导读:本文包含了心肌前体细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:心肌梗死,前降支,Ghrelin,胚胎干细胞
心肌前体细胞论文文献综述
魏蕊,高美娟,杨进,刘国强,张琳[1]（2012）在《Ghrelin促进人胚胎干细胞在心肌梗死微环境中分化为心肌前体细胞》一文中研究指出背景和目的:Ghrelin在心肌组织中广泛表达,并且发挥多种不同的生物学功能。本课题组的体外研究证实,ghrelin可以促进人胚胎干细胞(hESCs)分化为心肌细胞。然而,ghrelin在体内对hESCs分化的影响还未见报道。本研究旨在探索ghrelin是否影响hESCs在心肌梗死微环境中的分化进程。方法:收集hESCs集落,移植到冠状动脉左前降支结扎诱导的心肌梗死的大鼠左心室前壁。动物分组如下(1)空(本文来源于《中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编》期刊2012-08-29）
刘燕[2]（2012）在《重组人促红细胞生成素诱导人源羊水干细胞向心肌前体细胞的分化及其Wnt信号通路机制的研究》一文中研究指出目的：观察不同浓度重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoietin，rhEPO）对人源羊水干细胞（amniotic fluid stem cells，AFSC)向心肌前体细胞分化的作用及观察该分化过程中可能参与的Wnt信号机制。方法:⑴扩增、纯化AFSC。⑵倒置显微镜下观察体外培养的羊水干细胞的一般生物学特性。采用流式细胞术检测AFSC的CD29及CD34的表达情况。⑶本实验分为对照组，rhEPO组，rhEPO+LiCl组。⑷对照组一直使用常规培养基培养；rhEPO组用对照组的培养基中加入rhEPO组成的诱导培养基培养，且rhEPO的终浓度分别为1.O、5．0、10.0、20.0U／ml，干预24h后换成与对照组相同的培养基培养；rhEPO+LiCl组用上述浓度的rhEPO组成的诱导培养基培养并在诱导分化液中各加上5mmol/L的Wnt信号激动剂LiCl干预24h，然后换成与对照组相同的培养基培养。⑸将鉴定后的细胞种于10*10的小玻片上，按上述要求进行干预，48h后，用免疫荧光法检测羊水干细胞在诱导前及诱导早期的促红细胞生成素受体（EPOR）的表达情况。用免疫组化检测β-catenin及p-GSK-3β (Ser~9)的表达情况。⑹2周后在倒置显微镜下观察诱导分化后的细胞，计算有形态改变的心肌前体细胞数占总细胞数的比率为分化率，并比较rhEPO组与对照组的分化率的差异。⑺14天后收集各组细胞，提取总的RNA，应用RT-PCR检测各组心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达情况。⑻28天后应用Western blot检测各组细胞心肌特异蛋白(β-MHC、cTnT)的表达情况。结果:⑴羊水内的细胞接种后原代静养7天，第8天在倒置显微镜下可见集落细胞团，集落分布不均，大小不一，集落周边仅有很少量细胞，集落中心细胞易可见老化凋亡的细胞。羊水干细胞生长快，传代后细胞平铺时体积大，核仁大，胞浆丰富，细胞生长较密时，细胞似成纤维样细胞，排列成漩涡状。⑵AFSC经流式细胞仪检测显示AFSC表型为CD29~+为97.04%，CD34~+为0.61%。⑶免疫荧光观察到AFSC在诱导前和诱导早期均有EPOR的表达。⑷诱导分化第14天，倒置显微镜下可见细胞由长梭形逐渐变短增宽，相邻的细胞间有融合现象，似类肌管样结构。不同浓度的rhEPO诱导的分化率有差异，但都显着高于对照组（P<0.05），且以5.0U/mLrhEPO的诱导分化率最高（P<0.05）。⑸在诱导分化14天后，与未干预组比较，各浓度rhEPO组及各浓度rhEPO+LiCl组干预后细胞的GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达明显上调（P<0.05），以5．