导读:本文包含了纳米金棒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:光热效应,纳米金棒,远程调控,杀菌剂
纳米金棒论文文献综述
李蔚[1](2019)在《近红外响应型纳米金棒-酶体系介导的光热效应与应用》一文中研究指出酶是一类具有催化活性的生物大分子,其化学本质为蛋白质或RNA,对底物具有高度特异性和高度催化活性。酶的活力容易受到多种因素的影响,如温度、pH值、抑制剂等,因此限制了其在工业和医学等领域的应用。按照酶的最适温度,可将其分为嗜冷酶、嗜温酶和嗜热酶。其中,嗜温酶虽然稳定性较差,不易保存,使用范围受到限制,但是来源广泛,易于获得;嗜热酶具有较高的催化能力和热稳定性。研究人员通过对酶分子进行突变和修饰来提高酶的催化性能。纳米材料作为一种新兴材料受到广泛的关注和研究,大量的研究中已经利用纳米材料迥异于宏观物质的特性改善酶的催化活力。纳米材料最为引人注目的一个特点是光热效应。光热效应是指光热材料受特定波长的光照射后,光子能量不直接改变材料内部电子状态而是使材料晶格振动加剧,最终导致温度上升的电学特性。目前已知具有光热效应的纳米材料主要可分为四类:贵金属纳米材料,如纳米金、纳米银等;碳类纳米材料,如石墨烯等;过渡金属硫族化合物纳米材料,如CuS等;有机染料纳米材料,如吲哚菁绿等。利用纳米材料的光热效应调节酶活并使酶的应用领域得到拓展已成为一个新的研究热点。此外,基于纳米材料光热效应的光热治疗目前已经被作为一种非侵入式的、无毒副作用的治疗手段应用于癌症治疗的研究中,光热治疗可以通过诱发局部高温选择性消除肿瘤细胞。光热材料纳米金粒子由于其独特的表面等离子共振效应,已经广泛应用于靶向药物运载、光热治疗、生物成像和生物探针等领域。在本文中,通过自组装的方式将不同种类的酶修饰于纳米金棒上,利用光热效应来调节和激发酶的催化活性并将其用于工业催化和生物医学等领域。主要结果概括如下:1.本研究将脂肪酶(PPL)与纳米金棒偶联合成复合物(enzyme-conjugated GNRs complexes,EGCs),探究光照加热与传统水浴加热两种不同加热方式对酶活的影响。尽管两个体系整体温度相同,但EGCs较游离酶显示出了更快的催化速率。基于此,本文提出了一种微观环境下由局部高温和固定化导致酶的构象改变并提高酶活的假说模型。此外,EGCs也具有了更高的长时稳定性和可重复利用性。本研究将EGCs应用于Aldol反应的催化中,高效液相结果表明反应时间极大缩短,这说明EGCs具有工业应用的潜力。2.由群体效应调控产生的生物被膜和外毒素分别是导致细菌耐药性和致病性的主要因素。鉴于生物被膜的主要成分和外毒素的本质都是蛋白质,本研究构建了菠萝蛋白酶偶联的纳米金棒(protease-conjugated GNRs,PGs)。在近红外光照条件下,PGs可以通过破坏细胞壁有效杀伤大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,降解已经形成的生物被膜和细菌外毒素。在无光照条件下,PGs也可以抑制细菌生长,同时抑制生物被膜和外毒素的形成。因为金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性菌,细胞壁结构成分中肽聚糖的比例较高,所以PGs对于金黄色葡萄球菌的杀伤效果比大肠杆菌更为明显。此外,由于金黄色葡萄球菌群体效应的信号分子为多肽类小分子,抑制群体效应在治疗和预防细菌感染引起的炎症中具有潜在的研究价值和应用价值。最后,PGs能够破坏细菌DNA和蛋白质,避免耐药基因的扩散。3.为了靶向阿尔茨海默症多病因进行治疗,本研究设计了抗体和嗜热酰基氨肽酶双偶联的纳米金棒(GNRs-APH-scFv,GAS)复合物。在近红外光的激发下,GAS在酶的作用下有效降解Aβ单体,抑制其纤维化进程从而减少毒性更高的Aβ寡聚体和纤维的产生;另一方面,在抗体和光热效应的双重作用下,寡聚体和纤维被解聚为单体,再由嗜热酶进行清除。这样就可以实现各种形态Aβ的高效清除。GAS可以减少由Aβ介导产生的ROS,提高细胞存活率。同时,在抗体的靶向作用下,纳米金棒可以作为生物探针检测Aβ的纤维化进程。体内研究表明,GAS能够缓解Aβ的毒性,延滞瘫痪发作,延长CL4176转基因线虫的寿命。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01)
