导读:本文包含了抑制机制缺陷论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:转录,小鼠,缺陷,细胞,小家鼠,免疫,磷酸化。
抑制机制缺陷论文文献综述
何文[1]（2018）在《激光重熔工艺参数对喷涂Fe基Ni/WC涂层微观缺陷的抑制机制研究》一文中研究指出大多数零件的失效都是由零件表面发生的磨损、腐蚀、压溃和扭曲甚至疲劳断裂所引起的。从表面开始并慢慢地向内部蔓延,逐渐地演变成各类裂纹源痕迹,最后导致断裂促使整个零件报废。采用等离子喷涂和激光重熔技术复合工艺对基材表面进行强化处理,可以有效地提高基材表面耐磨、耐高温和耐冲蚀等相关性能,促使更多高熔点高硬度材料被广泛应用,拓宽了材料使用范围。本文采用等离子喷涂设备在45钢表面上制备了Fe基Ni/WC涂层,再进行激光重熔处理。并建立叁维有限元分析模型,探讨了激光重熔工艺参数对重熔过程温度场变化规律的影响,深入研究了激光重熔Fe基Ni/WC陶瓷涂层工艺参数优化的界面行为,并基于响应曲面法建立激光重熔工艺参数与涂层孔隙率之间预测模型。主要研究成果包括以下几方面:(1)通过热结构有限元基本理论,施加合理的热边界条件。计算出相应材料热物性参数,选取高斯移动热源模型。通过ANSYS有限元软件建立激光重熔叁维温度场模型,得出了不同激光工艺参数下重熔过程温度场的变化情况。为后续章节中实验过程参数的优化提供了理论支撑。(2)采用SEM设备检测出喷涂层界面分布着较大的孔洞和明显的层间裂纹,表现为机械结合,经激光重熔处理后,界面组织结构为网状和发达的枝晶组织,涂层与基体均形成了冶金结合。XRD设备检测出喷涂层除了[Fe,Ni]、Cr和WC相之外,还含有Cr_7C_3,Fe_(0.04)Ni_(0.36)等硬质相,不同工艺参数重熔后均出现了Fe_2Si、Cr_2Si等硬质中间相,且重熔层中的相组成几乎没有变化。激光功率越大,材料的硬度就越高,晶粒越小,孔隙率也越小;扫描速度越快,其半峰高越宽,晶粒尺寸越小,晶粒细化越明显,相应的显微硬度有所提高,最高约提高47%。二次枝晶间距伴随扫描速度的加快表现递减现象。涂层和基体元素相互扩散。(3)通过响应曲面法建立各工艺参数(激光功率P、扫描速度V和光斑直径D)下激光重熔涂层孔隙率的试验方案,进行测试并获取响应值数据,得到各工艺参数与孔隙率Y的二次多元回归方程模型。最后通过该模型得出预测最优工艺参数:激光功率600w,扫描速度150mm/min,光斑直径2mm,其最小孔隙率约为0.28%。(本文来源于《江西理工大学》期刊2018-05-23）
陆雯[2]（2018）在《线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化及其机制》一文中研究指出目的:随着物质文化的充实以及西方饮食的引入,我国肥胖人群激增并且引发很多疾病如肥胖症、2型糖尿病及相关代谢综合征等。脂肪组织是体内主要的储能器官和重要的内分泌器官。而棕色脂肪(Brown adipose tissue,BAT)分布于成人颈部、锁骨区和肩胛背部,在长期冷刺激下可被激活。棕色脂肪细胞表达解偶联蛋白(Uncoupling protein 1,UCP1)通过非战栗性产热(Non-shivering thermogenesis,NST)调节全身能量代谢。棕色脂肪细胞线粒体丰富,在棕色脂肪细胞代谢和产热状态中线粒体呼吸起着关键作用。越来越多的证据表明线粒体氧化磷酸化系统(Oxidative phosphorylation system,OXPHOS)在棕色脂肪生成的逆向调节中起着重要作用,但对其机制的认识有限且存在争议。鱼藤酮(Rotenone,ROT)可抑制线粒体电子传递呼吸链复合物I抑制细胞呼吸。在此,我们通过在棕色脂肪细胞分化过程中鱼藤酮每天处理分化细胞建立线粒体氧化磷酸化缺陷的药理学模型证实了氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化。棕色脂肪细胞的分化是一个复杂的,多因子控制的过程。因此,我们通过检测C/EBPα,PPARγ等转录因子的表达来探索线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的机制。氧化磷酸化缺陷导致细胞ATP产生减少,活性氧(Reactive oxygen species,ROS)和胞质内钙离子(Ca2+)增加。然而,这些信号分子在氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中的作用仍有待研究。通过丙酮酸、抗氧化剂和钙螯合剂与鱼藤酮共处理,我们还研究了增加糖酵解补充ATP以及阻断活性氧和钙离子是否能恢复棕色脂肪细胞分化状态。为探索关键机制,与依托莫司(Etomoxir,ETX)抑制脂肪酸氧化后影响棕色脂肪细胞分化相比较,我们探究了葡萄糖代谢相关信号的变化。方法:1.棕色脂肪细胞分化的表型和基因表达本实验通过多种诱导剂刺激棕色脂肪细胞分化,观察0、2、4、6、8天棕色脂肪细胞脂滴聚集情况,运用实时荧光定量PCR仪(Q-PCR)检测脂肪生成因子、棕色脂肪特征性因子、线粒体及过氧化物酶体基因的表达以确定棕色脂肪细胞的成功分化。2.