0U／m1的作用最显着；与rhEPO组比较，rhEPO+Licl组能显着干预上调诱导细胞的GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达（P<0.05），以5.0U／m1rhEPO+5mmol/L的LiCl干预作用最强。⑹经诱导28天后，各干预组的细胞的心肌特异相关蛋白β-MHC、cTnT的表达明显上调（P<0.05），以5．0U／m1的作用最显着，而rhEPO与Wnt信号激动剂共同作用强于单用rhEPO。⑺诱导过程中各组均有如前所述的Wnt信号通路中的蛋白表达，与对照组比较，rhEPO及rhEPO+LiCl组β-catenin及p-GSK-3β的表达的增多（P<0.05），与rhEPO比较，rhEPO+LiCl组β-catenin p-GSK-3β的表达强于rhEPO组。结论:⑴人源羊水中存在AFSC，其性质类似于间充质干细胞及胚胎干细胞。⑵外源性rhEPO成素能作为一种化学诱导剂应用于干细胞的研究。⑶外源性rhEPO早期干预能剂量依赖性促进人源羊水干细胞向心肌前体细胞分化。⑷外源性rhEPO可能通过启动Wnt信号诱导人源羊水干细胞分化为心肌前体细胞。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2012-05-01）
刘燕,李法琦,张彬,骆建平3[3]（2012）在《重组人促红细胞生成素干预人源羊水干细胞向心肌前体细胞的分化》一文中研究指出背景:研究发现人源羊水干细胞可向心肌前体细胞分化。目的:观察不同浓度重组人促红细胞生成素对人源羊水干细胞向心肌前体细胞分化的影响。方法:用含0,1.0,5.0,10.0,20.0U/mL重组人促红细胞生成素的诱导培养基诱导鉴定后的人源羊水干细胞向心肌前体细胞分化,诱导24h后换为完全培养基继续培养。结果与结论:诱导分化14d,倒置显微镜下可见细胞由长梭形逐渐变短增宽,相邻的细胞间有融合现象,似类肌管样结构,以5.0U/mL重组人促红细胞生成素的诱导分化率最高;RT-PCR检测显示重组人促红细胞生成素可促进细胞Nkx-2.5和GATA-4mRNA的表达,以5.0U/mL重组人促红细胞生成素的作用最强。说明外源性重组人促红细胞生成素能剂量依赖性促进人源羊水干细胞向心肌前体细胞分化。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年10期）
陈婷婷,米卫东,王刚,李力兵,高长青[4]（2009）在《普伐他汀和粒细胞集落刺激因子对心肌缺血小鼠内皮前体细胞动员效果的比较》一文中研究指出目的比较普伐他汀与粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对心肌缺血小鼠内皮前体细胞的动员效果并初步探讨其动员机制。方法96只雄性昆明小鼠,均分为四组(每组n=24),分别为空白对照组、盐水组、普伐他汀组及G-CSF组。空白对照组不做任何处理,其余叁组采用腹腔注射异丙肾上腺素制作小鼠药物性心肌缺血模型后,分别注射生理盐水、普伐他汀和G-CSF5天。每组均于用药后第1、5、7、9天随机抽取6只小鼠,经球后静脉取血测定内皮前体细胞的数目以及血管内皮生长因子的浓度并对两者进行相关性分析。结果与对照组相比,盐水组第1、5、7天内皮前体细胞的数目略有增加;与盐水组相比,普伐他汀组第5、7、9天内皮前体细胞水平有明显增高,而G-CSF组较普伐他汀组内皮前体细胞数目的增加在第5、7、9天更为显着;外周血VEGF的浓度盐水组、普伐他汀组及G-CSF组较对照组在第5、7、9天均有增加,其浓度增加由大至小的顺序为G-CSF组>普伐他汀组>盐水组>对照组;其中G-CSF动员内皮前体细胞的作用与血管内皮生长因子的浓度成中度正相关而普伐他汀动员内皮前体细胞的作用与血管内皮生长因子的浓度无相关性。结论心肌缺血能够诱导内皮前体细胞的动员增加血管内皮生长因子的释放,普伐他汀与G-CSF均能增强缺血后内皮前体细胞的动员并促进血管内皮生长因子的释放,G-CSF对内皮前体细胞的动员作用更强且动员机制与血管内皮生长因子的释放有关。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2009年08期）