孔玉方[2](2018)在《广州管圆线虫功能化纳米金棒抗原筛选及血清学诊断的基础研究》一文中研究指出目的制备广州管圆线虫幼虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、成虫粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒,筛选广州管圆线虫功能化纳米金棒诊断抗原及最适宜浓度,证实功能化纳米金棒能够检测早期或低度感染的广州管圆线虫血清抗体。方法1.金晶种子生长法聚合径长比可控的纳米金棒。2.液氮研磨法制备广州管圆线虫幼虫粗抗原和成虫粗抗原、RPMI-1640培养法制备排泄分泌粗抗原、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)制备幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原。巯基化粗抗原、纯化抗原与纳米金棒结合,制备功能化纳米金棒。采用紫外分光光度计扫描,通过比较表面等离子共振吸收峰的红峰移位大小,优选出功能化纳米金棒最适包被浓度。3.广州管圆线虫功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度及不同稀释度的大鼠血清抗体,根据表面等离子共振吸收峰红峰移位的变化筛选出广州管圆线虫的优势诊断抗原。4.广州管圆线虫功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度、不同稀释度血清抗体与ELISA检测的结果进行比较,探索功能化纳米金棒检测的敏感性和灵敏度。结果1.成功制备广州管圆线虫幼虫粗抗原、成虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒,并优选其最适包被浓度和对应的最大红峰移位:幼虫粗抗原包被浓度为30μg/mL,对应纵向等离子共振(LSPR)吸收峰最大红峰移位为35nm;成虫粗抗原最适包被浓度为40μg/mL,对应最大的红峰移位为35nm;排泄分泌粗抗原包被浓度为30μg/mL,包被前后表面等离子共振吸收峰出现了最大红峰移位为35nm;幼虫纯化抗原最优蛋白分子量为43kD,相应的抗原浓度为20μg/mL时,包被前后表面等离子共振吸收峰出现了最大程度的红移为25nm;成虫纯化抗原最优蛋白分子量为45kD,对应的抗原浓度为10μg/mL时,相应的LSPR吸收峰最大程度的红峰移位为40nm。2.广州管圆线虫幼虫粗抗原、成虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度的血清抗体,均可识别不同感染度第5d血清抗体为阳性,最低感染量为50条Ⅲ期幼虫。在轻度感染时比大鼠血清抗体ELISA试剂盒提前9d检测到阳性血清抗体,在中、重度感染时比大鼠血清抗体ELISA试剂盒提前2d检测到阳性血清抗体。其中成虫纯化抗原功能化的纳米金棒识别广州管圆线虫早期感染血清抗体的敏感性更高,比传统ELISA检测法灵敏度高,检测大鼠阳性血清抗体最大稀释度可达1:600。结论获得晶种生长法径长比可控、产量高的纳米金棒;优选出广州管圆线虫优势诊断抗原为成虫纯化抗原;广州管圆线虫粗抗原功能化纳米金棒抗原制备简单,成本低,检测血清抗体敏感性好,特异性强,比传统的ELISA法更具有检测抗体时间早、稀释度高、感染度低的优势,为广州管圆线虫病感染早期及低度感染检测提供全新的思路和技术支持。有望应用于动态流行病学调查和临床试剂盒的研发。(本文来源于《大理大学》期刊2018-05-04)
王楠[3](2018)在《肢体液滴、纳米金棒、聚集诱导发光染料在液晶中的自组织及其光学表征》一文中研究指出“物以类聚,人以群分”这句话揭示了物与人总是按照一定的规律去结合与运动的,这便是自组织的含义。自组织现象在自然界中无处不在,原子、分子构成宏观物质,晶体的生长,各种生物体的形成等等。人们利用自组织现象可以使材料自发地形成人们所期望的结构,这等快事岂不美哉!在诸多自组织的方法中,以液晶为媒介的自组织是一种简便、优良的方法。这是因为液晶的结构具有不同程度的有序性,并且液晶中存在各向异性的弹性力。外来物在液晶中会受到液晶的弹性作用而自组织成为各种各样的有序结构。本文所研究的便是各种外来物在液晶中的自组织,按外来物尺寸的不同进行划分,本文的研究分为以下叁部分:第一,微米、亚微米尺度的胶体液滴在液晶中的自组织。胶体液滴在液晶中受到液晶各向异性的弹性力作用,既可以形成晶格结构——即胶体晶体;也可以形成具有分形特征的分叉结构。通过类比静电学中的偶极矩、四极矩等概念,可以解释胶体液滴各种结构的成因。胶体液滴所形成的各种规则结构有助于人们理解原子、分子等如何通过静电作用相互结合形成复杂的结构。第二,尺寸为几十纳米的纳米金棒在液晶中的自组织。以液晶为媒介使纳米金棒在大范围内按特定方式排列是实现纳米金棒自组织的一种方式。将纳米金棒排列成特定的结构可以制作光学超材料,实现负折射率、超透镜、隐身衣等。本文研究了纳米金棒在溶致液晶与热致液晶中的自组织,并将纳米金棒排列成为多种结构,在热致液晶中的纳米金棒还可以通过外加电场进行调谐。第叁,分子尺度的有机染料分子在液晶中的自组织。染料分子在液晶中的自组织的典型例子是掺杂染料的液晶激光器。本文使用聚集诱导发光染料作为液晶激光器的增益介质。将聚集诱导发光染料的特性与液晶中的缺陷结构相结合,解决了传统染料在液晶中存在的“荧光聚集猝灭”问题。同时,聚集诱导发光染料作为液晶激光器的增益介质,可以提高激光器的抗漂白性。(本文来源于《浙江大学》期刊2018-04-01)