线粒体氧化磷酸化缺陷药理学模型的建立及其对棕色脂肪细胞分化的影响从前脂肪细胞至棕色脂肪细胞分化成熟每天用100n M ROT处理分化细胞建立线粒体氧化磷酸化缺陷的药理学模型,通过能量代谢仪(Seahorse)检测并分析其呼吸抑制量。油红染色检测ROT抑制呼吸后棕色脂肪细胞分化过程中脂滴变化情况。3.线粒体氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化过程中基因表达的影响提取DMSO对照组和ROT处理组0、3、7天的棕色分化细胞的m RNA,运用Q-PCR检测相关制热基因如Ucp1、Cidea、Prdm16,线粒体基因如Cox4i1、Cycs、Atpsynβ,过氧化物酶体基因Acox1、Pmp70、Pex13、Pex16、Gnpat、Cat的表达。4.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中转录因子的影响棕色脂肪细胞需要转录因子的复杂调控。提取DMSO对照组和ROT处理组0、3天的棕色分化细胞的m RNA,运用Q-PCR检测Pparγ、Pgc1α、C/Ebpα、C/Ebpβ、Pref1、Gata2等转录因子的表达变化。5.增加ATP水平或抑制ROS水平对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用线粒体氧化磷酸化缺陷可导致ATP产生减少和ROS产生增加。通过丙酮酸增强糖酵解补充ATP,天冬氨酸补充营养物质和抗氧化剂减少ROS产生与ROT共处理后研究棕色脂肪细胞分化脂滴产生和制热基因表达的变化。6.抑制Ca2+上升对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用线粒体氧化磷酸化缺陷可导致胞质内Ca2+上升。通过Ca2+螯合剂降低Ca2+含量与ROT共处理后探究棕色脂肪细胞分化脂滴产生和制热基因表达的变化。7.乳酸对棕色脂肪细胞的分化的影响线粒体氧化磷酸化缺陷可导致细胞外基质酸化及乳酸的增加。从前脂肪细胞至分化成熟20 m M乳酸每天处理分化细胞探究棕色脂肪细胞分化过程中脂滴的变化及制热基因Ucp1的表达,进而了解乳酸的作用。8.脂肪酸氧化抑制对棕色脂肪细胞分化的影响ETX可抑制脂肪酸氧化,从前脂肪细胞至分化成熟10μM ETX每天处理分化细胞探究棕色脂肪细胞分化过程中脂滴的变化和制热基因、线粒体基因、转录因子的表达变化来探究脂肪酸氧化抑制对棕色脂肪细胞分化的影响。9.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中信号转导通路的变化提取0、3、7天DMSO对照组、ROT处理组和ETX处理组蛋白,运用蛋白质印迹实验(Western blot,WB)检测AMPK、m TOR、ERK、AKT、p38及GLUT1/4等信号转导通路变化以探究线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的机制。结果:1.棕色脂肪细胞分化的表型和基因表达:光镜显示棕色脂肪细胞在分化过程中脂质聚集,Q-PCR显示随着分化天数增加成脂基因、制热基因、线粒体基因和过氧化物酶体基因表达不断上升,表明棕色脂肪细胞分化成功以供后续研究。2.线粒体氧化磷酸化缺陷药理学模型的建立及其对棕色脂肪细胞分化的影响:Seahorse检测100n M ROT抑制前脂肪细胞50%呼吸,成功建立线粒体氧化磷酸化缺陷的药理学模型。油红染色提示ROT处理组与DMSO对照组相比棕色脂肪细胞脂滴聚集减少。3.线粒体氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化过程中基因表达的影响:与DMSO对照组相比,ROT处理组第3、7天的分化细胞制热基因Ucp1、Cidea、Prdm16,线粒体基因Cox4i1、Cycs、Atpsynβ,过氧化物酶体基因Acox1、Pmp70、Pex13、Pex16、Gnpat、Cat的表达均减少。4.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中转录因子的影响:与DMSO对照组相比,ROT处理组第3天Pparγ、Pgc1α、C/Ebpα、C/Ebpβ表达下降,Pref1未有明显变化而Gata2、Fgf21、Cox2表达上升。5.增加ATP水平或抑制ROS水平对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用:与ROT单独处理组比较,丙酮酸与ROT共处理组可增加ATP水平但不能恢复棕色脂肪细胞脂滴生成及棕色特征性基因Ucp1、Cidea、Prdm16的表达;与ROT单独处理组比较,抗氧化剂与ROT共处理组不能恢复脂滴生成及棕色特征性基因Ucp1、Cidea、Prdm16的表达。6.抑制Ca2+的上升对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用:与ROT单独处理组比较,Ca2+螯合剂与ROT共处理组不能恢复脂滴生成及棕色特征性基因Ucp1、Cidea、Prdm16的表达。7.乳酸对棕色脂肪细胞分化的影响:与对照组相比,Q-PCR显示乳酸处理组可降低第3天分化细胞Ucp1表达10%。8.