盖郁博,张树龙,高连君,杨东辉,尹晓盟[5]（2009）在《特发性心房颤动血浆心肌前体细胞、血管紧张素Ⅱ及血管内皮生长因子的分析》一文中研究指出目的分析特发性心房颤动(房颤)血浆心肌前体细胞、血管内皮生长因子、血管紧张素Ⅱ,探讨炎症、内皮反应、肾素-血管紧张素系统在房颤发生、发展的作用及相互关系,为确定特发性房颤的发生机制及治疗策略奠定基础。方法对特发性房颤患者30例(该院2008年1至12月手术患者)作为试验组;对无器质性心脏病的健康人30例(同期行室上性心动过(本文来源于《中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集》期刊2009-06-11）
盖郁博[6]（2009）在《特发性心房颤动血浆心肌前体细胞、血管内皮生长因子及血管紧张素Ⅱ的分析》一文中研究指出目的:通过对特发性房颤心肌前体细胞(CD34+细胞)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的检测,分析以上因子在特发性房颤时的变化情况,以进一步了解它们与特发性房颤的关系,进而深入研究特发性房颤的发病机制。方法:选取2008年1月至2008年12月大连医科大学附属第一医院心内科二病房符合特发性房颤诊断标准的患者30例为实验组;无器质性心脏病的人30例(与实验组性别、年龄相匹配的同期行室上性心动过速治疗的患者,入组前至少3月内未有室上性心动过速发作)作为对照组,经肘静脉留取血样后,分别通过流式细胞仪测定血浆CD34+细胞计数、ELISA试剂盒测定血浆VEGF浓度、放射免疫法测定血浆AngⅡ含量。结果:实验组血浆CD34+细胞计数(19.76±12.08)/μl显着高于对照组血浆CD34+细胞计数(12.77±5.95)/μl,差异有统计学意义(P= 0.006);实验组血浆VEGF浓度(54.60±40.66)pg/ml显着高于对照组血浆VEGF浓度(25.13±16.88)pg/ml,差异有统计学意义(P =0.001);实验组血浆AngⅡ含量(27.49±18.87)ng/mL较对照组血浆AngⅡ含量(22.35±11.50)ng/mL,差异无统计学意义(P =0.208)。结论:1.特发性房颤血浆心肌前体细胞计数明显升高,提示特发性房颤可能存在心肌细胞的变性、坏死、纤维化及细胞凋亡,可能刺激心肌前体细胞动员、增生活跃,以替代死亡心肌细胞。2.特发性房颤血浆血管内皮生长因子浓度明显增加,提示内皮功能紊乱与特发性房颤发生可能有关。3.特发性房颤血浆血管紧张素Ⅱ含量未有明显增高,提示可能与应用肾素-血管紧张素系统的拮抗剂相关,对于特发性房颤与肾素-血管紧张素系统激活的相关性仍需进一步探讨。(本文来源于《大连医科大学》期刊2009-04-01）
陈婷婷[7]（2008）在《内皮前体细胞动员的药物干预效果比较及对心肌梗死的疗效观察》一文中研究指出目的:1.选用小鼠药物性心肌梗死模型,观察普伐他汀与粒细胞集落刺激因子对内皮前体细胞的动员规律并比较两者的动员效果及特点,筛选最佳动员药物及最佳干预时间。2.探讨不同麻醉深度和呼吸管理模式下,结扎冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死模型的优劣,观察心脏形态学及心功能变化。3.采用粒细胞集落刺激因子动员内皮前体细胞治疗大鼠心肌梗死,通过心脏超声检查、病理分析及在体和离体心功能测定,全面评价粒细胞集落刺激因子对心肌梗死大鼠的心功能改善作用。4.观察常用静脉麻醉药异丙酚和咪唑安定对血管内皮生长因子释放的影响以及对内皮前体细胞粒细胞集落刺激因子动员效果的影响。方法:1.