和毛桃叁种不同基因型胚培苗,每个胚培苗切取1~2个上胚轴切段,切成1~2 cm长的切段,接种至MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 2.0mg/L+Ag NO3 0.5 mg/L的培养基中,培养30 d左右发现只有‘秋蜜红’切口处部分芽点生长成为不定芽。
李佳莹[10]2009年在《叁种桃离体再生体系建立及内源激素含量的变化研究》文中进行了进一步梳理本文以红花山桃、筑波5号、光核桃为试材,在建立稳定高效的桃离体快繁体系的基础上,同时建立了以红花山桃胚轴、子叶、增殖叶片、再生叶片为外植体的离体再生体系,并对其再生过程中内源激素含量的变化进行了分析,以期探讨内源激素的作用机制并对桃组织培养中外源激素的合理添加提供理论依据。主要结果如下：1.建立并优化了以红花山桃、筑波5号、光核桃茎段为外植体的离体快繁体系。结果表明：最佳外植体消毒方法为75%酒精浸洗30s,0.1%HgCl2+吐温浸洗7min,清水冲洗6次；红花山桃最佳取材时间3-4月,筑波5号最佳取材时间4-5月,光核桃最佳取材时间3-5月；叁种桃的最佳取材部位为树冠下部；红花山桃和光核桃最佳继代增殖培养基为LP+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L,筑波5号最佳最佳继代增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L;红花山桃和光核桃适宜的生根培养基为1/2MS+IAA1.0mg/L+NAA1.0mg/L,筑波5号生根困难。2.以红花山桃胚轴、子叶、增殖叶片、再生叶片为外植体,了解影响桃再生的因素,初步建立了桃再生体系。试验表明：红花山桃胚轴的形态学上部其再生率和外植体再生不定芽平均数量均比下部高。将胚轴接种至再生培养基LP+TDZ3.0mg/L+NAA0.1mg/L,暗培养7d后转入光下培养,胚轴再生率可达46.53%；将子叶预培养21d,接种至再生培养基MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.5mg/L,子叶再生率可达30.76%；将1.0-2.0cm的增殖叶片远轴面接触再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+NAA0.05mg/L+葡萄糖,暗培养21d后转入不含生长素的再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+葡萄糖,光下培养,增殖叶片再生率可达29.70%,不定芽平均再生数为1.87；将1.0-2.0cm的再生叶片远轴面接触再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+NAA0.05mg/L+葡萄糖,暗培养21d后转入不含生长素的再生培养基LP+TDZ3.5mg/L+葡萄糖,光下培养,再生叶片再生率可以达到36.34%,不定芽平均再生数为2.18。3.酶联免疫吸附法测定桃离体培养过程中不同发育阶段各外植体内源激素含量变化的研究,明确了影响桃不定芽再生的内源激素。结果表明：不同桃组培苗的内源激素含量不同,含量高的桃(如红花山桃)具有较高的增殖系数；GA和IAA共同作用促进愈伤组织的生长；不定芽的分化与ZR/IAA的比例有密切关系,ZR/IAA的比值大有利于诱导芽的分化。
参考文献：
[1]. 影响桃茎尖培养和子叶再生因子的研究[D]. 孙跃峰. 西北农林科技大学. 2004
[2]. 影响油桃（Prunus persica var.nectarina）茎尖培养和胚轴再生因子的研究[D]. 高春媛. 西北农林科技大学. 2008
[3]. 影响油桃（Prunus persica var.nectarina）茎尖培养和胚轴再生因子的研究[D]. 岳海英. 西北农林科技大学. 2007
[4]. 早熟油桃（Prunus persica var. nectaria）茎尖快繁及胚轴再生技术研究[D]. 田增胜. 西北农林科技大学. 2005
[5]. 桃梨离体再生体系建立及试管苗种质保存研究[D]. 赵胜利. 福建农林大学. 2008
[6]. 叁种桃砧木耐涝性的生理基础及其茎尖培养技术的研究[D]. 马常念. 南京农业大学. 2012
[7]. 影响桃（Prunus persica（L.）Batsch）胚轴和叶片再生因子的研究[D]. 田国栋. 西北农林科技大学. 2011
[8]. 桃（Prunus persica（L.）Batsch）子叶和下胚轴再生体系的建立[D]. 康卓慧. 西北农林科技大学. 2010
[9]. 叁种基因型桃不同外植体再生能力初探[D]. 齐贤. 河南农业大学. 2015
[10]. 叁种桃离体再生体系建立及内源激素含量的变化研究[D]. 李佳莹. 南京农业大学. 2009
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