宋丽平[4](2017)在《介孔二氧化硅包覆的纳米金棒在生物检测和光热治疗中的应用》一文中研究指出纳米金棒(AuNRs)作为贵金属纳米粒子中形貌独特的一种,由于其独特的局域等离子共振(LSPR)特性及其衍生出的光热效应,被广泛应用于传感检测及癌症治疗等方面。然而,由于AuNRs表面官能团单一、生物毒性强、比表面积小等缺陷,限制了AuNRs的应用。本文利用生物相容的介孔二氧化硅对AuNRs表面进行修饰,在改善AuNRs性能的同时扩展在生物检测及癌症治疗中的应用。将AuNRs与介孔二氧化硅(Si O_2)结合,本文的研究工作主要分为以下几个方面:(1)基于AuNRs@Si O_2复合材料构建等离子共振(LSPR)传感器,用于检测大肠杆菌。以稳定AuNRs的表面活性剂十六烷基叁甲基溴化铵(CTAB)为模板,在AuNRs表面沉积介孔二氧化硅层,通过调控CTAB的浓度和正硅酸四乙酯(TEOS)加入量,合成了不同厚度的介孔二氧化硅层包覆的AuNRs。通过改变周围环境折射率,对不同厚度的AuNRs@Si O_2复合材料的灵敏度进行了评估,实验证明较薄厚度的AuNRs@Si O_2复合材料的灵敏度更高,最高可达390 nm/RIU。将具有最优灵敏度的AuNRs@Si O_2复合材料用于大肠杆菌的检测,实验结果表明大肠杆菌浓度与AuNRs@Si O_2复合材料的等离子共振峰的位移呈现线性关系,并且,检测限可达10CFU,灵敏度相对于传统方法高出了两个数量级,为大肠杆菌的量化以及高灵敏地检测大肠杆菌奠定了基础。(2)基于温敏性高分子包覆的AuNRs@Si O_2复合材料可控药物释放平台。通过自引发光接枝光聚合(SIPGP)的方法,将温敏性的嵌段共聚物p(NIPAM-co-AAm)接枝到AuNRs@Si O_2复合结构的表面。纳米金棒本身的光热效应为该体系用于光疗化疗结合杀死癌细胞提供了基础,介孔二氧化硅的存在在提高稳定性和生物相容性的同时大幅提高了载药量,温敏性聚合物赋予了该复合结构开关响应性能。为了深入探究该复合体系的药物可控释放性能,以盐酸阿霉素(DOX)为模型药物,通过该体系在体外的药物释放性能研究发现,在不同的温度和p H刺激下,DOX的缓释性能呈现出明显的差别。并且,为了进一步研究其开关响应性能,通过外加近红外光源的刺激发现,同等时间内相对于无激光刺激,DOX的缓释量明显增大。这为解决传统可控缓释难的问题、实现细胞内开关响应药物缓释性能提供了研究基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2017-06-01)
曹颖[5](2017)在《纳米金棒标记旋毛虫诊断抗原的筛选及应用于血清学诊断的研究》一文中研究指出目的:利用纳米金棒具有独特的光学特性、合成稳定分散均匀、表面活性很高,易与其他原子结合,能够敏感、高效的检测待测样品的特点,制备不同径长比纳米金棒溶液,确定制备表面等离子共振波长最大的纳米金棒生长液的浓度和量。筛选出纳米金棒表面标记旋毛虫诊断的最佳抗原及最适宜浓度,使功能化的纳米金棒标记技术的灵敏性明显提高,可应用于旋毛虫感染血清抗体的早期或低度感染检测,为旋毛虫病早期快速检测提供新技术奠定实验基础。方法:1.改变生长液中十六烷基叁甲基溴化铵(CTAB,cetyl trimethy ammonium bromide)、抗坏血酸(AA,ascorbic acid)、硝酸银(AgNO3,silver nitrate)的浓度和剂量,制备不同表面等离子共振吸收峰的纳米金棒,紫外分光光度计扫描纳米金棒表面等离子共振波长。2.胃蛋白酶消化法制备旋毛虫肌幼虫粗抗原、RPMI-1640培养法制备排泄分泌抗原,粗抗原、排泄分泌抗原表面标记纳米金棒,紫外分光扫描表面等离子共振波长,对比表面等离子共振吸收峰红峰移位,筛选纳米金棒表面标记的最佳抗原和最适应浓度。3.纳米金棒表面标记旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原分别检测旋毛虫感染小鼠不同稀释度、不同时间、不同感染程度的血清抗体,与小鼠血清抗体ELISA检测试剂盒检测结果进行对比,评价纳米金棒标记技术效果。结果:1.成功的利用金晶种子生长方法制备了不同表面等离子共振吸收峰的纳米金棒,生长液中CTAB量为11.875 mL浓度为0.2 M、抗坏血酸量为160μL浓度为100 mM、硝酸银量为150μL浓度为10 mmol/L、金晶种子液为108μL,纳米金棒紫外分光光度计吸收光谱值最大,径长比最大,溶液均匀稳定。2.成功的在纳米金棒表面标记不同浓度旋毛虫肌幼虫粗抗原和排泄分泌抗原,紫外分光光度计光谱扫描结果显示表面等离子共振吸收峰红峰移位最大值分别为8 nm和87 nm。3.纳米金棒标记法检测旋毛虫感染小鼠阳性血清抗体最大稀释度为1:800,血清抗体阳性最早出现在感染后第5天,最低感染量为50条旋毛虫感染。小鼠血清抗体ELISA试剂盒检测旋毛虫感染小鼠阳性血清最大稀释为1:700,血清抗体阳性最早出现在感染后第8天,最低感染量为100条旋毛虫感染。结论:1.成功的利用金晶种子生长法制备了不同径长比且能够作为抗原标记功能的纳米金棒。2.纳米金棒表面标记优先筛选最佳抗原为旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原,其最适宜浓度为20μg/mL。3.纳米金棒标记技术能够用于旋毛虫血清学检测,较小鼠血清抗体ELISA检测试剂盒检测抗体稀释度高、时间早、感染程度低,能够为旋毛虫病感染早期及低感染度检测提供新技术。(本文来源于《大理大学》期刊2017-05-29)