采用腹腔注射异丙肾上腺素制作小鼠药物性心肌梗死模型,待模型动物稳定后,分别注射普伐他汀、粒细胞集落刺激因子及等量生理盐水5天,观察用药开始第1、5、7、9天的CD34~+单个核细胞及内皮前体细胞的数目,测定血浆中血管内皮生长因子的浓度并对两者进行相关性分析。2.在分别采用面罩通气法及气管切开法的呼吸管理模式下,利用结扎冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死模型,记录存活率与麻醉苏醒时间;进行HE染色、Masson染色和伊文氏兰/TTC染色确定心肌梗死模型的成功;四周后行在体心功能测定,并采用Langendorff装置进行不同前负荷下心功能变化的离体测定。3.雄性Wistar大鼠36只,随机分为对照组、心肌梗死组和粒细胞集落刺激因子组,其中粒细胞集落刺激因子组腹腔注射粒细胞集落刺激因子5天,对照组和心肌梗死组腹腔注射等量生理盐水5天。于用药开始第7天时球后静脉采血,流式细胞仪测定CD34~+单个核细胞及内皮前体细胞的数目;ELISA测定血浆血管内皮生长因子和C-反应蛋白的浓度;RT-PCR检测心肌梗死交界区血管内皮生长因子及其受体FLK-1mRNA的表达。第4周时通过超声、病理及在体和离体心功能测定,对心肌梗死大鼠的心功能进行全面评价。4.大鼠急,陛心肌梗死模型稳定后随机选取36只,连续腹腔注射粒细胞集落刺激因子5天,随机分为叁组,于用药开始第7天时分别持续泵入生理盐水、咪唑安定及丙泊酚,6h后球后静脉采血,流式细胞仪测定CD34~+单个核细胞及内皮前体细胞的数目;ELISA测定血浆血管内皮生长因子和C-反应蛋白的浓度;RT-PCR检测心肌梗死交界区血管内皮生长因子及其受体FLK-1mRNA的表达。于第4周时行在体心功能测定后,处死大鼠取梗死交界区心肌组织行CD34免疫荧光染色,观察并测量血管密度。结果:1.CD34~+单个核细胞和内皮前体细胞的数目及血浆中血管内皮生长因子的浓度均于用药开始第7天时达到高峰;粒细胞集落刺激因子的动员作用远远大于普伐他汀的动员效果;粒细胞集落刺激因子动员内皮前体细胞的作用强于对CD34~+单个核细胞的动员作用。2.两种通气方法下均可制备确定的心肌梗死模型,存活率无差别,HE染色、Masson染色和伊文氏兰/TTC染色均可观察到明显的心肌梗死区。在体及离体心功能测定两者无差别,但与对照组相比,心脏的收缩、舒张及储备功能均显着下降。3.粒细胞集落刺激因子提高了血浆中血管内皮生长因子的浓度,增强了心肌组织中血管内皮生长因子及其受体FLK-1mRNA的表达,增加了外周血中CD34~+单个核细胞和内皮前体细胞的数目,使心肌梗死交界区的毛细血管密度增加,同时超声及在体和离体心功能测定结果显示心肌梗死大鼠的心功能得到改善。4.咪唑安定可以促进血管肉皮生长因子的释放,并使粒细胞集落刺激因子动员内皮前体细胞的作用加强,促进了心肌梗死交界区血管的新生。而丙泊酚无以上两种作用。但是,两种静脉麻醉药均对心肌梗死后的心功能有改善作用。结论:1.普伐他汀与粒细胞集落刺激因子均有动员内皮前体细胞的作用,均能提高血浆中血管内皮生长因子浓度及组织中血管内皮生长因子的表达。其中,粒细胞集落刺激因子对内皮前体细胞的动员作用与血浆中血管内皮生长因子浓度的增加有关。2.采用面罩通气行呼吸管理,结扎冠状动脉前降支制作大鼠心肌梗死模型,与传统的气管切开法相比较,提高了制作动物模型的速度,此外避免了气管切开导致的颈部粘连,为心功能评价时分离右侧颈总动脉置入心导管及气管切开制作Langendoff模型创造了良好的条件。3.粒细胞集落刺激因子能够动员骨髓中的内皮前体细胞进入外周血并进而归巢于缺血区,增加心肌梗死交界区毛细血管的密度,改善心肌梗死大鼠的心功能,因此,粒细胞集落刺激因子用于内皮前体细胞动员治疗急性心肌梗死在临床上是有应用前景的。4.咪唑安定能够加强粒细胞集落刺激因子动员内皮前体细胞的作用,进而增加心肌梗死交界区的微血管密度,从而改善了心肌梗死后的大鼠的心功能。(本文来源于《中国人民解放军军医进修学院》期刊2008-05-01）
