导读:本文包含了超顺磁微珠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:高效,定量,载体,免疫,论文,超顺磁微珠,Streptavidin。
超顺磁微珠论文文献综述
张健[1]（2001）在《超顺磁微珠载体高效免疫定量系统》一文中研究指出本文提出了一种高效免疫定量系统，它利用直径为50nm的超顺磁微珠Streptavidin MicroBeads作为固相载体，结合了酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法，可用于临床抗原抗体指标的高效定量检测。如果再稍做改进并实现微型化和阵列化，可以用于制作蛋白质芯片和大规模药物筛选，将为蛋白质组学和基因组药物学提供极大的便利，因此应用前景很好。 本定量系统的主要创新之处，就是采用Streptavidin MicroBeads作为固相载体。Streptavidin HicroBeads是一种微球状载体，直径为50nm，其内核是超顺磁小磁珠，外面包裹着streptavidin。其突出优点是：第一，这种固相载体是球状结构，可以大大增加抗原抗体反应的总有效面积，从而提高该系统定量检测的线性范围，有利于实现该系统的微型化；第二，这种固相载体的内核是超顺磁小磁珠，通过外加受控磁场对反应体系进行搅拌，有利于抗原与抗体结合完全，而且还有利于该系统实现自动化操作；第叁，磁珠外包裹着streptavidin，它与生物素(biotin)有很强的亲和力(Kd=lO~(-15)M)，可以很好的完成几乎所有生物素化抗原或抗体的固定化(immobilization)，适用面很广；第四，这种固相载体能够很好地与目前最先进的指示系统——电化学发光系统(ECL)结合(而目前临床检测上常用的固相载体不能)，可以大大提高灵敏度，因此该系统具有再改进和升级的巨大潜力。 该定量系统结合ELISA方法对IgG进行定量，其原理就是将受检标本(IgG)生物素化，标记上biotin，通过streptavidin-biotin的高亲和力，把这些IgG固定到Streptavidin MicroBeads固相载体上；然后加入碱性磷酸酶标记的单克隆抗体，特异地结合在IgG上，通过单克隆抗体上的碱性磷酸酶对底物pNPP进行催化反应，产生黄色物质，测量405nm的OD值，就可计算出IgG的量。本实验采用标准的96孔板模式，以Rabbit IgG，Bovine IgG和Rat IgG为假想的临床检测指标，对上述提出的系统进行了初步研究和定量效果的评估： 产V人一国LL芒U区丘L文 1）对一些必要的反应条件进行摸索：首先，对Monoclonal Antibody to Rabbit IsG（Alkaline PhosPhatase Labeled）的最佳出 值，最佳稀释倍数进行了摸 索，发现碱性磷酸酶最佳 PH值为 9．6，单抗最佳稀释倍数为 1：10，000；其次， 确定了IgG生物素化的最佳比例，发现biotin：protein＝SM：IM时，能达到最好 的检测效果。 2）对该系统的定量效果进行评估：以Rabbit IgG，Bovine IgG和Rat lgG为〕假想的临床检测指标，对这个系统进行定量效果的评估，发现该系统对 Rabb i t IsG的检测线性范围为 2－20 n s／ml（80－800us），平均变异系数为 10．81％（8个 点，triplicate），变异系数范围5．0521．78％；Bovine IgG和Rat IgG的定量 标准曲线也出现了类似的特征性S形曲线。上述结果说明，该系统确实像预想 的那样，可以用来进行微量定量，而且检测线形范围很广，不过，该系统的灵 敏度没有预想的高，只有 2 n g砌1G 人 平均变异系数也较大，为 10．81兄 这些都可能是手工洗板导致误差过大的缘故。 3）对该系统的微型化进行初步分析：首先，对该系统的最大检测量与 StrePtavidin MicroBeads用量的关系进行了研究（以 Rabbit IgG为假想检测 指标），发现该系统可检测＊曲b立tlgG的最大量随着Strept8V土i mCr。8e。ds 用量的减少而减少（接近线性下降），说明该系统具有微型化的可能；其次，将 该系统的Stre…avidin MicroBeads用量减少一半，再对Rabbit lgG进行定量， 发现这个系统检狈 Rabbit IaG的线性范围变为 2－12 u g／ml（80－480ng），平均 变异系数为 4．09％（8个点，triplicate），变异系数范围 0．63－7．65％。说明固S 相载体减少一半，检测的线性范围也约减少一半，但最小检测量门灵敏度） 没有改变，仍然是 2 n g／Inl侣），说明这个系统微型化是切实可行的。 如果能用机器实现自动化操作，克服手工操作的不一致性，该系统的灵敏 度可大大提高，有利于实现微型化和自动化，用于高效定量分析。(本文来源于《浙江大学》期刊2001-07-01）
超顺磁微珠论文开题报告
超顺磁微珠论文参考文献
[1].张健.超顺磁微珠载体高效免疫定量系统[D].浙江大学.2001
论文知识图