脂肪酸氧化抑制对棕色脂肪细胞分化的影响:油红染色显示棕色脂肪细胞在ETX处理情况下脂滴出现延迟但含量不变,与对照组相比,ETX处理组制热基因Ucp1、Cidea和线粒体基因Cox4i1、Cycs、Atpsynβ表达均下降。9.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中信号转导通路的变化:WB显示与DMSO及ETX组相比,ROT处理可使AMPK短暂激活,m TOR磷酸化下降,p38、ERK磷酸化减少,GLUT1及GLUT4减少,第3天总蛋白乙酰化增加而7天变化不大。结论:1.ROT每天处理棕色分化细胞持续性抑制细胞呼吸可导致线粒体氧化磷酸化缺陷,抑制棕色脂肪细胞分化并且降低制热基因、线粒体基因和过氧化物酶体基因表达。2.增加ATP含量、补充营养及降低ROS产生和Ca2+信号不能缓解线粒体氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化的抑制。3.脂肪酸氧化抑制可延迟棕色脂肪细胞分化但与氧化磷酸化缺陷抑制机制不同。4.线粒体氧化磷酸化缺陷通过减少GLUT1/GLUT4表达,短暂激活AMPK和抑制m TOR,ERK磷酸化水平进而降低转录因子Pparγ和C/Ebpα的表达,降低制热基因、线粒体基因和过氧化物酶体基因表达。(本文来源于《苏州大学》期刊2018-05-01）
胡晶晶,彭亮,刘秀鹏,李开学,熊鹰[3]（2017）在《miR-146b抑制白介素10缺陷小鼠自发肠炎的作用机制》一文中研究指出目的探讨miR-146b在小鼠IBD模型中的作用和机制,我们以白介素10(IL-10)敲除小鼠自发肠炎为模型,通过向小鼠腹腔内注射miR-146b mimic,评价miR-146b对IL-10~(-/-)缺陷小鼠自发肠炎的治疗效果。方法提取野生型(WT)和IL-10~(-/-)小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF诱导成为巨噬细胞。首先用qPCR和原位杂交方法评估miR-146b在WT和IL-10~(-/-)巨噬细胞中的表达。将13周龄IL10~(-/-)小鼠分为scramble及治疗组,腹腔内注射scramble或miR-146b mimic。饲养4周后处死小鼠并取材做相应检测,用病理切片的方法评估病理炎症评分;采用流式细胞术、qPCR等方法检测各种炎症相关因子的变化。结果和WT小鼠相比,miR-146b在IL-10~(-/-)小鼠的表达明显下降(P<0.05);治疗组小鼠和scramble小鼠相比体重上升明显(P<0.05);miR-146b mimic可以明显改善小鼠肠道炎症(P<0.05);流式细胞术分析显示miR-146b mimic显着抑制肠系膜淋巴结和肠道固有层Th1细胞群、Th17细胞群的激活以及M1巨噬细胞的分化。结论 IL-10缺失导致miR-146b表达减少;miR-146b可以减轻IL10~(-/-)缺陷引起的自发性肠炎,其机制可能是通过抑制肠道M1型巨噬细胞分化而进一步减少Th1和Th17细胞激活。(本文来源于《云南医药》期刊2017年04期）
李雄志[4]（2016）在《黄芪甲苷抑制载脂蛋白E基因缺陷小鼠心脏重构的机制研究》一文中研究指出背景心脏重构是指心脏受到各种内外刺激后,心脏形态、结构和功能等出现一系列适应性改变,其病理特点主要包括心肌肥厚及间质纤维化等,其病理机制主要涉及神经内分泌系统的激活。心脏重构早期为代偿性适应,晚期失代偿可发展为慢性心衰(congestive heart failure, CHF),而CHF是全球人群病死率的一个主要原因。因此,在临床中,抑制心脏重构是治疗CHF的重要策略,如p受体阻滞剂、肾素-血管紧张素-醛固酮系统拮抗剂等抑制神经内分泌系统药物的使用,对预防心脏重构、治疗CHF均取得一定效果。但CHF的发病率和病死率仍居高不下,因此研究心脏重构分子机制及干预药物具有必要性。高胆固醇血症被认为是心血管疾病,尤其是冠心病的主要危险因素之一,它可增加全因死亡率,其负面临床意义已得到反复证实。既往研究提示高胆固醇血症是引起左心室肥厚的独立危险因素,在心脏重构的发病及进展中起重要作用。载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠是被广泛用作研究高胆固醇血症、动脉粥样硬化性等疾病的动物模型,ApoE-/-除有血管表型外,还有如心脏质量增加、室壁厚度增加、心肌纤维化和心功能减低等心脏表型改变。关于ApoE-/-小鼠心脏重构的机制以及相关干预措施的研究很少。同时,高胆固醇血症对心肌细胞的再生、老化、凋亡以及P53信号转导通路的影响也知之甚少。黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ, AST Ⅳ)是从中药黄芪中分离出来的一种羊毛脂醇型四环叁萜天然单体皂苷,具多重抗心血管疾病药理活性,既往研究证实AST Ⅳ可以抑制病毒感染、缺血缺氧等引起的心脏重构,降低心肌细胞凋亡率,减轻心肌纤维化,抗氧化应激等。然而,AST Ⅳ对高胆固醇血症引起的心脏重构的影响及可能机制的研究尚无。因此,本研究目的是观察AST Ⅳ干预ApoE-/-小鼠心脏重构的疗效及探索其相关机制。