邢泉生,泮思林,孙龙[8]（2007）在《自体内皮前体细胞移植促缺血心肌血管新生的实验(英文)》一文中研究指出背景:循环中内皮前体细胞在一定的条件下可向内皮细胞转化,而且可进一步形成血管。目的:探讨从外周血中获取的内皮前体细胞自体移植后促进心肌缺血区域血管新生的可行性和有效性,为冠状动脉硬化性心脏病患者的治疗提供新的细胞移植学方法。设计:完全随机对照实验。单位:青岛儿童医院心脏中心。材料:选用雄性SD大鼠60只,清洁级,体质量(340±20)g,由青岛实验动物中心提供。实验动物随机分为两组:实验组和对照组,每组30只。两组又按内皮前体细胞注入后2,4,8周3个时间点进行观察,每个时间点10只。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。方法:实验于2003-05/2004-09在青岛医药生物科技重点实验室完成。将实验组动物麻醉后,抽取动物的外周动脉血,应用密度梯度离心法获取单个核细胞。应用加入血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的特定培养基培养后,获得CD31、CD34、FIk-1和血管性血友病因子免疫荧光染色阳性的内皮前体细胞。结扎SD大鼠冠状动脉左前降支,建立急性心肌梗死动物模型,然后将得到的自体细胞重新植入缺血心肌局部区域。对照组注入细胞培养液,其余步骤与实验组相同。分别于结扎后2,4,8周过量麻醉处死所有动物,制作心脏组织切片。主要观察指标:①进行HE染色后光镜下观察心肌基本结构变化情况。②组织切片经Ⅷ因子免疫组化染色后,应用德国ZEISS(蔡司) Axiotron图像分析仪分析视野内Ⅷ因子阳性内皮细胞数量和微血管密度。结果:纳入的60只SD大鼠全部进入结果分析。①对照组心肌组织结构较为杂乱,心肌细胞多为被胶原组织和成纤维细胞所替代,梗死边缘区心肌细胞呈现不规则形状,部分细胞明显肥大。与对照组比较,移植组心肌胶原纤维融合较少,组织排列结构更为有序;移植区域微血管密度明显增高。②内皮前体细胞注入后第2,4和8周组心肌缺血区域微血管密度明显高于对照组的相应时间点,差异有显着性意义(P<0.01)。实验组缺血区域微血管密度随时间推移呈增长趋势,差异有显着性意义(P<0.05)。但是对照组组内比较,差异无显着性意义(P>0.05)。结论:通过一定的体外分离、定向分化、培养、扩增途径,可以从外周血获得较为纯化的内皮前体细胞;内皮前体细胞移植对局部梗死心肌组织结构有一定的保护作用,并可促进血管新生。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年50期）
王英[9]（2007）在《人胚胎生殖细胞体外培养体系的建立及其向心肌前体细胞分化的初步研究》一文中研究指出为优化人胚胎生殖细胞(hEG)的体外培养体系及研究5-氮杂胞苷对hEG向心肌前体细胞分化的影响,我们分离培养了人胚胎生殖腺嵴和肠背系膜中原始生殖细胞(PGCs)周围的成纤维样细胞,证实其具有稳定的生物学特性,并首次证实其表达体外培养hEG所必需的细胞因子。以此人胚胎成纤维样细胞作为饲养层细胞,模拟PGCs在早期胚胎发育过程中不断迁移、扩增并保持未分化状态时的体内环境,同时添加bFGF、LIF和forskolin细胞因子,体外成功培养hEG,并对其生物学特性进行鉴定。所培养的hEG可传8～10代,并能够自我更新,保持未分化状态、正常人类二倍体核型及多向分化能力,建立了一种新的hEG体外培养方法。为hEG的进一步研究及其临床应用奠定了基础。在此基础上,进一步利用半定量逆转录多聚酶链反应检测5-氮杂胞苷对hEG向心肌前体细胞分化的影响。初步研究表明,5-氮杂胞苷可能具有促进hEG向心肌前体细胞分化的能力。同时,我们亦自人早期胚胎中分离培养人胚胎心肌细胞,并对其生物学特性进行初步研究。为今后心血管疾病的干细胞移植治疗研究奠定了基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2007-06-01）
