导读:本文包含了纯化和特性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:层析,种子,特性,东乡,黄瓜,蛋白,鉴定。
纯化和特性论文文献综述
肖伟,徐梅珍,谷丰,蒋伦伟,王义华[1](2019)在《东乡野生稻过氧化物酶分离纯化及其酶学特性研究》一文中研究指出过氧化物酶与植物体内活性氧的清除和逆境适应性反应密切相关,为了深入研究过氧化物酶在植物抗逆反应中的重要作用,以东乡野生稻叶片组织为材料,采用浸提、盐析、透析和柱色谱法分离纯化POD蛋白,采用聚丙烯凝胶活性电泳检测蛋白,利用愈创木酚法研究POD的活性和酶学特性。结果表明,经磷酸缓冲液浸提、40%~80%硫酸铵盐析、再经Sephadex G-100凝胶柱层析等步骤,从东乡野生稻叶片组织分离制备得到POD1同工酶组分,酶蛋白的纯化倍数为16.49,比活力为568.80 U/mg。聚丙烯凝胶活性电泳检测仅呈单一POD1同工酶带,属于单一组分。POD酶Km为1.26 mmol/(L·min),最大反应速度Vmax为17.51 mmol/(L·min),最适宜的pH 5.0,最适宜温度35℃~45℃,Cu~(2+)和Zn~(2+)对POD有较强的激活作用,而Fe~(3+)对POD活性有一定的抑制作用,POD酶活性受20%的甲醇、乙醇和丙酮等有机试剂抑制。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年36期)
杨晓月,李小平,李晨[2](2019)在《藜麦麸过氧化物酶分离纯化及酶学特性研究》一文中研究指出经浸提、硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,从藜麦麸中纯化得到了电泳纯的过氧化物酶(peroxidase,POD),其纯化倍数、比活力和回收率分别为23.78,22 753.09 U/mg和19.36%。经SDS-PAGE鉴定,该酶相对分子质量为57.1 ku。在催化愈创木酚与过氧化氢的反应中,酶的最适温度为60℃,最适pH值为6.0,在40~60℃及pH值4~8范围内具有较好的稳定性。以H_2O_2为底物,测得该酶的Km值为5.61 mmol/L。尿素、Mg~(2+)和Fe~(3+)对酶有激活作用,当其浓度为50 mmol/L时,酶活力被分别激活至119%,117%,161%;K~+,Ca~(2+)对藜麦麸POD无显着影响;甲醇,乙醇,异丙醇,正丁醇,KSCN,SDS,Zn~(2+),Cu~(2+),Mn~(2+)对酶有抑制作用,其中,正丁醇和SDS对酶的抑制作用很强,当正丁醇体积分数为20%,SDS浓度为10 mmol/L时,酶的活性完全丧失。(本文来源于《山西农业科学》期刊2019年06期)
何雨[3](2019)在《野生玫瑰果类胡萝卜素提取纯化及品质特性的研究》一文中研究指出本研究以野生玫瑰果为实验材料,先用HPLC法测定了品系-1和品系-3果皮和果肉中叶黄素、玉米黄质、β-胡萝卜素和番茄红素的含量及变化趋势,之后对野生玫瑰果类胡萝卜素的提取条件、纯化工艺、抗氧化性和稳定性进行了研究与分析,目的在于了解野生玫瑰果中类胡萝卜素的品质特性,为野生玫瑰果的产品开发及天然色素的选择提供参考。主要的研究结果如下:1、两个品系的果皮和果肉中均含有叶黄素、玉米黄质、β-胡萝卜素和番茄红素,且随着果实的成熟,色素含量逐渐增加;品系-1四种类胡萝卜素含量显着高于品系-3,品系-1果皮中四种类胡萝卜素含量显着高于果肉,是良好的类胡萝卜素资源。2、响应面优化超声波辅助提取野生玫瑰果类胡萝卜素的最佳提取工艺条件为:料液比1:135g/mL,超声时间98min,超声功率350W,超声温度55℃,此工艺条件下类胡萝卜素提取得率为74.30 mg/100g。3、大孔树脂纯化野生玫瑰果类胡萝卜素的工艺条件为:选取AB-8型树脂,吸附时间2 h,上样质量浓度0.639 mg/mL,洗脱剂为正己烷,上样体积140 mL,洗脱剂体积440 mL,纯度由0.28%增加到13.93%,提高了 49.75倍;粗提物和纯化物中含有相似的类胡萝卜素组成,均可以检测到叶黄素、玉米黄质、β-胡萝卜素和番茄红素,纯化物中四种类胡萝卜素含量均高于粗提物,含量增加倍数依次为:β-胡萝卜素>番茄红素>叶黄素>玉米黄质。