目的验证假说：高胆固醇血症可引起心肌细胞增殖能力改变,促进心肌细胞老化、凋亡和心肌纤维化,影响P53信号转导通路的激活状态,最终导致以心肌肥厚、心功能下降为特点的病理性心脏重构;而AST Ⅳ治疗能抑制高胆固醇血症所致的心脏重构,进而改善心功能。方法1. AST-Ⅳ准备AST Ⅳ的纯度≥98%,羟丙基-β-环糊精溶解为浓度1%和10% AST Ⅳ溶液。2.动物分组雄性ApoE-/-小鼠随机分为高脂模型组(KO,n=14),低浓度AST Ⅳ干预组(AST-LD,n= 7),高浓度AST Ⅳ干预组(AST-HD, n= 8),以同龄同性别野生型C57BL/6J小鼠(WT,n=15)为对照组。8周龄时,分别获取WT(n=8)和KO(n=7)组小鼠治疗前各参数的基线水平。此后,AST-LD和AST-HD组分别隔日腹腔注射1mg/kg和10mg/kg的AST Ⅳ,余组以同方式同时长给予等剂量溶剂,SPF级普食喂养。药物干预8周(即小鼠16周龄),心脏超声检查后处死小鼠,取血及心脏标本,保存待检。3.心脏超声、血脂和心脏质量检测小鼠麻醉后,超声检测左室内径及后壁厚度,计算左室射血分数和缩短分数。禁食不禁饮12小时,称重后取血处死,分离血浆以测血脂四项；取心脏标本,测量心脏质量和左心室质量,随后垂直于心脏纵轴将左心室分为两部分,一部分用置于包埋剂用作冰冻切片,另一分部保存于超低温冰箱后期备用。4.心肌纤维化,免疫荧光染色法,心肌细胞尺寸和数量的检测马松染色检测心肌纤维化。免疫荧光染色检测各目标蛋白在心脏组织中的表达。使用心肌肌钙蛋白Ⅰ单抗标记心肌细胞；检测目标蛋白如与心脏的氧化应激相关蛋白尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4),抗氧化应激相关蛋白超氧化物歧化酶1、2(SOD1、2),细胞增殖相关蛋白Ki67,细胞老化相关蛋白P16 INK4a。参考文献方法测量心肌细胞尺寸和数量。5.末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测细胞凋亡细胞死亡原位检测试剂盒(荧光标记法)用于检测心肌细胞的凋亡。6.实时荧光定量聚合酶链式反应(QRT-PCR)检测心脏基因转录表达情况从心脏组织提取总RNA,逆转录成cDNA, QRT-PCR法检测与细胞生长周期、增殖、老化、P53信号转导通路、氧化应激等相关基因mRNA的表达。结果1.血脂四项:ApoE-/-小鼠在8周龄时已进展为高胆固醇血症(TC和LDL-C较WT组分别上升3.7倍和8.7倍,甘油叁酯(TG)不增高,HDL-C浓度较WT组下降23%)。16周龄时,ApoE-/-小鼠血脂变化趋势类似。AST Ⅳ治疗ApoE-/-小鼠8周后,血浆TC和LDL-C浓度较KO组上升,提示本实验中未观察到ASTⅣ有降血浆胆固醇作用。2.心脏质量和尺寸：ApoE-/-小鼠8周龄时心脏较WT组已表现为心肌肥厚,其心脏质量(HW,1.1倍)、左心室质量(LVW,1.3倍)、心脏质量体重比(HW/BW,1.1倍)、左心室质量体重比(LVW/BW,1.3倍)以及左心室质量心脏质量比(LVW/HW,1.2倍)均显着增加,左心室长轴(LAX)也增加1.1倍。16周时这些参数的差异仍然维持,AST IV治疗8周后,这些参数在AST-HD组较KO组分别下降了HW 24%、LVW 28%/HW/BW 8%、LVW/BW 10%、LVW/HW 5%、 LAX 10%; AST-LD组没有显着改变。3.心脏超声检测结果：与上述心脏质量和尺寸的变化趋势一致。8周龄时ApoE-/-小鼠较WT组左室舒张末期内径(LVDd)增加14%,左室收缩末期内径(LVDs)增加11%,左室舒张末期容积(LVEDV)和左室收缩末期容积(LVESV)分别增加39%和30%。16周时,除LVDs外,ApoE-/-小鼠LVESV较WT组增加至35%,左室射血分数(LVEF)、缩短分数(FS)、舒张期末左室后壁厚度(LVPWd).收缩期末左室后壁厚度(LVPWs)分别下降11%、13%、13%、6%。提示高胆固醇血症小鼠心脏室壁厚度变薄和收缩功能受损变化。经AST IV治疗后,AST-HD组小鼠LAX减小,LVESV恢复,EF由54%上升至60%,FS由28%上升至31%。AST-LD组较KO组在心脏超声方面并没有显着差异。4.心脏纤维化：8周龄ApoE-/-小鼠较WT组左心室胶原蛋白含量没有差异,但16周时胶原蛋白分数是WT组2倍,高剂量AST Ⅳ治疗后,胶原蛋白分数减低至KO组一半。提示高胆固醇血症易致心脏纤维化,AST Ⅳ具有明显抑制心脏纤维化作用。5.心肌细胞体积和数量：8周龄ApoE-/-小鼠较WT组心肌细胞体积增加19%,心肌细胞数量无改变；16周,心肌细胞体积增加了38%,心肌细胞数量减少了14%。而AST-LD和AST-HD组小鼠的心肌细胞体积较KO组的分别减低了19%和27%,AST-HD组小鼠的心肌细胞数量较KO组相比增加了10%。6.增殖、老化蛋白的表达：8周龄ApoE-/-小鼠较WT组ki67阳性心肌细胞数占心肌细胞总数比例基本相等,16周时该比例减至WT组的80%,而高剂量AST Ⅳ治疗后该比例较KO组增加3倍,ki67阳性细胞占整个心脏细胞总数比例增加2倍。