张端珍,盖鲁粤,刘宏伟,黄建华,钟大光[10]（2007）在《内皮前体细胞自体移植促进缺血心肌血管的新生》一文中研究指出目的:观察内皮前体细胞自体移植后能否促进血管新生、改善心肌灌注、进而改善心脏功能。方法:实验于2004-01/05在解放军总医院心内科实验室完成。①实验分组:雄性新西兰白兔32只,体质量3.0～3.5kg,随机分为治疗组和对照组,每组16只。②实验方法:治疗组自骨髓获取内皮前体细胞培养扩增。结扎动物冠状动脉前降支根部。心电图检测至少5个胸前导联出现ST段显着抬高作为模型制作成功标志。2.5g/L胰蛋白酶消化细胞,洗涤干净后5mL磷酸盐缓冲液悬浮细胞,结扎前降支2h后将细胞悬液从耳静脉注入动物体内,移植细胞数量为(9.8±2.9)×106个/只。对照组注射磷酸盐缓冲液5mL。饲养5周。③实验评估:分别行超声心动图检查和左心室压力曲线检测心脏功能和心肌组织的梗死情况以及通过免疫组织化学检测观察血管密度。结果:纳入新西兰白兔共32只,因前降支细小排除2只。对照组因心功能衰竭和腹泻各死亡1只。治疗组结扎前降支后突发室性心律失常死亡1只。最终27只进入实验。①体外培养的内皮前体细胞生长迅速,能够在2～3周达到预定移植细胞数量。②内皮前体细胞移植5周后,超声心动图检测显示治疗组动物心肌功能指数显着降低(P<0.01),左心室射血分数显着高于对照组(P<0.01),左心室舒张末压明显低于对照组(P<0.05),而等容收缩期左室压力最大上升速率显着升高(P<0.05)。③治疗组心肌梗死面积显着减小(P<0.01),而血管密度明显高于对照组(P<0.01)。④标记细胞主要位于梗死心肌组织,大部分整合至毛细血管中,参与血管新生。结论:内皮前体细胞自体移植能促进缺血心肌血管新生,有效改善缺血心肌的灌注,进而改善心脏功能。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年20期）
心肌前体细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：观察不同浓度重组人促红细胞生成素（recombinant humanerythropoietin，rhEPO）对人源羊水干细胞（amniotic fluid stem cells，AFSC)向心肌前体细胞分化的作用及观察该分化过程中可能参与的Wnt信号机制。方法:⑴扩增、纯化AFSC。⑵倒置显微镜下观察体外培养的羊水干细胞的一般生物学特性。采用流式细胞术检测AFSC的CD29及CD34的表达情况。⑶本实验分为对照组，rhEPO组，rhEPO+LiCl组。⑷对照组一直使用常规培养基培养；rhEPO组用对照组的培养基中加入rhEPO组成的诱导培养基培养，且rhEPO的终浓度分别为1.O、5．0、10.0、20.0U／ml，干预24h后换成与对照组相同的培养基培养；rhEPO+LiCl组用上述浓度的rhEPO组成的诱导培养基培养并在诱导分化液中各加上5mmol/L的Wnt信号激动剂LiCl干预24h，然后换成与对照组相同的培养基培养。⑸将鉴定后的细胞种于10*10的小玻片上，按上述要求进行干预，48h后，用免疫荧光法检测羊水干细胞在诱导前及诱导早期的促红细胞生成素受体（EPOR）的表达情况。用免疫组化检测β-catenin及p-GSK-3β (Ser~9)的表达情况。⑹2周后在倒置显微镜下观察诱导分化后的细胞，计算有形态改变的心肌前体细胞数占总细胞数的比率为分化率，并比较rhEPO组与对照组的分化率的差异。⑺14天后收集各组细胞，提取总的RNA，应用RT-PCR检测各组心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达情况。⑻28天后应用Western blot检测各组细胞心肌特异蛋白(β-MHC、cTnT)的表达情况。结果:⑴羊水内的细胞接种后原代静养7天，第8天在倒置显微镜下可见集落细胞团，集落分布不均，大小不一，集落周边仅有很少量细胞，集落中心细胞易可见老化凋亡的细胞。