4、野生玫瑰果类胡萝卜素粗提物和纯化物对DPPH.自由基和ABTS·+自由基均具有较强的清除能力,且呈现明显的浓度依赖趋势。粗提物清除DPPH·自由基的IC50值为6.51ug/mL,低于Vc,清除能力高于Vc,纯化物的IC50值为0.34 mg/mL,高于Vc,清除能力低于Vc,纯化物的IC50值比粗提物高52.23倍;粗提物和纯化物清除ABTS·+自由基的IC50值分别为5.01ug/mL和35.58 ug/mL,低于Vc,清除能力均高于Vc,纯化物IC50值比粗提物高7.10倍。5、随着温度升高,粗提物和纯化物中类胡萝卜素保存率下降,储藏96h之后,粗提物和纯化物中的类胡萝卜素在-20℃条件下的保存率最高,分别为93.98%、97.37%;在避光条件下,粗提物和纯化物中类胡萝卜素保存率最高,在储藏8h之后,其保存率分别为80.16%、97.31%;低温储藏24 h之后,加入0.1mol/LNa+、K+、Ca2+、Mg2+和A13+的粗提物和纯化物溶液中的类胡萝卜素保存率仍高于80%,而加入0.1 mol/LFe2+和Fe3+的粗提物和纯化物溶液中的类胡萝卜素保存率仅50%左右,Fe2+和Fe3+对类胡萝卜素稳定性的影响较大;纯化物中类胡萝卜素的稳定性高于粗提物。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-27)
王纳纳[4](2019)在《重组SipoEXLX2增效蛋白的表达、纯化及特性研究》一文中研究指出作为地球最丰富的生物质能源,木质纤维素可经纤维素酶降解为葡萄糖进而转化为生物乙醇等燃料,但由于木质纤维素高度复杂的结晶结构致使木质纤维素的酶解受到了阻碍。纤维素酶增效蛋白作为一种非水解性蛋白,已被认为是提高纤维素酶水解效率,减少酶载量的选择。本实验室克隆构建了一株来源于甘薯链霉菌的含增效蛋白基因的重组菌,SipoEXLX2为增效蛋白基因的表达产物。在前期纯化中未能得到单一条带的SipoEXLX2目的蛋白。因此,本文开展了SipoEXLX2增效蛋白的表达纯化、作用机理和协同纤维素酶降解碱处理水稻秸秆等工作,实验结果如下:通过重新构建质粒载体,在C-末端增加His标签,纯化得到了纯度大于90%,协同增效大于1倍的SipoEXLX2增效蛋白。经过诱导条件优化,SipoEXLX2蛋白在IPTG为1M,16℃诱导12h的条件下,目的蛋白上清中的表达量达到约35 mg/L。SipoEXLX2增效蛋白协同纤维素酶降解滤纸的影响因素和作用机理研究。SipoEXLX2增效蛋白协同纤维素酶的最佳协同条件是pH 4.8、温度50℃、250μg SipoEXLX2增效蛋白和0.06 FPU/g cellulose纤维素酶载量。SEM、FTIR、XRD、和万能试验机对SipoEXLX2增效蛋白预处理前后的滤纸进行检测分析。滤纸经SipoEXLX2增效蛋白预处理后,SEM显示滤纸表面结构疏松,结晶度降低;FTIR显示滤纸的氢键强度和结晶度分别下降了 25.6%和2.7%;由于滤纸处理问题,XRD显示滤纸结晶度提高1.2%;万能试验机显示滤纸的拉伸强度下降6.4%。此外,SipoEXLX2增效蛋白能提高纤维素酶的热稳定性。SipoEXLX2增效蛋白协同酶解碱处理水稻秸秆的因素考察。分别在SipoEXLX2增效蛋白加入量为300 ug,底物固含量为2%和酶载量为0.90 U/g substrate条件下,SipoEXLX2增效蛋白对协同降解碱处理水稻秸秆的影响效果最佳,还原糖产量最大提高21.3%。实验结果表明SipoEXLX2增效蛋白能提高对预处理的纤维底物的降解,其在纤维原料水解中具有潜在应用价值。(本文来源于《广西大学》期刊2019-05-01)