其次,8周龄ApoE-/-小鼠较WT组在p16INK4a阳性心肌细胞数占心肌细胞总数比例无差异,16周时,该比例增为WT组的2.9倍,而低剂量和高剂量AST Ⅳ治疗后该比例较KO组分别减低了39%和60%。ki67阳性细胞占整个心脏细胞总数比例显着减低55%。7.心脏细胞凋亡：8周龄ApoE-/-小鼠心肌细胞凋亡(<2%)与WT组无差异。16周龄ApoE-/-小鼠凋亡心肌细胞数占总心肌细胞数比例超过WT组的23倍。AST-LD和AST-HD组的心肌细胞凋亡较KO组分别减少了87%和90%。凋亡阳性细胞占心脏细胞总数比例呈类似变化规律。8.氧化应激和抗氧化应激：8周时ApoE-/-小鼠较WT组心脏NOX4阳性细胞占心脏细胞总数比例、SOD1和SOD2的阳性表达面积均无显着改变；16周时,ApoE-/-小鼠NOX4阳性细胞占心脏总细胞比例是WT组的1.3倍,同时SOD2的阳性表达面积显着减小,SOD1相对表达面积没有显着差异。AST-LD和AST-HD组的NOX4阳性细胞占心脏总细胞比例较KO组分别降低16%和17%,SOD1和SOD2的表达则均无显着改变。9.目的基因转录：本实验检测了细胞周期、增殖、老化和P53信号转导通路和氧化应激相关基因表达的情况。1)8周时,ApoE-/-小鼠较WT组Cyclin D1(2.2倍)和MCM5(2.7倍)上调,CDKN1A (70%)和CDKN1B (28%)下调,其余细胞周期相关基因在转录水平均无显着改变。16周时,ApoE-/-小鼠较WT组反映细胞生长停滞的基因CDKN1A(7倍)、CDKN1B(2.7倍)、CDKN2A(9.6倍)明显上调,其中CDKN2A上调与前述翻译产物p16INK4a蛋白质表达变化一致,而CDK4(2.2倍),Cyclin B1(11.3倍).,Ki67(4.7倍)和MCM5(3.6倍)显着上调,其中Ki67mRNA表达与前述蛋白表达不完全一致。AST Ⅳ治疗后CDKN1A, CDKN1B, CDKN2A, MCM5, Cyclin B1、D1、E1、A2和CDK4在AST-LD和AST-HD两组均显着下调。2)8周时,ApoE-/-小鼠心脏除P53上调(1.6倍)和Mcl1下调(27%)之外,其余检测的P53信号转导通路相关基因(TP53、Bax、Bcl2、caspase-3、 Mdm2、ATM、GADD45A)较WT组没有显着差异；16周时除Bax和GADD45A外,其余检测基因表达上调了2.5倍以上。AST IV治疗后上述基因表达显着下调。3)8周时,ApoE/-小鼠心脏与氧化应激相关基因(Duox1、Srxn1、NOX1、 NOX4、GPX2、SOD1)表达较WT组无显着改变；16周时,除Duox1和SOD1外,余检测基因均出现了不同程度的上调,AST Ⅳ治疗后较KO组显着下调。结论本研究中观察到ApoE-/-小鼠心肌细胞增殖能力减低,细胞老化、凋亡加重,心肌纤维化和心脏中P53信号转导通路相关基因表达增高,这些与高胆固醇血症小鼠发生心肌肥厚、心脏收缩功能下降等病理性心脏重构相关；AST Ⅳ治疗并没有降低ApoE-/-小鼠血脂浓度,但逆转其心脏重构、改善心功能,与其促进心脏组织的增殖相关蛋白Ki67表达增加,减少老化相关蛋白p16INK4a表达,抑制心肌细胞凋亡和心肌纤维化,调控心脏P53信号转导通路相关基因的表达有关。本研究为AST Ⅳ应用于临床上治疗血脂异常相关的心脏重构提供了新的思路。(本文来源于《南京医科大学》期刊2016-05-01）
万毅[5]（2015）在《抑制性受体ILT3、ILT4在麻风病的免疫缺陷中的作用机制》一文中研究指出目的麻风病是由麻风分枝杆菌引起的一种慢性传染病。目前研究示与麻风病人同等情况接触下,有且仅有少部分人发病,这是因为麻风病人体内的自身细胞免疫缺陷程度各不相同,可是其自身细胞免疫缺陷的确切机制尚不明确。所以麻风病是研究宿主天然免疫功能与病原体相互作用的理想模型。目前有不少研究表明ILTs既参与先天性免疫,也参与适应性免疫,在免疫应答中既有负性调节作用,亦有正性调节作用。也有研究表明高表达或强制性表达的ILT3、ILT4可诱导DC耐受,从而使机体产生免疫耐受。故我们推测,麻风患者外周血中CD14+单核细胞表面ILT3、ILT4是否高表达,其高表达与麻风病发生、发展及各型别之间的转化是否有联系?现今麻风病同ILTs之间的联系国内外罕见报告,为了研究上述问题,本实验研究通过检测各型麻风患者外周血CD14+单核细胞表面ILT3、ILT4双阳性表达百分比,以及正常人的外周血单核细胞分别与多茵型(MB)、少菌型(PB)两类麻风患者的血清以及正常对照者血清培养,从而揭示ILT3、ILT4和麻风病之间的关系,为预防及治疗麻风病提供理论依据、麻风疫苗的开发及研制提供新思路。方法标本来源于昆明医科大学院第二附属医院皮肤科及检验科。其中TT组的麻风患者4例,BT组的麻风患者11例,BB组的麻风患者3例,BL组麻风患者12例,LL组麻风患者10例,正常对照组40例。运用流式细胞术分别检测上述6个实验组外周血CD14+单核细胞上ILT3、ILT4双阳性的百分比。另外,再取正常人的外周血单核细胞分别与多菌型(MB)14例、少菌型(PB)6例两类共20例麻风患者的血清以及20例正常对照者血清培养,并采用流式细胞技术测定外周血CD14+单核细胞上ILT3、ILT4双阳性的百分比。而后用SPSS19.0软件包对资料进行统计分析。