磷酸海藻糖合成酶论文-何道文,刘小红,赵欢,张咏祀

磷酸海藻糖合成酶论文-何道文,刘小红,赵欢,张咏祀

导读:本文包含了磷酸海藻糖合成酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:玉米,海藻糖-6-磷酸合成酶,基因,抗旱

磷酸海藻糖合成酶论文文献综述

何道文,刘小红,赵欢,张咏祀[1](2018)在《海藻糖-6-磷酸合成酶基因的序列优化与表达研究(英文)》一文中研究指出为了获得一个优良的玉米抗旱育种基因资源,借助于生物信息学手段和分子生物学实验操作技术,从木棉植物中获得了一个编码海藻糖-6-磷酸合成酶的抗旱基因序列。根据玉米对密码子使用的偏爱性,合成了1个可用于玉米转化并提高其耐旱性的新的海藻糖-6-磷酸合成酶基因,进一步通过DNA分子的酶切和连接等操作将该基因构建成表达质粒,再导入大肠杆菌和酵母细胞以鉴定其是否能在原核和真核细胞中表达。最后该基因被构建到植物表达载体上,并转入农杆菌细胞。结果表明,新合成基因全长为2 586 bp,包含完整的开放阅读框,编码861个氨基酸;构建出的原核和真核表达质粒与预期的结果相符,该基因可用于细胞转化试验;该新合成基因能在大肠杆菌和酵母细胞中有效表达出海藻糖-6-磷酸合成酶;该基因被成功构建到植物表达载体p CAMBIA-2300上,并转入了农杆菌细胞LBA4404工程菌株。综合上述结果认为,获得了1个新的海藻糖-6-磷酸合成酶基因,该基因能在原核和真核细胞中有效表达出海藻糖-6-磷酸合成酶,构建的植物基因表达质粒可以直接用于玉米抗旱转基因育种。(本文来源于《华北农学报》期刊2018年02期)

雷敏,邬向丽,张金霞,王贺祥,黄晨阳[2](2017)在《平菇6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达及酶学特性研究》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶(EC2.4.1.15)催化尿苷二磷酸葡萄糖与6-磷酸葡萄糖合成6-磷酸海藻糖,该反应为海藻糖合成的第一步反应。为了确定平菇中该酶的基因及酶动力学参数,本研究将平菇中6-磷酸海藻糖合成酶基因进行了克隆测序,得到一段1665 bp的开放阅读框,该序列编码一个554个氨基酸的蛋白质,预测分子大小为62.01 k Da。将该基因在大肠杆菌BL21菌株中进行表达,并将异源表达蛋白进行纯化及特性分析。结果表明:该异源表达蛋白的最适p H为7.4,最适温度为30℃;6-磷酸葡萄糖和尿苷二磷酸葡萄糖的Km值分别为0.14和0.17 mM;Vmax和Kcat值分别为91.86 nkat/g和5.89 s-1。平菇菌丝在40℃热处理15 h后海藻糖的含量达到最高值,即158.88 mg/g干重,这与该时间点6-磷酸海藻糖合成酶的酶活最高相一致。这些结果表明克隆得到的6-磷酸海藻糖合成酶在平菇中参与了海藻糖的合成。(本文来源于《中国菌物学会第七届全国会员代表大会暨2017年学术年会摘要集》期刊2017-08-11)