孟翔宇[5](2019)在《玫瑰茄花色苷提取与分离纯化及特性研究》一文中研究指出玫瑰茄具有很高的药用价值和食用价值,例如可以利用玫瑰茄花萼制作蜜饯、花茶等;玫瑰茄花色苷具有抗氧化、预防糖尿病和抗炎症等对人体有益的生理功效。玫瑰茄生长在亚热带地区,花期长,产量高,在食品和医药行业备受关注。玫瑰茄花色苷易受环境因素影响发生降解,因此本文主要探究玫瑰茄花色苷的工艺和特性,为大力开发玫瑰茄花色苷提供实验基础。(1)以玫瑰茄花色苷提取量为评价指标,响应面法优化超声微波提取玫瑰茄花色苷工艺参数。最优工艺参数条件:超声功率350 W,提取温度50℃,微波功率279W,提取时间18 min,乙醇体积分数60%,液料比36:1(mL/g)。利用pH示差法计算玫瑰茄花色苷提取量为787.56 mg/100g。(2)选择AB-8、D101、NKA-II和HPD-100四种大孔树脂,以静态吸附率和解吸率两个评价指标筛选出对玫瑰茄花色苷纯化效果最佳的大孔树脂。由静态纯化实验可知,AB-8大孔树脂对玫瑰茄花色苷的静态吸附率为88.58%,静态解吸率为90.37%,实验结果表明,AB-8大孔树脂纯化效果优于其他叁种树脂,因此,选择AB-8大孔树脂进行后续的动态纯化实验。在动态吸附和解吸实验的基础上,通过单因素实验和响应面优化设计实验,确定了玫瑰茄花色苷最佳动态吸附条件:上样液pH2.5,上样浓度3.0 mg/mL,上样流速2.0 mL/min,并在此条件下进行叁组平行实验,得到的玫瑰茄花色苷动态吸附率为99.2%;最佳解吸条件:洗脱液pH 2.0,洗脱液浓度80%,洗脱流速为4.0 mL/min,以同样的条件设计叁组平行实验,得到玫瑰茄花色苷解吸率为92.15%。花色苷的色价由原来的2.35提高到30.2。(3)选用Sephadex LH-20葡聚糖凝胶对AB-8大孔树脂纯化后的玫瑰茄花色苷进一步分离纯化。考察上样浓度、洗脱液浓度和洗脱流速对玫瑰茄花色苷分离纯化效果的影响,通过测定收集组分的紫外吸光度值,确定了分离纯化的最佳工艺条件:上样浓度20 mg/mL,洗脱液浓度50%甲醇(pH 3),洗脱流速0.3 mL/min,在此条件下,玫瑰茄花色苷分离效果最好,收集到一个组分峰。通过HPLC-MS和质谱信息对纯化后玫瑰茄花色苷组分进行初步鉴定。结果表明玫瑰茄花色苷一个组分峰中有2种花色苷成分,分别为飞燕草素-3-桑布双糖苷和矢车菊素-3-桑布双糖苷。(4)以玫瑰茄花色苷溶液的吸光度和L*、a*、b*值为指标,评价玫瑰茄花色苷的稳定性。实验结果表明,玫瑰茄花色苷在4℃低温条件下能很好的保存,并且能保持花色苷本身红色的颜色特征。pH对玫瑰茄花色苷的稳定性影响很大,在酸性条件下,玫瑰茄花色苷稳定性很好,且颜色保持红色不变;在碱性条件下,花色苷稳定性较差,且改变了玫瑰茄花色苷原始的颜色特征。Na~+、K~+、Mg~(2+)和Ca~(2+)四种离子,对玫瑰茄花色苷有一定的辅色作用;Fe~(2+)、Cu~(2+)和Al~(3+)叁种离子对玫瑰茄花色苷稳定性有一定的破坏作用,所以在实际应用时,避免与其接触。(5)采用DPPH法、·OH清除能力和总还原能力3种方法测定玫瑰茄花色苷的抗氧化活性。实验结果表明,在一定的范围内,纯化物花色苷与Vc对DPPH自由基的清除能力相当,但两者对DPPH自由基的清除能力明显高于提取物花色苷;在高浓度条件下,玫瑰茄花色苷能有效的清除·OH自由基,但弱于Vc清除能力;玫瑰茄花色苷具有一定的总还原能力,总还原能力顺序依次为Vc>纯化物花色苷>提取物花色苷。(本文来源于《天津商业大学》期刊2019-05-01)