结果1.五组麻风患者的外周血CD14+单核细胞上的ILT3、ILT4的双阳性表达高于正常对照组,且表达百分比高低为(正常对照组ILT3、ILT4双阳性百分比)<(TT组ILT3、ILT4双阳性百分比)<(BT组ILT3、ILT4双阳性百分比)<(BB组ILT3、ILT4双阳性百分比)<(BL组ILT3、ILT4双阳性百分比)<(LL组ILT3、ILT4双阳性百分比)。2.CD14+单核细胞表面的ILT3、ILT4在各组培养后的表达百分比率从高到低的顺序为多菌型麻风(MB)血清+正常人CD14+单核细胞>少菌型(PB)血清+正常人CD14+单核细胞>正常人血清+正常人CD14+单核细胞。结论1.麻风患者外周血中CD14+单核细胞表面ILT3、ILT4双阳性表达部分比率远高于正常人。2.ILT3和ILT4在五组麻风患者外周血CD14+单核细胞上的表达水平为TT组<BT组<BB组<BL组<LL组。3.为探明麻风患者血清中的可溶性因子对ILT3和ILT4在外周血CD14+单核细胞表达有上调作用,将其分别进行培养。ILT3、ILT4在培养后的表达百分比率从高到低的顺序为[多菌型麻风(MB)血清+正常人CD14+单核细胞]>[少菌型(PB)血清+正常人CD14+单核细胞]>[正常人血清+正常人CD14+单核细胞],故此可说明麻风患者血清中的可溶性因子的确存在上调CD14+单核细胞表面ILT3、ILT4表达的作用。4.CD14+单核细胞表面ILT3、ILT4的表达百分比率MB组>PB组,并由此说明ILT3、ILT4表达水平较高时,麻风菌含量较高,自身免疫水平较低下。(本文来源于《昆明医科大学》期刊2015-05-01）
肖红波,李年生,贾素洁,杨芝春,郭韧[6]（2007）在《3，4，5，6-四羟基口山酮抑制ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化形成及机制》一文中研究指出目的：观察3,4,5,6-四羟基口山酮对 ApoE 基因缺陷小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其机制。材料与方法：小鼠分为4组(n=20)：正常对照组(C57BL/6J 小鼠, 等体积溶媒灌胃)；模型组(ApoE 基因缺陷小鼠,等体积溶媒灌胃)；口山酮低剂量组(ApoE 基因缺陷小鼠,口山酮10 mg·kg~(-1)灌胃)和口山酮高剂量组(ApoE 基因缺陷小鼠口山酮20 mg·kg~(-1)灌胃)；处理4周后检测主动脉脂质斑块面(本文来源于《第九届全国心血管药理学术会议论文集》期刊2007-07-01）
曹明媚,戚中田[7]（2007）在《庚型肝炎病毒抑制人类免疫缺陷病毒感染及其机制》一文中研究指出庚型肝炎病毒(HGV/GBV-C)是10年前发现的单正链RNA病毒,属黄病毒科,病毒基因组RNA长约9.4kb,含1个开放读码框架,编码2900左右的氨基酸。目前大部分研究提示HGV是非致病性的,因此有学者建议称其为GBV-C以区别于肝炎病毒,本文中一并(本文来源于《微生物与感染》期刊2007年01期）
肖红波,李年生,贾素洁,杨芝春,郭韧[8]（2006）在《3,4,5,6-四羟基口山酮抑制ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化形成及机制》一文中研究指出目的:研究3,4,5,6-四羟基口山酮抑制ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化(AS)形成的机制及其与内源性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂非对称性二甲基精氨酸(ADMA)的关系。方法:32只小鼠分为4组(n=8):正常对照组(C57BL/6 J小鼠,等体积溶媒灌胃);模型组(ApoE基因缺陷小鼠,等体积溶媒灌胃);低剂量口山酮组[ApoE基因缺陷小鼠,口山酮10 mg/(kg.d)灌胃];高剂量口山酮组[ApoE基因缺陷小鼠,口山酮20 mg/(kg.d)灌胃];检测主动脉脂质斑块面积、血脂、红细胞变形性和血浆ADMA的水平。结果:与模型组比较,口山酮可以显着降低血浆ADMA水平和斑块面积,降低血浆总胆固醇(TC)、血浆总甘油叁酯(TG)、血浆低密度胆固醇(LDL-C),显着升高血浆高密度胆固醇(HDL-C)和改善红细胞变形性。结论:3,4,5,6-四羟基口山酮具有抗AS作用,其作用机制与改善脂质代谢和降低血浆ADMA的水平有关。(本文来源于《国际病理科学与临床杂志》期刊2006年03期）
王晓农[9]（1988）在《抗原吸入对IgE应答的抑制:新生大鼠免疫耐受机制的缺陷》一文中研究指出作者早期的研究结果证明,有免疫能力的成年动物对吸入抗原呈抗原特异性的免疫耐受。此耐受机制是由T细胞介导的(小鼠为Thy 1~+、2~+、大鼠为CD8~+)。这种功能对限制空气中变应原致敏是一种保护作用。临床观察表明,新生期是变应性致敏的高风险时期。故作者于近期的研究中,对正常成年和新生大鼠产生吸入性耐受的能力进行了比较分析。实验选用高IgE应答的BN(本文来源于《国外医学(免疫学分册)》期刊1988年05期）