羊水干细胞生长快，传代后细胞平铺时体积大，核仁大，胞浆丰富，细胞生长较密时，细胞似成纤维样细胞，排列成漩涡状。⑵AFSC经流式细胞仪检测显示AFSC表型为CD29~+为97.04%，CD34~+为0.61%。⑶免疫荧光观察到AFSC在诱导前和诱导早期均有EPOR的表达。⑷诱导分化第14天，倒置显微镜下可见细胞由长梭形逐渐变短增宽，相邻的细胞间有融合现象，似类肌管样结构。不同浓度的rhEPO诱导的分化率有差异，但都显着高于对照组（P<0.05），且以5.0U/mLrhEPO的诱导分化率最高（P<0.05）。⑸在诱导分化14天后，与未干预组比较，各浓度rhEPO组及各浓度rhEPO+LiCl组干预后细胞的GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达明显上调（P<0.05），以5．0U／m1的作用最显着；与rhEPO组比较，rhEPO+Licl组能显着干预上调诱导细胞的GATA-4、Nkx2.5mRNA的表达（P<0.05），以5.0U／m1rhEPO+5mmol/L的LiCl干预作用最强。⑹经诱导28天后，各干预组的细胞的心肌特异相关蛋白β-MHC、cTnT的表达明显上调（P<0.05），以5．0U／m1的作用最显着，而rhEPO与Wnt信号激动剂共同作用强于单用rhEPO。⑺诱导过程中各组均有如前所述的Wnt信号通路中的蛋白表达，与对照组比较，rhEPO及rhEPO+LiCl组β-catenin及p-GSK-3β的表达的增多（P<0.05），与rhEPO比较，rhEPO+LiCl组β-catenin p-GSK-3β的表达强于rhEPO组。结论:⑴人源羊水中存在AFSC，其性质类似于间充质干细胞及胚胎干细胞。⑵外源性rhEPO成素能作为一种化学诱导剂应用于干细胞的研究。⑶外源性rhEPO早期干预能剂量依赖性促进人源羊水干细胞向心肌前体细胞分化。⑷外源性rhEPO可能通过启动Wnt信号诱导人源羊水干细胞分化为心肌前体细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
心肌前体细胞论文参考文献
[1].魏蕊,高美娟,杨进,刘国强,张琳.Ghrelin促进人胚胎干细胞在心肌梗死微环境中分化为心肌前体细胞[C].中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编.2012
[2].刘燕.重组人促红细胞生成素诱导人源羊水干细胞向心肌前体细胞的分化及其Wnt信号通路机制的研究[D].重庆医科大学.2012
[3].刘燕,李法琦,张彬,骆建平3.重组人促红细胞生成素干预人源羊水干细胞向心肌前体细胞的分化[J].中国组织工程研究.2012
[4].陈婷婷,米卫东,王刚,李力兵,高长青.普伐他汀和粒细胞集落刺激因子对心肌缺血小鼠内皮前体细胞动员效果的比较[J].南方医科大学学报.2009
[5].盖郁博,张树龙,高连君,杨东辉,尹晓盟.特发性心房颤动血浆心肌前体细胞、血管紧张素Ⅱ及血管内皮生长因子的分析[C].中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集.2009
[6].盖郁博.特发性心房颤动血浆心肌前体细胞、血管内皮生长因子及血管紧张素Ⅱ的分析[D].大连医科大学.2009
[7].陈婷婷.内皮前体细胞动员的药物干预效果比较及对心肌梗死的疗效观察[D].中国人民解放军军医进修学院.2008
[8].邢泉生,泮思林,孙龙.自体内皮前体细胞移植促缺血心肌血管新生的实验(英文)[J].中国组织工程研究与临床康复.2007
[9].王英.人胚胎生殖细胞体外培养体系的建立及其向心肌前体细胞分化的初步研究[D].吉林大学.2007
[10].张端珍,盖鲁粤,刘宏伟,黄建华,钟大光.内皮前体细胞自体移植促进缺血心肌血管的新生[J].中国组织工程研究与临床康复.2007