论文摘要
大肠杆菌的tnaA基因编码色氨酸酶,该基因的失活有利于大肠杆菌积累更多的L-色氨酸。利用CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术对大肠杆菌tnaA基因进行敲除。首先针对tnaA基因设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建gRNA表达质粒;随后人工设计同源修复供体基因序列,构建成完整的CRISPR/Cas9基因敲除系统;将该系统应用到大肠杆菌w3110-Δ中,经PCR和测序鉴定,证实目的基因tnaA敲除成功,敲除效率75%。成功构建了大肠杆菌tnaA基因敲除菌,为大肠杆菌L-色氨酸高产菌株的构建奠定了基础。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 何京桦,乐科易
关键词: 系统,敲除,大肠杆菌,基因
来源: 生物学杂志 2019年06期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 复旦大学生命科学学院
分类号: Q78
页码: 17-19
总页数: 3
文件大小: 291K
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