抑制机制缺陷论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:随着物质文化的充实以及西方饮食的引入,我国肥胖人群激增并且引发很多疾病如肥胖症、2型糖尿病及相关代谢综合征等。脂肪组织是体内主要的储能器官和重要的内分泌器官。而棕色脂肪(Brown adipose tissue,BAT)分布于成人颈部、锁骨区和肩胛背部,在长期冷刺激下可被激活。棕色脂肪细胞表达解偶联蛋白(Uncoupling protein 1,UCP1)通过非战栗性产热(Non-shivering thermogenesis,NST)调节全身能量代谢。棕色脂肪细胞线粒体丰富,在棕色脂肪细胞代谢和产热状态中线粒体呼吸起着关键作用。越来越多的证据表明线粒体氧化磷酸化系统(Oxidative phosphorylation system,OXPHOS)在棕色脂肪生成的逆向调节中起着重要作用,但对其机制的认识有限且存在争议。鱼藤酮(Rotenone,ROT)可抑制线粒体电子传递呼吸链复合物I抑制细胞呼吸。在此,我们通过在棕色脂肪细胞分化过程中鱼藤酮每天处理分化细胞建立线粒体氧化磷酸化缺陷的药理学模型证实了氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化。棕色脂肪细胞的分化是一个复杂的,多因子控制的过程。因此,我们通过检测C/EBPα,PPARγ等转录因子的表达来探索线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的机制。氧化磷酸化缺陷导致细胞ATP产生减少,活性氧(Reactive oxygen species,ROS)和胞质内钙离子(Ca2+)增加。然而,这些信号分子在氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中的作用仍有待研究。通过丙酮酸、抗氧化剂和钙螯合剂与鱼藤酮共处理,我们还研究了增加糖酵解补充ATP以及阻断活性氧和钙离子是否能恢复棕色脂肪细胞分化状态。为探索关键机制,与依托莫司(Etomoxir,ETX)抑制脂肪酸氧化后影响棕色脂肪细胞分化相比较,我们探究了葡萄糖代谢相关信号的变化。方法:1.棕色脂肪细胞分化的表型和基因表达本实验通过多种诱导剂刺激棕色脂肪细胞分化,观察0、2、4、6、8天棕色脂肪细胞脂滴聚集情况,运用实时荧光定量PCR仪(Q-PCR)检测脂肪生成因子、棕色脂肪特征性因子、线粒体及过氧化物酶体基因的表达以确定棕色脂肪细胞的成功分化。2.线粒体氧化磷酸化缺陷药理学模型的建立及其对棕色脂肪细胞分化的影响从前脂肪细胞至棕色脂肪细胞分化成熟每天用100n M ROT处理分化细胞建立线粒体氧化磷酸化缺陷的药理学模型,通过能量代谢仪(Seahorse)检测并分析其呼吸抑制量。油红染色检测ROT抑制呼吸后棕色脂肪细胞分化过程中脂滴变化情况。3.线粒体氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化过程中基因表达的影响提取DMSO对照组和ROT处理组0、3、7天的棕色分化细胞的m RNA,运用Q-PCR检测相关制热基因如Ucp1、Cidea、Prdm16,线粒体基因如Cox4i1、Cycs、Atpsynβ,过氧化物酶体基因Acox1、Pmp70、Pex13、Pex16、Gnpat、Cat的表达。4.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中转录因子的影响棕色脂肪细胞需要转录因子的复杂调控。提取DMSO对照组和ROT处理组0、3天的棕色分化细胞的m RNA,运用Q-PCR检测Pparγ、Pgc1α、C/Ebpα、C/Ebpβ、Pref1、Gata2等转录因子的表达变化。5.增加ATP水平或抑制ROS水平对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用线粒体氧化磷酸化缺陷可导致ATP产生减少和ROS产生增加。通过丙酮酸增强糖酵解补充ATP,天冬氨酸补充营养物质和抗氧化剂减少ROS产生与ROT共处理后研究棕色脂肪细胞分化脂滴产生和制热基因表达的变化。6.抑制Ca2+上升对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用线粒体氧化磷酸化缺陷可导致胞质内Ca2+上升。通过Ca2+螯合剂降低Ca2+含量与ROT共处理后探究棕色脂肪细胞分化脂滴产生和制热基因表达的变化。7.乳酸对棕色脂肪细胞的分化的影响线粒体氧化磷酸化缺陷可导致细胞外基质酸化及乳酸的增加。从前脂肪细胞至分化成熟20 m M乳酸每天处理分化细胞探究棕色脂肪细胞分化过程中脂滴的变化及制热基因Ucp1的表达,进而了解乳酸的作用。8.脂肪酸氧化抑制对棕色脂肪细胞分化的影响ETX可抑制脂肪酸氧化,从前脂肪细胞至分化成熟10μM ETX每天处理分化细胞探究棕色脂肪细胞分化过程中脂滴的变化和制热基因、线粒体基因、转录因子的表达变化来探究脂肪酸氧化抑制对棕色脂肪细胞分化的影响。9.