高艳艳[3](2015)在《古菌Thermoplasma acidophilum 6-磷酸海藻糖合成酶的克隆、表达及其性质鉴定》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶在海藻糖代谢过程中发挥重要作用,在UDP-葡萄糖(UDPG)与葡萄糖-6-磷酸作为底物的参与下,能够将UDP-葡萄糖(UDPG)上的葡萄糖基转移到葡萄糖-6-磷酸上,使产生海藻糖-6-磷酸。本实验我们对嗜热古菌Thermoplasma acidophilum所编码的6-磷酸海藻糖合成酶(taTPS)的性质进行一系列的研究。我们首先以thermoacidophilic archaeon Thermoplasma acidophilum所编码的TPS基因序列TA1210为依据,克隆、构建质粒并将其导入到大肠杆菌体内进行表达,然后通过金属离子亲和层析以及分子筛层析纯化获得较纯蛋白收集液,然后通过相关实验对其酶学特点做了探究。taTPS可以利用UDPG、ADPG、GDPG当成糖基供体,以不同磷酸化单糖为糖基受体。研究发现taTPS最适催化温度和pH是60℃和6,并且具有一定的温度稳定性以及酸碱稳定性。研究还发现:二价金属离子对酶的活性也具有一定的影响,硫酸软骨素和肝素钠盐可以提高酶的催化活性。常用的添加剂EDTA、尿素、乙醇、DTT、SDS、β-巯基乙醇、甲醇、异丙醇、正丁醇都能够抑制酶的催化活性,而加入盐酸胍对其催化活性有很强抑制性。分子建模及其突变研究结果显示N-loop对酶的催化效率有着显着的影响,从而表明了N-loop在不同的6-磷酸海藻糖合成酶内所具有的不同作用。(本文来源于《齐鲁工业大学》期刊2015-05-25)

史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添[4](2015)在《坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)家族基因的克隆及表达特征分析》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)是植物海藻糖合成的关键酶,在植物逆境胁迫应答中发挥着重要的作用。实验以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE技术克隆获得坛紫菜的3条TPS基因序列:Ph TPS1,Ph TPS2-1和Ph TPS2-2。序列分析结果表明,Ph TPS1(收录号:KM580358)序列全长3 557 bp,包含一个3 462 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 153个氨基酸,分子量为124.2 ku,等电点为6.73,属于TPSⅠ亚家族;Ph TPS2-1(收录号:KM519457)序列全长4 264 bp,包含一个4 044 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 374个氨基酸,分子量为145.2 ku,等电点为5.96;Ph TPS2-2(收录号:KM519458)序列全长3 733 bp,包含一个3 324 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 107个氨基酸,分子量为120.2 ku,等电点为5.42。Ph TPS2-1和Ph TPS2-2属于TPSⅡ亚家族。基因表达水平的定量分析结果表明高温胁迫条件下,3条Ph TPS基因的表达模式基本一致,均表现为先上调后下调,再上调的趋势;而Ph TPS1和Ph TPS2-1基因在中低水平的失水条件下,基因表达水平均没有发生显着变化,只在高水平失水胁迫下显着上调,Ph TPS2-2基因在中高水平失水条件下,表达水平显着上调。说明Ph TPS基因可能只在高度失水胁迫下发挥应激调节作用。(本文来源于《水产学报》期刊2015年04期)