朋贤,杨继国,朱洁盈,郭景景,唐语谦[6](2019)在《重组ZEN降解酶Oxa的纯化及特性研究》一文中研究指出以表达可高效降解玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN,ZEA)的氧化酶Oxa的毕赤酵母工程菌GS115/p PIC9K-Oxa为研究对象,将发酵液经乙醇沉淀、阴离子交换色谱和超滤纯化后,检测重组Oxa酶降解ZEN的活力,分析其二级结构,并对相关酶学特性进行研究。结果表明,氧化酶Oxa的纯化倍数达到20倍以上,纯化后的Oxa针对ZEN的降解率达到80%以上,其二级结构主要由无规卷曲和β-折迭组成,辅以少量的β-转角和α-螺旋,该酶的最适作用温度和pH分别为60℃和9.0,并且在50~70℃和pH9.0~11.0时保持60%以上的ZEN降解率,具有典型的耐高温碱性酶的特征,反应体系中适量的Cu~(2+)、Fe~(2+)和Fe~(3+)的加入能提高其降解活力。本论文为进一步研究氧化酶Oxa的分子结构及作用方式奠定了基础,对ZEN的生物降解具有显着的实际意义。(本文来源于《现代食品科技》期刊2019年05期)
谷端银,高俊杰,焦娟,刘中良,闫伟强[7](2019)在《纯化腐植酸对氮胁迫下黄瓜幼苗光合特性及碳代谢的影响》一文中研究指出为研究纯化腐植酸(PHA)在不同水平氮胁迫下对黄瓜幼苗光合特性及碳代谢的影响,探明PHA对逆境胁迫的缓解作用机制,采用水培方式,选用黄瓜"新泰密刺"为供试品种,以正常氮水平(11 mmol/L NO_3~-)为对照,进行低氮胁迫(1 mmol/L NO3-)和高氮胁迫(101 mmol/L NO_3~-)处理。结果表明,与对照相比,低氮胁迫显着降低光合色素含量。PHA显着增加了对照、高氮胁迫下光合色素含量,提高了对照及低氮胁迫下叶片1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)活性。光合参数方面,氮胁迫下降低了光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr),PHA提高了对照及低氮胁迫下的Pn、Gs,降低了高氮胁迫下的Tr,各PHA处理均降低了叶片胞间CO_2浓度(Ci),增大了气孔限制值(Ls),提高了水分利用效率(WUE)。在碳代谢方面,PHA提高了氮胁迫下根系及叶片磷酸蔗糖合酶(SPS)活性及根系蔗糖合酶(SS)活性,提高了黄瓜根系及叶片中可溶性糖含量。综上,添加PHA缓解了氮胁迫对黄瓜幼苗光合特性及碳代谢的抑制作用。(本文来源于《腐植酸》期刊2019年02期)
郭玉华[8](2019)在《油茶籽粕多糖的分离纯化、理化特性及抗氧化活性研究》一文中研究指出油茶籽粕为油茶籽榨油后的副产物,其中含大量的多糖类物质。开发利用油茶籽粕多糖具有理论价值和实践意义。本研究以油茶籽粕为原料,优化了油茶籽粕多糖的提取及脱蛋白工艺,并对纯化后的多糖进行结构鉴定和抗氧化研究。主要研究结果如下:(1)优化了油茶籽粕多糖超声波辅助提取工艺。正交试验得出较优工艺条件为:超声时间15 min,料液比1:25,提取温度70℃,提取时间150 min。此条件下油茶籽粕粗多糖的平均提取率为16.76%。(2)优化了油茶籽粕粗多糖的脱蛋白工艺。确定木瓜蛋白酶为最佳酶种类。响应面法优化酶辅助脱蛋白的较优工艺条件为:酶添加量为3.10%,酶处理温度为57.5℃,pH=6.0,此条件下蛋白质脱除率为87.17%,多糖损失率为18.13%。(3)粗多糖经过DEAE-52纤维素阴离子交换树脂分离,得到了四种多糖组分:SCP-a(水洗)、SCP-b(0.2M NaCL)、SCP-s(0.4M NaCL)、SCP-c(0.8M NaCL)。SCP-s经葡聚糖凝胶G-200纯化得到两种多糖组分SCP-s1和SCP-s2。并对所得的SCP-a、SCP-b、SCP-c、SCP-s1和SCP-s2进行理化表征。紫外光谱扫描显示其几乎不含有核酸和蛋白质,红外光谱(FT-IR)显示其具有多糖的特征吸收峰,SCP-a、SCP-b、SCP-c、SCP-s1和SCP-s2分子量分别为8.26×10~4 Da、2.05×10~7 Da、1.44×10~7Da、2.00×10~4 Da和7.16×10~6 Da。甘露糖是其单糖组成中占比最大的一种单糖,热特性分析显示,五种多糖的热焓分别为163.2、182.4.5、149.8、186.2和112.5 J/g。X-射线衍射分析显示纯化多糖均呈现出半结晶态。(4)粗多糖(CCP)和3种纯化多糖(SCP-a、SCP-b、SCP-c)的抗氧化活性呈现剂量依赖性,四种多糖的ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力较为显着。油茶籽粕多糖抗肝组织脂质过氧化能力和羟基自由基清除能力均与铁离子螯合能力呈现出协同一致性。(本文来源于《合肥工业大学》期刊2019-04-01)