李家萌[6](2017)在《纳米金棒的优化聚合及应用于血吸虫病检测的基础研究》一文中研究指出目的纳米技术目前已成为多种学科研究的热点问题和前沿方向,纳米金作为一种性能优良的纳米材料在疾病的早期诊断、检测以及治疗方面得到广泛研究。本研究对纳米金棒的制备条件进行了优化,选择最具有所需光学性质的纳米金棒,并成功将其功能化,制备了实验室条件下可针对日本血吸虫病检测的高特异性、敏感性的纳米金生物探针。方法通过种子介导的生长法聚合纳米金棒,通过对增长媒质中不同成分的比例、反应时间、温度等控制,系统的研究纳米金棒最佳的聚合条件,最大程度的提高单个纳米颗粒的生物功能,聚合具有所需的形貌和波长可控的纳米金棒。制备日本血吸虫尾蚴和成虫可溶性抗原,并将抗原与纳米金棒结合,构建NanoSPR生物探针,将NanoSPR生物探针功能化,通过表面等离子共振峰的LSPR峰变化来探索抗原包被的最佳浓度。将功能化的NanoSPR生物探针检测不同浓度梯度的感染日本血吸虫阳性血清抗体,并与ELISA检测结果做对照分析研究,探索日本血吸虫NanoSPR生物芯片的高特异性。将功能化的NanoSPR生物探针检测感染日本血吸虫前1-8周的兔血清抗体,并与ELISA检测结果做对照分析研究,探索日本血吸虫NanoSPR生物芯片的高敏感性。结果通过对GNRs在制备过程中还原剂、活性剂、温度等条件的优化,系统的研究了GNRs的最佳实验制备条件。在增长媒质中CTAB的最佳浓度为0.095mol/L,AA的最佳浓度为0.640m mol/L,AgNO3的最佳浓度为72μmol/L,种子的最佳生长温度为28°C,种子溶液在增长媒质中生长12h基本趋于稳定,各项指标基本不再发生变化。在成功制备NanoSPR生物探针后,同过对NanoSPR生物探针不同的实验分析得出:包被浓度为20μg/m L时包被前后LSPR峰出现了最大程度的红移达到18nm且峰形正常,确定为最佳包被浓度;对比包被两种不同抗原的GNRs的检测结果,其中NanoSPR-SCA生物探针相对于NanoSPR-AWA的识别日本血吸虫感染早期的血清具有一定的优势;相比于ELISA检测结果的对比发现,通过纳米金标记对抗原抗体反应产生的放大作用,使NanoSPR-AWA生物探针对血清中血吸虫抗体的检测更具有灵敏性,最低检测限可达到稀释倍数的80倍。相比于传统的ELISA检测法,NanoSPR生物探针针对日本血吸虫感染早期的血清体现出了更强的识别能力。结论利用种子生长法通过探索最佳CTAB、AgNO3、AA等试剂浓度和影响金棒制备因素的实验条件,制备了长径比较高、等离子体共振峰位置和强度可有效调控的纳米金棒。并对基于纳米金标记的免疫传感器NanoSPR生物探针进行了实验室阶段的基础研究,证实基于纳米金标记的传感器是一种可以针对日本血吸虫病具有更高特异性,更灵敏的检测方法和工具,并为丰富日本血吸虫病的检测方法提供了技术支持的新思路。(本文来源于《大理大学》期刊2017-05-29)
吕园园[7](2017)在《纳米金棒对A549细胞毒性的机制研究》一文中研究指出纳米金棒(Gold nanorods,AuNRs)是指尺度介于1-100nm之间的棒状纳米金颗粒,在光学特性、量子隧道效应、生物相容性、表面易修饰性和稳定性等方面具有独特的物理及化学属性,因此被认为是最具应用前景的纳米材料之一。近年来,随着纳米技术在生物医学领域的发展,AuNRs在细胞和动物活体成像、药物和基因传递以及多种疾病的诊断和治疗等方面的运用越来越多。然而,随着AuNRs广泛应用,人们接触AuNRs的机会日益增多,AuNRs暴露所引起的生物安全问题也受到越来越多的关注。因此,探究AuNRs对生物体可能潜在的影响及其机制是纳米金材料得到更加安全、广泛运用的基础。本研究拟首先采用不同浓度AuNRs处理A549细胞6h、12h和24h,然后通过CCK-8、LDH实验观察AuNRs对A549细胞活力、细胞膜损伤的影响。在此基础上,运用透射电镜观察AuNRs对细胞超微结构的影响,并初步判断AuNRs的细胞毒性。进一步,拟运用Western blot技术、激光扫描共聚焦显微技术和其他分子生物学方法来观察AuNRs细胞毒性是否与其通过损伤线粒体相关功能、促进氧化应激进而诱导细胞自噬有关,相关实验结果如下:一、AuNRs对A549细胞毒性的影响首先,将正常培养的A549细胞给予不同浓度AuNRs处理(0μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,2μg/ml,4μg/ml),分别处理6h、12h、24h后观察其对细胞活力、细胞膜损伤和细胞超微结构的影响,实验结果如下:1.AuNRs对A549细胞活力的影响CCK-8实验结果表明,采用不同浓度AuNRs处理后,A549细胞活力呈剂量、时间依赖性降低。