王娟娟[5](2015)在《球孢白僵菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的功能解析及其同生物防治潜能的关联》一文中研究指出球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是广泛用于农林害虫生物防治的昆虫病原真菌,其侵染体是分生孢子,也是许多真菌杀虫剂的活性成分。分生孢子制剂防治田间害虫的效果往往受到温度、湿度、紫外辐射及化学农药等多种环境胁迫的影响。因此,探索生防真菌抗逆境胁迫的生理机制,对以提高其生防潜能为目标的菌株遗传改良及菌剂的合理应用具有重要意义。本研究围绕这一目标,一是解析了球孢白僵菌甘露糖转移酶PMT和Ktr家族的功能,揭示了它们对细胞生长发育、环境抗逆性及寄主侵染力的重要贡献。二是研究解析了乙酰转移酶Mst2对球孢白僵菌生长发育、胁迫应答、细胞周期和毒力的影响。叁是解析forkhead转录因子Fkh2的功能,发现Fkh2通过调节相关基因的转录而参与球孢白僵菌细胞周期、无性发育及毒力的调控。四是解析了球孢白僵菌中两个海藻糖合成酶同源蛋白TpsA和TpsB对海藻糖合成、生长发育、孢子质量、多胁迫响应及毒力的贡献,发现二者对几乎所有生防潜能相关性状的贡献都表现为加性效应。主要的研究内容和结果概述如下:球孢白僵菌PMT家族甘露糖转移酶的功能解析PMT家族是在内质网上催化第一个甘露糖转移到蛋白质丝氨酸/苏氨酸上的一类甘露糖转移酶,根据结构特征可分为PMT1、PMT2和PMT4叁个亚族。这叁个亚族都存在于球孢白僵菌中且每个亚族只有一个成员,分别为Pmtl、Pmt2和Pmt4。其中Pmt2是敲除致死的,通过构建Pmt2的RNA干扰菌株和Pmtl及Pmt4的单基因敲除/回补菌株并进行多种表型分析,叁个基因的功能得到较为详尽的解析。与野生型相比,单基因缺失或RNA干扰菌株在生长、产孢、孢子活力、多胁迫耐受力及毒力等诸方面均表现不同程度的缺陷。其中,Pmt2的叁个干扰菌株、APmtl及ΔPmt4在富营养和限制培养基上的生长减慢20~79%,分生孢子产量下降16~72%,并伴随孢子活力显着下降即萌发一半所需的时间显着延长。不仅如此,干扰及敲除菌株在菌丝生长或孢子萌发期间,对氧化、高渗、胞壁干扰、高温及UV-B辐射等环境胁迫的抵抗力都有不同程度的显着下降。在对大蜡螟(Galleria mellonella)幼虫的生物测定中,突变株经正常体壁侵染的毒力下降53~62%,但通过血腔注射的毒力未发生大的变化。值得一提的是,突变株的孢壁完整性遭受很大程度的破坏,包括孢壁变薄、孢子表面疏水性降低及重要孢壁成分发生改变。所有表型的变化都在回补株中得到恢复。因此,PMT家族在球孢白僵菌中都不是功能冗余的,而是各成员相互协调共同调节宿主菌对复杂多样环境的适应性及对昆虫寄主的侵染力,因而在球孢白僵菌生防潜能的维持中发挥着互不替代的重要作用。球孢白僵菌Ktr家族甘露糖转移酶的功能比较Ktr家族甘露糖转移酶的功能是将第二个甘露糖连接到被PMT家族成员转移的第一个甘露糖基上,因而是对糖蛋白甘露糖链进行延伸的转移酶,其调控的反应发生在高尔基体内。球孢白僵菌有叁个Ktr家族成员,分别为Ktrl、Ktr4和Kre2/Mnt1。通过单基因敲除/回补菌株的构建并进行表型分析,发现Δktr4和Δkre2的分生孢子产量大幅下降~92%,孢子活力显着降低,孢子大小和复杂度也发生显着变化;两个敲除菌株对培养基中不同碳、氮源营养的摄入利用率不如野生株,表现为菌落生长缓慢。与野生型相比,Δktr1在孢子产量及菌落生长方面并无显着变化,但细胞壁中甘露糖蛋白和几丁质等成分的变化都远大于Δktr4和Δkre2,菌丝细胞壁变薄,孢子细胞壁表面疏水性下降12%。Δktr4和Δkre2细胞壁中α-葡聚糖含量显着高于野生型和Δktrl,孢子壁厚度也比Δktr1更薄,孢子表面疏水性分别下降64%和71%。总体上,Δktr4和Δkre2比Aktrl对氧化和胞壁干扰胁迫更敏感,但叁者对高渗胁迫的反应则差异不大。高温、UV-B辐射耐受性以及毒力在Δktr4和Δkre2中都大大下降,而Δktrl只对高温敏感。