沙门菌LAMP检测方法的建立

论文摘要

为动物产品沙门菌快速检测提供技术支持,针对沙门菌属特异性的侵袭蛋白（Invasion protein,invA）基因设计2对引物,建立了一种环介导等温扩增（Loop-mediated iso?thermal amplification,LAMP）方法。对优化后的LAMP方法进行了特异性检测、灵敏度检测及沙门菌人工污染鸡蛋内容物检测。结果表明,该LAMP法可快速、特异地检测出沙门菌。LAMP法对细菌培养物检出限为8.7×100cfu/mL,对人工污染鸡蛋内容物中沙门菌的检出限为9.5×100cfu/mL。该方法有望用于鸡蛋中沙门菌的快速检测。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

1.2.1 引物设计与合成

1.2.2 细菌DNA模板制备

1.2.3 LAMP反应体系及反应条件的建立与优化

1.2.4 LAMP反应结果判定

1.2.5 检测沙门菌属PCR的建立

1.2.6 LAMP方法特异性与灵敏度检测

1.2.7 LAMP方法检测沙门菌人工污染鸡蛋内容物试验

2 结果与分析

2.1 LAMP体系优化结果

2.1.1 反应条件的优化

2.1.2 反应体系的优化

2.2 LAMP反应可视化结果

2.2.1 琼脂糖凝胶电泳结果

2.2.2 添加指示剂显色法结果

2.3 特异性试验结果

2.4 灵敏度检测结果

2.5 LAMP方法检测沙门菌人工污染鸡蛋内容物试验结果

3 讨论

4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李阳,陈立功,张虎,刘铭,张哲,李双江,刘聚祥,王学静

关键词: 沙门菌,环介导等温扩增,侵袭蛋白,特异性,灵敏性

来源: 中国家禽 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 轻工业手工业,预防医学与卫生学

单位: 河北农业大学动物医学院,农业部动物疫病病原生物学华北科学观测实验站,河北省畜牧兽医研究所

基金: 河北省现代农业产业技术体系项目(HBCT2013090202),河北省现代农业产业技术体系蛋肉鸡创新团队(HBCT2018150210,HBCT2018150205)

分类号: R155.5

DOI: 10.16372/j.issn.1004-6364.2019.04.004

页码: 17-21

总页数: 5

文件大小: 2806K

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沙门菌LAMP检测方法的建立

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