论文摘要
希金斯炭疽菌(Colletotrichum higginsianum)是一种重要的半活体型营养植物病原真菌,引起的炭疽病是十字花科蔬菜生产上最常见和最严重的病害之一,为害区域分布广泛,华南地区有利的气候条件使病害发生更加严重。效应子是由病原菌分泌的、可以改变寄主植物细胞的结构和代谢途径,从而促进对寄主植物成功侵染或者触发寄主防卫反应的外泌型蛋白分子。作为研究病原菌与寄主互作的一种模式病原菌,希金斯炭疽菌的致病机制尚不清楚。本研究基于本实验室前期研究的基础,首先对筛选出的10个候选效应子基因进行表达模式分析,然后选出其中一个引起烟草坏死的关键效应子进行功能分析,以期更好地了解效应子在病原菌致病过程中发挥的具体作用。一方面,制备希金斯炭疽菌分生孢子悬浮液,对拟南芥叶片喷雾接种后Oh、6h、12h、24h、36h、48h、60h定点采样,提取拟南芥叶片总RNA,反转录为cDNA,利用实时荧光定量RCR技术分析炭疽菌侵染拟南芥后不同阶段效应子基因的表达情况;另一方面,构建含有效应子基因的植物表达高效载体并进行烟草瞬时表达,筛选引起烟草坏死的关键效应子。研究结果表明,在10个候选效应子中,效应子ChEP85能稳定引起烟草叶片明显的过敏性坏死反应,且在接种后24h的病原菌侵染的活体营养阶段高度表达。为了研究效应子ChEP85的功能,去除其信号肽序列,构建表达载体以研究信号肽的作用,探究去除信号肽的效应子是否还能引起烟草叶片坏死的现象;同时构建荧光表达载体研究信号肽对效应子亚细胞定位的影响;进一步构建效应子ChEP85基因的敲除载体,通过ATMT转化获得基因敲除突变体,从而深入研究其功能。本研究通过对希金斯炭疽菌效应子功能的研究,探索病原菌效应子发挥作用的机制及其关键途径,并为病原菌与寄主互作的分子机制提供重要依据。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 刘艳潇,皮磊,祝一鸣,舒灿伟,周而勋
关键词: 希金斯炭疽菌,分泌蛋白,基因表达模式,效应子,功能分析
来源: 中国植物病理学会2019年学术年会 2019-07-20
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学,农业基础科学,植物保护
单位: 华南农业大学植物病理学系广东省微生物信号与作物病害重点实验室
分类号: S432.44
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.020266
页码: 244
总页数: 1
文件大小: 59k
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