结果显示,Ktr1、Ktr4和Kre2对球孢白僵菌生防潜能都有不同程度的贡献,但Ktr4和Kre2的贡献远大于Ktr1的贡献。球孢白僵菌组蛋白乙酰转移酶Mst2的功能解析组蛋白中赖氨酸的乙酰化与基因的转录活性密切相关,但由于多数乙酰转移酶和去乙酰转移酶对赖氨酸的特异性修饰作用知之有限,每个赖氨酸乙酰化与细胞功能之间的关系目前并不十分清楚。球孢白僵菌中有一个组蛋白乙酰转移酶Mst2,它与裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)乙酰转移酶SpMst2同源,并能特异性乙酰化组蛋白3(H3)的第14位赖氨酸(H3K14)。为了明确Mst2在球孢白僵菌中的作用,我们构建和分析了Mst2的敲除/回补菌株。表型实验显示,AMst2对不同碳氮源的利用能力远不如野生株和回补株,正常培养条件下的产孢能力受损较大,孢子活力下降,抵抗氧化、高渗及胞壁干扰胁迫的能力显着下降。敲除株分生孢子耐高温、抗紫外能力显着减弱,表面疏水性和对敏感昆虫的侵染力均下降。细胞流式分析显示,AMst2的芽生孢子变小,密度降低,细胞周期中S期延长,G2/M期缩短。综合所有分析结果,Mst2在DNA损伤节点上起着关键作用,因而参与调控球孢白僵菌的细胞周期、无性发育、多胁迫应答及其对昆虫寄主的侵染力。球孢白僵菌叉头转录因子Fkh2的功能解析模式丝状真菌一般拥有叉头Forkhead (FKH)转录因子Fkhl和Fkh2,主要参与细胞周期的调控而影响生物学性状。不同于模式丝状真菌,球孢白僵菌只有Fkh2,不存在Fkhl。将Fkh2编码基因从野生株中敲除,导致球孢白僵菌细胞周期发生紊乱,在不同碳氮源培养基上的菌落生长不同程度地减慢,而且敲除菌株的菌丝隔膜增多,菌丝细胞粗短。有趣的是,敲除株的产孢提前,在正常平板培养条件下分生孢子产量显着升高,在液培条件下芽生孢子的产量也显着高于野生株,但两种孢子都明显变小,且密度降低,显示孢子内含物减少。其分生孢子对氧化和高渗胁迫的敏感性升高,耐UV-B辐射和高温的能力减弱,说明Fkh2可能参与宿主菌的胁迫应答。此外,用分生孢子悬液对大蜡螟幼虫进行体壁侵染和注射侵染的生物测定,结果显示敲除菌株的毒力显着降低。敲除菌株所有这些表型变化都在若干表型相关功能基因的转录分析中获得支持,并且都在回补菌株中得到很好的恢复。结果显示,Fkh2不仅参与调控球孢白僵菌的细胞周期循环,而且还调控生长发育、多胁迫应答及毒力等多种生防潜能相关的性状。球孢白僵菌中两种6-磷酸海藻糖合成酶同源物的功能解析海藻糖的生物合成途径对于动植物病原真菌是非常重要的,因为细胞内海藻糖的积累水平关系到宿主菌的环境适应性和寄主侵染力。球孢白僵菌有两个6-磷酸海藻糖合成酶(TPS),分别为TpsA和TpsB。通过单基因、双基因敲除菌株及回补菌株的构建与分析,发现双敲菌株△tpsA△tpsB的菌丝细胞中既检测不到TPS的酶活,也检测不到任何海藻糖的积累;而单敲菌株△tpsA的TPS酶活和海藻糖积累水平在正常和同胁迫条件下分别下降71~75%和72~80%,在△tpsB中分别下降21~30%和15~45%。两个单敲株在给定条件下TPS酶活损失或海藻糖积累水平下降幅度之和,正好接近双敲菌株的酶活损失或海藻糖含量的下降幅度。正常培养条件下分生孢子产量在双敲株中下降达98%,而在△tpsA和△tpsB中分别下移33%和50%。有趣的是,表征孢子质量的海藻糖含量、孢壁结构成分、疏水性、活力、大小及密度均在双敲株中受损最严重,后依次为△tpsA和△tpsB。相同的趋势也见于叁个敲除株对氧化、高渗、胞壁干扰、高温及UV-B紫外辐射等环境胁迫抵抗力的缺陷变化以及对大蜡螟幼虫毒力的缺陷变化。这些结果证明,球孢白僵菌中TpsA对海藻糖合成、营养生长、孢子质量、多胁迫应答及寄主侵染过程的调控作用均大于TpsB,后者仅表现比前者稍强的产孢调控作用。最重要的是,TpsA和TpsB对球孢白僵菌每种表型的调控作用都表现为加性效应,不同于一些模式丝状真菌中多个TPS同源物不一定都起作用的研究报道。因此,两个TPS同源蛋白对球孢白僵菌适应不同类型昆虫寄主及其复杂多样环境的生存方式具有特别重要的意义。(本文来源于《浙江大学》期刊2015-04-01)