提示,AuNRs细胞毒性呈剂量、时间依赖性增加。2.AuNRs对A549细胞膜损伤的影响LDH实验结果表明,采用不同浓度AuNRs处理后,A549细胞呈现LDH渗漏且上清LDH呈剂量、时间依赖性增加。提示,AuNRs细胞毒性呈剂量、时间依赖性增加,AuNRs作用的浓度越高、时间越长,对细胞的毒性越大。3.AuNRs对A549细胞超微结构的影响透射电镜研究结果表明,AuNRs能够进入A549细胞,并以单个颗粒或聚集体的形式存在于细胞质和部分膜囊泡中,而细胞核未观察到AuNRs。此外,细胞中部分线粒体呈不同程度肿胀,并且自噬小体数目较对照组显着增加。二、aunrs对a549细胞自噬的影响研究发现,自噬是纳米材料细胞毒性的重要机制之一。那么aunrs对a549细胞毒性是否与自噬有关呢?我们进行以下研究,实验结果如下:1.aunrs对a549细胞自噬标志蛋白lc3的影响激光扫描共聚焦显微镜观察结果表明,不同浓度aunrs处理a549细胞6h后,lc3表达呈剂量依赖性增加。其中,con组lc3主要表达并集中于细胞核,而随着aunrs浓度的增加,lc3表达逐渐从细胞核转移到细胞质,细胞核lc3表达逐步减少并呈空泡化。再将a549细胞给予2μg/ml的aunrs分别处理6h、12h和24h并观察lc3表达情况,结果表明,a549细胞lc3表达呈时间依赖性增加。con组lc3主要表达并集中于细胞核,而随着aunrs暴露时间的增加,lc3表达逐渐从细胞核转移到细胞质,细胞核lc3表达逐步减少并呈空泡化。2.aunrs对a549细胞自噬相关蛋白的影响westernblot结果表明,不同浓度aunrs处理a549细胞6h后,lc3-ii、atg4、atg16和beclin1蛋白表达显着增加,而自噬底物蛋白p62表达水平显着降低。提示,aunrs诱导a549细胞发生自噬呈剂量、时间依赖性增加。3.cq能够抑制aunrs诱导的自噬westernblot结果表明,正常培养条件下con组atg16、lc3-ii少量表达,给予cq处理后atg16、lc3-ii表达较con组显着增加,表明cq可以抑制基础水平自噬溶酶体降解。给予aunrs处理后,atg16、lc-ii表达较对照组显着增加。aunrs和cq共同处理a549细胞6h后,atg16高表达可被cq逆转,而lc3-ii表达则进一步增加。这一结果表明,cq不仅可以抑制由aunrs诱导自噬的起始,而且可以抑制自噬溶酶体降解。叁、氧化应激介导aunrs诱导a549细胞产生的自噬近年来有研究发现,氧化应激是诱导细胞自噬的重要原因。那么aunrs诱导a549细胞发生自噬是否与氧化应激有关?我们的实验结果如下:1.抗氧化剂mntbap和nac能够抑制aunrs诱导的自噬westernblot结果表明,con组中lc3-ii表达水平较低,mntbap、nac处理后其表达水平轻微降低但无统计学意义。而aunrs处理6h后,lc3-ii表达显着增加,并且这一效应能被mntbap、nac所逆转。提示,mntbap、nac可以改善aunrs诱导a549细胞产生的自噬。激光扫描共聚焦显微镜研究表明,con组、nac组中lc3表达较弱且主要集中于细胞核,表明其自噬水平很低。而aunrs处理6h后,lc3蛋白质从细胞核转移到细胞质,细胞核lc3表达逐步减少并呈空泡化。而抗氧化剂nac能够逆转上述效应。2.抗氧化剂MnTBAP和NAC能够逆转AuNRs诱导的ROS增加激光扫描共焦显微镜研究表明,不同浓度AuNRs处理A549细胞6h后,Con组未观察到ROS阳性细胞,表明其ROS水平很低。而随着AuNRs浓度的增加,阳性ROS细胞数量和绿色荧光亮度明显增加且呈剂量依赖性,表明AuNRs能够诱导ROS产生,浓度越高,ROS水平越高。而抗氧化剂Mn TBAP、NAC能够逆转上述效应。3.抗氧化剂MnTBAP和NAC能够改善AuNRs诱导细胞氧化应激状态T-AOC、GSH/GSSG检测结果表明,AuNRs处理组T-AOC、GSH/GSSG较Con组显着降低,表明AuNRs处理后细胞抗氧化能力显着降低,而MnTBAP、NAC处理6h后能够逆转上述效应。4.抗氧化剂NAC能够逆转AuNRs诱导线粒体功能的降低线粒体膜电位和ATP含量测定实验结果表明,AuNRs处理后其线粒体膜电位和ATP含量较Con组显着降低,表明AuNRs处理细胞后其线粒体功能降低,而NAC处理6h后能够逆转上述效应。Western blot结果表明,AuNRs处理组UCP2表达显着降低。NAC处理6h后UCP2蛋白表达显着增加,提示UCP2蛋白表达降低与线粒体功能改变有关。结论:1.AuNRs能够进入A549细胞,引起细胞超微结构改变。AuNRs具有一定的细胞毒性且呈剂量、时间依赖性增加,AuNRs浓度越高、作用时间越长,细胞毒性越大。2.AuNRs能够诱导A549细胞产生自噬并能被自噬抑制剂CQ所抑制,自噬标志蛋白LC3、自噬相关蛋白ATG16、ATG4、Beclin-1表达增加,而自噬底物蛋白P62表达降低且呈剂量依赖性。3.AuNRs能够影响A549细胞线粒体相关功能,进而导致细胞抗氧化应激能力降低、ROS水平增加,后者介导了AuNRs诱导A549细胞产生的自噬。(本文来源于《第二军医大学》期刊2017-05-01)