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中信号转导通路的变化提取0、3、7天DMSO对照组、ROT处理组和ETX处理组蛋白,运用蛋白质印迹实验(Western blot,WB)检测AMPK、m TOR、ERK、AKT、p38及GLUT1/4等信号转导通路变化以探究线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的机制。结果:1.棕色脂肪细胞分化的表型和基因表达:光镜显示棕色脂肪细胞在分化过程中脂质聚集,Q-PCR显示随着分化天数增加成脂基因、制热基因、线粒体基因和过氧化物酶体基因表达不断上升,表明棕色脂肪细胞分化成功以供后续研究。2.线粒体氧化磷酸化缺陷药理学模型的建立及其对棕色脂肪细胞分化的影响:Seahorse检测100n M ROT抑制前脂肪细胞50%呼吸,成功建立线粒体氧化磷酸化缺陷的药理学模型。油红染色提示ROT处理组与DMSO对照组相比棕色脂肪细胞脂滴聚集减少。3.线粒体氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化过程中基因表达的影响:与DMSO对照组相比,ROT处理组第3、7天的分化细胞制热基因Ucp1、Cidea、Prdm16,线粒体基因Cox4i1、Cycs、Atpsynβ,过氧化物酶体基因Acox1、Pmp70、Pex13、Pex16、Gnpat、Cat的表达均减少。4.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中转录因子的影响:与DMSO对照组相比,ROT处理组第3天Pparγ、Pgc1α、C/Ebpα、C/Ebpβ表达下降,Pref1未有明显变化而Gata2、Fgf21、Cox2表达上升。5.增加ATP水平或抑制ROS水平对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用:与ROT单独处理组比较,丙酮酸与ROT共处理组可增加ATP水平但不能恢复棕色脂肪细胞脂滴生成及棕色特征性基因Ucp1、Cidea、Prdm16的表达;与ROT单独处理组比较,抗氧化剂与ROT共处理组不能恢复脂滴生成及棕色特征性基因Ucp1、Cidea、Prdm16的表达。6.抑制Ca2+的上升对线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化的恢复作用:与ROT单独处理组比较,Ca2+螯合剂与ROT共处理组不能恢复脂滴生成及棕色特征性基因Ucp1、Cidea、Prdm16的表达。7.乳酸对棕色脂肪细胞分化的影响:与对照组相比,Q-PCR显示乳酸处理组可降低第3天分化细胞Ucp1表达10%。8.脂肪酸氧化抑制对棕色脂肪细胞分化的影响:油红染色显示棕色脂肪细胞在ETX处理情况下脂滴出现延迟但含量不变,与对照组相比,ETX处理组制热基因Ucp1、Cidea和线粒体基因Cox4i1、Cycs、Atpsynβ表达均下降。9.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化过程中信号转导通路的变化:WB显示与DMSO及ETX组相比,ROT处理可使AMPK短暂激活,m TOR磷酸化下降,p38、ERK磷酸化减少,GLUT1及GLUT4减少,第3天总蛋白乙酰化增加而7天变化不大。结论:1.ROT每天处理棕色分化细胞持续性抑制细胞呼吸可导致线粒体氧化磷酸化缺陷,抑制棕色脂肪细胞分化并且降低制热基因、线粒体基因和过氧化物酶体基因表达。2.增加ATP含量、补充营养及降低ROS产生和Ca2+信号不能缓解线粒体氧化磷酸化缺陷对棕色脂肪细胞分化的抑制。3.脂肪酸氧化抑制可延迟棕色脂肪细胞分化但与氧化磷酸化缺陷抑制机制不同。4.线粒体氧化磷酸化缺陷通过减少GLUT1/GLUT4表达,短暂激活AMPK和抑制m TOR,ERK磷酸化水平进而降低转录因子Pparγ和C/Ebpα的表达,降低制热基因、线粒体基因和过氧化物酶体基因表达。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抑制机制缺陷论文参考文献
[1].何文.激光重熔工艺参数对喷涂Fe基Ni/WC涂层微观缺陷的抑制机制研究[D].江西理工大学.2018
[2].陆雯.线粒体氧化磷酸化缺陷抑制棕色脂肪细胞分化及其机制[D].苏州大学.2018
[3].胡晶晶,彭亮,刘秀鹏,李开学,熊鹰.miR-146b抑制白介素10缺陷小鼠自发肠炎的作用机制[J].云南医药.2017
[4].李雄志.黄芪甲苷抑制载脂蛋白E基因缺陷小鼠心脏重构的机制研究[D].南京医科大学.2016
[5].万毅.抑制性受体ILT3、ILT4在麻风病的免疫缺陷中的作用机制[D].昆明医科大学.2015
[6].肖红波,李年生,贾素洁,杨芝春,郭韧.3，4，5，6-四羟基口山酮抑制ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化形成及机制[C].第九届全国心血管药理学术会议论文集.2007
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[9].王晓农.抗原吸入对IgE应答的抑制:新生大鼠免疫耐受机制的缺陷[J].国外医学(免疫学分册).1988
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