李莹,柳参奎[6](2015)在《碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆及其耐逆性分析》一文中研究指出从碱茅酵母cDNA文库中经过NaCl、NaHCO3筛选,均得到长为1153bp碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因(PutTPS)片段。通过3′End cDNA amplification方法获得基因缺失的3′序列,该基因全长3358bp,编码882个氨基酸。氨基酸序列比较结果表明,PutTPS氨基酸序列与水稻、拟南芥、玉米等多种高等植物的TPS蛋白的同源性高达60%~90%。利用Northern blot技术,研究该基因的组织表达模式及NaCl、NaHCO3胁迫处理下基因的表达模式变化;同时对转pYES2-PutTPS基因酵母菌株进行盐、碱、氧化胁迫、渗透胁迫处理,观察其在逆境下的生存表现。结果表明,PutTPS具有组织表达特异性,其中在根和花中表达量最大;NaCl、NaHCO3会诱导PutTPS基因在根和叶中的上调表达;同时重组酵母菌株对盐碱、氧化、渗透胁迫及干旱等逆境的适应能力显着增强。以上研究结果表明,碱茅PutTPS基因与逆境之间具有一定的应答关系,并在植物适应环境逆境过程中起着重要的作用。(本文来源于《草业学报》期刊2015年01期)

史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添[7](2014)在《坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因家族的克隆及表达分析》一文中研究指出6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)是植物海藻糖合成的关键酶,在植物逆境胁迫应答中发挥着重要的作用。本研究采用RACE技术克隆获得了坛紫菜的叁条TPS基因序列:Ph TPS1,Ph TPS2-1和Ph TPS2-2。序列分析结果表明,Ph TPS1序列全长3 557 bp,包含一个3 462 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 153个氨基酸,属于TPSⅠ亚家族;Ph TPS2-1序列全长4 264 bp,包含一个4 044 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 374个氨基酸;Ph TPS2-2序列全长3 733 bp,包含一个3 324 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含1 107个氨基酸。Ph TPS2-1和Ph TPS2-2属于TPSⅡ亚家族。基因表达水平的定量分析结果表明高温胁迫条件下,叁条Ph TPS基因的表达模式基本一致,均表现为先上调后下调,再上调的趋势;而叁条Ph TPS基因均在高水平的失水条件下,表达水平显着上调。说明Ph TPS基因可能在高度失水胁迫下发挥应激调节作用。(本文来源于《2014年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2014-10-29)

岳思思,姚伟,王东浩,陈玉芹,王喆之[8](2014)在《丹参海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SmTPS)的克隆及其表达分析》一文中研究指出对丹参EST序列进行Blast分析,得到一条海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)基因,将其命名为SmTPS,GenBank注册号为JF937196。该基因cDNA全长2 836 bp,包含一个长为2 574 bp的ORF,编码857个氨基酸。生物信息学分析表明,分子量为97.04 kD,等电点为5.76,含α-螺旋、β转角、延伸连和无规则卷曲。该蛋白同时具有海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)的功能结构域。系统进化树分析表明丹参TPS功能域和拟南芥AtTPS6属于一类,而TPP功能域与低等生物酵母ScTPS2属于一类。实时定量PCR结果分析表明,SmTPS基因在丹参不同组织器官中差异表达,其茎中表达量最高。在干旱和低温处理下,其表达量与对照相比均可上调约2倍,表明SmTPS基因在丹参抵抗干旱和低温胁迫中发挥一定的作用。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2014年02期)