宗智慧,刘刚,汪静[8](2016)在《RGD/FA双靶纳米金棒的制备及其在肿瘤细胞协同靶向成像与光热治疗中的应用》一文中研究指出目的:通过制备RGD/FA双靶纳米金考察其与高表达整合素与叶酸受体B16细胞的协同靶向成像与热疗作用;方法:采用功能化PEG分子将靶向小分子RGD与叶酸通过强健Au-S键连接至纳米金棒表面,利用激光共聚焦与808 nm近红外激光器评价修饰纳米金的协同靶向作用;结果:RGD与叶酸分子被成功连接于纳米金表面,且双靶纳米金对小鼠黑色素瘤细胞具有较好的协同靶向作用;结论:同时靶向同一肿瘤细胞的不同表位,可克服单一靶向功能化纳米粒子难以在肿瘤位点有效积累的问题,本研究为多功能纳米金棒在临床肿瘤早期诊断与光热治疗中的应用提供研究基础。(本文来源于《激光生物学报》期刊2016年04期)
张荧荧[9](2016)在《mAb-EGFR功能化修饰纳米金棒靶向光热诱导人下咽癌FaDu细胞凋亡机制研究》一文中研究指出[目的]下咽癌占下咽原发恶性肿瘤的95%,属于头颈部鳞状细胞癌(HNSCC),多发生于梨状窝区,位置隐匿。是上消化呼吸道恶性程度最高的肿瘤之一,近年来发病率呈逐年上升趋势。由于其症状不明显,易被混淆和忽视,所以患者被确诊时大都已中晚期。如何彻底清除癌肿,同时保留功能,减少复发,提高生存率,一直是临床医生探索的方向。纳米金(Nano gold)指金的微小颗粒,制备一定尺寸且可控纵横比的纳米金棒就能够允许以一个相当直接的方式剪裁它们的光学性质。当制备纳米金棒的纵横比为3.9时,800nm波长的近红外光照射可以引起棒表层导带电子发生相干最大震荡,此即为表面等离子共振现象(surface plasmon resonance,SPR),吸收的光能转换成大量的热,这些瞬间产生的热量足够有效地摧毁肿瘤细胞而不会损伤周围的正常细胞组织,从而达到细胞水平杀灭肿瘤细胞的目的,这就是等离子体共振光热治疗(Plasmonic photothermal therapy,PPTT)的理论基础。80%-90%的头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的患者已被证实为EGFR过度表达。目前,EGFR单抗(EGFR-mAb)作为Au-NRs常用的功能化修饰物被大量研究。众多的实验研究表明,这种稳定结合后的EGFR-mAb/GNRs共轭物可以选择性地结合在高表达EGFR的头颈鳞癌细胞膜上而使其具有靶向性。本实验应用近红外激光对富集于下咽癌肿瘤细胞的EGFR单克隆抗体修饰的纳米金棒进行激发,验证光热效应靶向诱导下咽癌肿瘤细胞凋亡,并在PI3K/Akt途径下探讨近红外激光激发下纳米金棒诱导肿瘤细胞凋亡的机制。我们从以下几个方面进行研究:① 观察mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒在下咽癌FaDu肿瘤细胞中的聚集及纳米金棒与肿瘤细胞的相互作用;②检测纳米金棒对于下咽癌肿瘤细胞的细胞毒性,并以未表达EGFR的非肿瘤细胞293T作为对照;③检测mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒诱导下咽癌FaDu肿瘤细胞凋亡;④探讨PI3K/Akt/mTOR信号通路在mAb-EGFR/AuNRs光热诱导下咽癌FaDu细胞凋亡中的作用机制。[方法]实验采用纵横比约为3.9的纳米金棒,将其表面修饰表皮生长因子受体单克隆抗体(Epidermal growth factor receptor monoclonal antibody,mAb-EGFR),在波长808nm的近红外激光的照射下,利用纳米金棒的等离子共振效应诱导人下癌FaDu细胞凋亡。第一部分:mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒与肿瘤细胞和非肿瘤细胞的相互作用,探索体外实验中纳米金棒浓度,共聚焦显微镜观察纳米金棒在细胞中的聚集,纳米金棒与FaDu细胞作用的细胞毒性分析(LDH法)及光热效应的温度变化分析。第二部分:mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒光热效应诱导人咽癌FaDu细胞凋亡。验证mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒在波长808nm的近红外激光的照射下,等离子共振效应诱导人下咽癌FaDu细胞凋亡;采用AnexinV-PI染色法,流式细胞仪,ELISA法,荧光显微镜观察FaDu肿瘤细胞的凋亡情况。第叁部分:在PI3K/Akt信号途径和DNA损伤通路下探讨纳米金棒在近红外激光光热诱导FaDu细胞凋亡的机制,实验采用Western Blot免疫印迹法和Q-PCR法分析PI3K/Akt信号通路途径上Akt,PTEN,P53等因子的变化趋势和可能的细胞凋亡机制,在体外实验中探索新型的靶向治疗因子。