周斌辉[9](2013)在《巴西橡胶树6—磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达分析及其功能验证》一文中研究指出尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和6-磷酸葡萄糖(G-6-P)能够在6-磷酸海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的催化作用下生成6-磷酸海藻糖(T-6-P),再在6-磷酸海藻糖磷酸酶(trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP)的催化作用下生成海藻糖和无机磷(Pi)。而海藻糖是一种非常稳定的非还原性双糖,在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下能稳定细胞膜和蛋白质的结构,有效地保护细胞膜和蛋白质分子不变性失活,从而维持生命体的生命过程和生物特征,对生物体具有神奇的保护作用。但是,在橡胶树中尚未见有关海藻糖合成相关酶的研究报道。克隆TPS基因,了解其表达调控特点,并研究它们与橡胶树抵抗非生物胁迫能力的关系具有理论意义和应用前景。本论文首次对巴西橡胶树TPS基因进行了克隆,对其表达特性进行了系统分析,并通过转基因拟南芥研究这些基因的生物学功能。主要研究结果如下:1.搜索巴西橡胶树EST序列数据库,获得TPS基因EST组装后序列(contig),设计特异引物,运用PCR和RACE技术,首次从橡胶树中克隆了两个TPS基因的全长cDNA序列,分别命名为HbTPS和HbTPS2。HbTPS1基因编码928个氨基酸,HbTPS2基因编码940个氨基酸;亚细胞定位预测显示HbTPS1可能定位于内质网,而HbTPS2可能定位于线粒体或细胞核。蛋白疏水性预测显示HbTPS1和HbTPS2基因的编码蛋白都不具有跨膜区域,均为亲水性蛋白。2.利用实时荧光定量PCR研究了两个HbTPS基因的表达特性。在正常割胶的橡胶树不同组织(叶片、芽、雌花、雄花、种子、枝皮、老皮和胶乳)中,HbTPS1和HbTPS2基因均主要在树皮中表达;在未开割树的胶乳中,伤害和割胶均可诱导HbTPS基因上调表达,但在伤害处理的胶乳样品中HbTPS1基因的表达丰度远高于HbTPS2,而在正常割胶树的胶乳中HbTPS2基因的表达丰度远高于HbTPS1基因;在利用六种植物激素(或生长调节剂)进行处理后,HbTPS1基因的表达显着受乙烯利(ET)和生长素(2,4-D)诱导;HbTPS1和HbTPS2基因在赤霉素(GA)处理下,表达模式均为先下降再上升。在橡胶树幼苗中,HbTPS1和HbTPS2基因对低温(4℃)、高温(40℃)和干旱(20%PEG6000)胁迫处理的应答模式存在差异。低温处理后,HbTPS1基因的表达量在树皮和木质部中明显增高,在根中是先上升后下降;HbTPS2在树皮中明显增高,在木质部和根中也是先上升后下降。高温处理后,HbTPS1基因的表达量在叶片中出现先上升后下降的趋势,在根中则是大幅度增高;HbTPS2基因在木质部中先上升后下降,在根中也是大幅度增高。干旱处理后,HbTPS1基因的表达量在根中大幅度提高;HbTPS2基因在树皮、木质部和根中都出现先下降后大幅上升的趋势。3.运用Genome Walking技术克隆了HbTPS1基因1596bp的5’调控区序列、HbTPS2基因1509bp的5’调控区序列。启动子分析表明HbTPS2的5’调控区序列中含有一个真核生物典型的核心启动子区域,同时这两个基因的5’调控区序列中均包含多种顺式作用元件,其中部分元件的功能已在基因表达分析中得到了验证。4.运用mRNA原位杂交技术,对两个HbTPS基因的mRNA在橡胶树嫩茎和中脉两种组织中的分布进行了分析。结果显示,两个HbTPS基因的mRNA都主要定位于两种组织的韧皮部中,HbTPSl基因的mRNA表达量在中脉中高于嫩茎,而HbTPS2基因在嫩茎中的表达量明显高于中脉。5.利用酵母TPS突变株的互补实验,显示两个HbTPS基因都能互补酵母突变株的TPS功能,表明它们都是有功能的TPS基因。6.获得了两个HbTPS基因的过表达转基因拟南芥植株。冷冻、高温、干旱和高盐四种非生物胁迫实验显示转HbTPS1基因的拟南芥植株的抗逆能力明显高于野生型拟南芥,转HbTPS2基因的拟南芥植株的生长速度明显快于野生型拟南芥,并且提早开花。本研究首次获得了两个有功能的巴西橡胶树TPS基因,并系统研究了它们的组织表达和胁迫应答特性,同时利用转基因拟南芥证明两个HbTPS基因分别具有抵御逆境胁迫、促进植物生长和提早花期的功能。本文结果,为进一步阐明橡胶树TPS基因的生物学功能奠定了良好的基础,为橡胶树转基因育种提供了可靠的靶标基因,具有理论意义和应用前景。(本文来源于《海南大学》期刊2013-06-01)