各实验数据采用对比研究方法进行统计处理。[结果]1、mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒进入FaDu细胞的数量明显多于未经修饰的纳米金棒进入FaDu细胞的数量,并且纳米金棒聚集于胞浆,甚至可以进入细胞核。对于293T细胞,mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒进入细胞的数量明显低于未经修饰的纳米金棒。说明mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒对于FaDu细胞具有一定靶向性。2、加入相同体积(浓度为15%-25%)的mAb-EGFR/Au+NIR组比较,纳米金棒对于FaDu肿瘤细胞的细胞毒性高于293T细胞(P<0.01)。对于293T细胞相同体积(浓度为15%-25%)的Au+NIR组比较,mAb-EGFR/Au+NIR组的细胞毒性明显降低(P<0.01)。3、用均数说明未经mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒对于下咽癌FaDu细胞和非肿瘤细胞293T细胞在近红外激光的照射下也表现为照射时间越长,温度越高(P<0.01)。并且相同剂量条件下mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒对于下咽癌FaDu细胞和非肿瘤细胞293T细胞在近红外激光的照射下与未经mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒相比较产热温度更高(P<0.01)。4、AnnexinV/PI 流式细胞仪,Tunel 法及 Western Blot 检测 Bal-2、Bax、Caspase3和Caspase9均显示mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒在近红外激光下诱导下咽癌FaDu细胞发生凋亡。5、Q-PCR和Western Blot法检测PI3K信号通路和DNA损伤通路中各因子,mAb-EGFR/Au+NIR组的总AKT与其余各组没有出现明显的改变,但是对于P-AKT-S473 和 P-AKT-T308,表达出现了 明显的降低;PI3K、GSK3β 在mAb-EGFR/Au+NIR、Au+NIR和mAb-EGFR/Au、Au处理因素下呈现明显的下降趋势;P-PTEN 在 mAb-EGFR/Au+NIR、mAb-EGFR/Au、EGFR 处理因素下有上升趋势;在DNA损伤通路中,P53各个实验组与对照组相比较有明显上升;ATR、P-CHK1 和 P-CHK2 在 mAb-EGFR/Au+NIR、mAb-EGFR/Au、EGFR 处理因素下逐渐上升;P-PDK1在EGFR和mAb-EGFR/Au处理因素中有上升趋势,但是在mAb-EGFR/Au+NIR组中表达降低。[结论]1、mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒能够进入到人下咽癌FaDu细胞中。2、当纳米金棒的吸光度OD值约为1.3时,浓度为15%-25%的纳米金棒溶液能够有效杀伤下咽癌细胞而对非肿瘤细胞损伤较小。3、体外实验中,对近红外激光对纳米金棒作用的细胞照射时间为6分钟。4、mAb-EGFR功能化修饰纳米金棒近红外激光诱导使人咽部鳞癌FaDu肿瘤细胞发生凋亡。5、mAb-EGFR功能化修饰纳米金棒近红外激光诱导下,阻断了 AKT的磷酸化,从而使PI3K/AKT/mTOR信号通路失活,阻止了细胞DNA的修复,诱导人咽部鳞癌FaDu肿瘤细胞发生凋亡。(本文来源于《昆明医科大学》期刊2016-09-01)
刘冰,王旭,赵梦真,晁洁,樊春海[10](2016)在《基于DNA折纸术的纳米金棒精密修饰》一文中研究指出精确、立体的对自组装装配体上的控制研究在纳米科学和其他多个领域具有重要的意义。我们利用精密加工策略,通过特殊设计的立足点链置换反应,将叁维的DNA折纸上的信息转移到纳米金棒上,从而实现对纳米金棒的特异性修饰。之后,纳米金颗粒作为质量控制部件在纳米金棒的两端和中间选择性的杂交,形成各种类型的自组装纳米结构~([1])。DNA纳米结构不仅作为构建复杂建筑的工具,更重要的是作为提供序列特异性和方向位置信息的载体。这种精密组装纳米金棒的过程展示了DNA折纸精密控制生产元件-纳米金棒的价态和朝向的能力。等离子效应,包括表面增强拉曼散射(SERS)~([2]),与自组装结构中的纳米金颗粒的数量有相当大的关联性。这种各向异质的结构对于光谱的响应很敏感,这种特性使它们在能量,光学和生物医学的领域中有很大的用途。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第二十八分会:化学生物学》期刊2016-07-01)