谢翎,黄勃[10](2013)在《球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建》一文中研究指出本研究针对球孢白僵菌的tps1基因,通过双酶切和T4连接,构建了tps1基因的真核表达载体pPIC9K/tps1。PCR鉴定和测序表明,该重组质粒包含了球孢白僵菌tps1基因的全长cDNA序列。并且Bbtps1基因被正确地插入到了pPIC9K质粒的表达框中。因此,该重组质粒可以直接用于tps1基因的酵母表达。(本文来源于《长春师范学院学报》期刊2013年04期)

磷酸海藻糖合成酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

6-磷酸海藻糖合成酶(EC2.4.1.15)催化尿苷二磷酸葡萄糖与6-磷酸葡萄糖合成6-磷酸海藻糖,该反应为海藻糖合成的第一步反应。为了确定平菇中该酶的基因及酶动力学参数,本研究将平菇中6-磷酸海藻糖合成酶基因进行了克隆测序,得到一段1665 bp的开放阅读框,该序列编码一个554个氨基酸的蛋白质,预测分子大小为62.01 k Da。将该基因在大肠杆菌BL21菌株中进行表达,并将异源表达蛋白进行纯化及特性分析。结果表明:该异源表达蛋白的最适p H为7.4,最适温度为30℃;6-磷酸葡萄糖和尿苷二磷酸葡萄糖的Km值分别为0.14和0.17 mM;Vmax和Kcat值分别为91.86 nkat/g和5.89 s-1。平菇菌丝在40℃热处理15 h后海藻糖的含量达到最高值,即158.88 mg/g干重,这与该时间点6-磷酸海藻糖合成酶的酶活最高相一致。这些结果表明克隆得到的6-磷酸海藻糖合成酶在平菇中参与了海藻糖的合成。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

磷酸海藻糖合成酶论文参考文献

[1].何道文,刘小红,赵欢,张咏祀.海藻糖-6-磷酸合成酶基因的序列优化与表达研究(英文)[J].华北农学报.2018

[2].雷敏,邬向丽,张金霞,王贺祥,黄晨阳.平菇6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达及酶学特性研究[C].中国菌物学会第七届全国会员代表大会暨2017年学术年会摘要集.2017

[3].高艳艳.古菌Thermoplasmaacidophilum6-磷酸海藻糖合成酶的克隆、表达及其性质鉴定[D].齐鲁工业大学.2015

[4].史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添.坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)家族基因的克隆及表达特征分析[J].水产学报.2015

[5].王娟娟.球孢白僵菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的功能解析及其同生物防治潜能的关联[D].浙江大学.2015

[6].李莹,柳参奎.碱茅6-磷酸海藻糖合成酶基因的克隆及其耐逆性分析[J].草业学报.2015

[7].史健志,徐燕,纪德华,陈昌生,谢潮添.坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶(TPS)基因家族的克隆及表达分析[C].2014年中国水产学会学术年会论文摘要集.2014

[8].岳思思,姚伟,王东浩,陈玉芹,王喆之.丹参海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SmTPS)的克隆及其表达分析[J].基因组学与应用生物学.2014

[9].周斌辉.巴西橡胶树6—磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表达分析及其功能验证[D].海南大学.2013

[10].谢翎,黄勃.球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建[J].长春师范学院学报.2013

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磷酸海藻糖合成酶论文-何道文,刘小红,赵欢,张咏祀
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