纳米金棒论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的制备广州管圆线虫幼虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、成虫粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒,筛选广州管圆线虫功能化纳米金棒诊断抗原及最适宜浓度,证实功能化纳米金棒能够检测早期或低度感染的广州管圆线虫血清抗体。方法1.金晶种子生长法聚合径长比可控的纳米金棒。2.液氮研磨法制备广州管圆线虫幼虫粗抗原和成虫粗抗原、RPMI-1640培养法制备排泄分泌粗抗原、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)制备幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原。巯基化粗抗原、纯化抗原与纳米金棒结合,制备功能化纳米金棒。采用紫外分光光度计扫描,通过比较表面等离子共振吸收峰的红峰移位大小,优选出功能化纳米金棒最适包被浓度。3.广州管圆线虫功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度及不同稀释度的大鼠血清抗体,根据表面等离子共振吸收峰红峰移位的变化筛选出广州管圆线虫的优势诊断抗原。4.广州管圆线虫功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度、不同稀释度血清抗体与ELISA检测的结果进行比较,探索功能化纳米金棒检测的敏感性和灵敏度。结果1.成功制备广州管圆线虫幼虫粗抗原、成虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒,并优选其最适包被浓度和对应的最大红峰移位:幼虫粗抗原包被浓度为30μg/mL,对应纵向等离子共振(LSPR)吸收峰最大红峰移位为35nm;成虫粗抗原最适包被浓度为40μg/mL,对应最大的红峰移位为35nm;排泄分泌粗抗原包被浓度为30μg/mL,包被前后表面等离子共振吸收峰出现了最大红峰移位为35nm;幼虫纯化抗原最优蛋白分子量为43kD,相应的抗原浓度为20μg/mL时,包被前后表面等离子共振吸收峰出现了最大程度的红移为25nm;成虫纯化抗原最优蛋白分子量为45kD,对应的抗原浓度为10μg/mL时,相应的LSPR吸收峰最大程度的红峰移位为40nm。2.广州管圆线虫幼虫粗抗原、成虫粗抗原、排泄分泌粗抗原、幼虫纯化抗原和成虫纯化抗原功能化纳米金棒检测不同感染时间、不同感染度的血清抗体,均可识别不同感染度第5d血清抗体为阳性,最低感染量为50条Ⅲ期幼虫。在轻度感染时比大鼠血清抗体ELISA试剂盒提前9d检测到阳性血清抗体,在中、重度感染时比大鼠血清抗体ELISA试剂盒提前2d检测到阳性血清抗体。其中成虫纯化抗原功能化的纳米金棒识别广州管圆线虫早期感染血清抗体的敏感性更高,比传统ELISA检测法灵敏度高,检测大鼠阳性血清抗体最大稀释度可达1:600。结论获得晶种生长法径长比可控、产量高的纳米金棒;优选出广州管圆线虫优势诊断抗原为成虫纯化抗原;广州管圆线虫粗抗原功能化纳米金棒抗原制备简单,成本低,检测血清抗体敏感性好,特异性强,比传统的ELISA法更具有检测抗体时间早、稀释度高、感染度低的优势,为广州管圆线虫病感染早期及低度感染检测提供全新的思路和技术支持。有望应用于动态流行病学调查和临床试剂盒的研发。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纳米金棒论文参考文献
[1].李蔚.近红外响应型纳米金棒-酶体系介导的光热效应与应用[D].吉林大学.2019
[2].孔玉方.广州管圆线虫功能化纳米金棒抗原筛选及血清学诊断的基础研究[D].大理大学.2018
[3].王楠.肢体液滴、纳米金棒、聚集诱导发光染料在液晶中的自组织及其光学表征[D].浙江大学.2018
[4].宋丽平.介孔二氧化硅包覆的纳米金棒在生物检测和光热治疗中的应用[D].华中农业大学.2017
[5].曹颖.纳米金棒标记旋毛虫诊断抗原的筛选及应用于血清学诊断的研究[D].大理大学.2017
[6].李家萌.纳米金棒的优化聚合及应用于血吸虫病检测的基础研究[D].大理大学.2017
[7].吕园园.纳米金棒对A549细胞毒性的机制研究[D].第二军医大学.2017
[8].宗智慧,刘刚,汪静.RGD/FA双靶纳米金棒的制备及其在肿瘤细胞协同靶向成像与光热治疗中的应用[J].激光生物学报.2016
[9].张荧荧.mAb-EGFR功能化修饰纳米金棒靶向光热诱导人下咽癌FaDu细胞凋亡机制研究[D].昆明医科大学.2016
[10].刘冰,王旭,赵梦真,晁洁,樊春海.基于DNA折纸术的纳米金棒精密修饰[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第二十八分会:化学生物学.2016