阎华,王会,于博,黄升谋,李云捷[9](2019)在《短小芽孢杆菌HB-3的分离鉴定及其淀粉酶的纯化特性研究》一文中研究指出从湖北省襄阳市叁九酿酒厂下水道污泥分离筛选得到产淀粉酶菌株HB-3,根据菌株生长形态和生理生化特征分析,初步鉴定为短小芽孢杆菌。短小芽孢杆菌HB-3在淀粉培养基上培养72 h后,淀粉酶活力达到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52阴阳离子交换层析柱对短小芽孢杆菌HB-3产生的淀粉酶进行了部分纯化。结果表明,短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶经过部分纯化后,纯化倍数为5.9,酶活力回收率为90.9%。纯化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝胶电泳研究,以标准蛋白为对照,计算出短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶分子量为56.5 kDa。同时对短小芽孢杆菌HB-3的淀粉酶进行了纯化特性研究,结果表明,该酶的酶促反应最适温度为50℃,40~60℃热稳定性良好;该酶的酶促反应最适pH为5.0,pH 4.0~6.0酸碱稳定性良好,该酶对底物淀粉的反应动力学米氏常数K_m为0.062 mmol/L,最大反应速率V_(max)为3.019 mmol/(L·min)。(本文来源于《保鲜与加工》期刊2019年02期)
谷端银,高俊杰,焦娟,王秀峰[10](2019)在《纯化腐植酸对NO_3~-胁迫下黄瓜种子萌发及生理生化特性的影响》一文中研究指出以"新泰密刺"和"津优1号"黄瓜种子为试材,采用培养皿发芽方式,研究了添加纯化腐植酸PHA(添加浓度0、25、50、100、150 mg/L)对NO_3~-胁迫下(75 mmol/L)黄瓜种子萌发及幼芽抗氧化物酶活性的影响。结果表明:NO_3~-胁迫使黄瓜种子发芽率、主根长、侧根长、侧根数、下胚轴长度和粗度以及幼芽鲜质量明显减少;添加PHA处理使2个黄瓜品种的上述项目值都明显增加,表明部分缓解了NO_3~-胁迫。黄瓜种子发芽过程中,(本文来源于《腐植酸》期刊2019年01期)
纯化和特性论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
经浸提、硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,从藜麦麸中纯化得到了电泳纯的过氧化物酶(peroxidase,POD),其纯化倍数、比活力和回收率分别为23.78,22 753.09 U/mg和19.36%。经SDS-PAGE鉴定,该酶相对分子质量为57.1 ku。在催化愈创木酚与过氧化氢的反应中,酶的最适温度为60℃,最适pH值为6.0,在40~60℃及pH值4~8范围内具有较好的稳定性。以H_2O_2为底物,测得该酶的Km值为5.61 mmol/L。尿素、Mg~(2+)和Fe~(3+)对酶有激活作用,当其浓度为50 mmol/L时,酶活力被分别激活至119%,117%,161%;K~+,Ca~(2+)对藜麦麸POD无显着影响;甲醇,乙醇,异丙醇,正丁醇,KSCN,SDS,Zn~(2+),Cu~(2+),Mn~(2+)对酶有抑制作用,其中,正丁醇和SDS对酶的抑制作用很强,当正丁醇体积分数为20%,SDS浓度为10 mmol/L时,酶的活性完全丧失。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纯化和特性论文参考文献
[1].肖伟,徐梅珍,谷丰,蒋伦伟,王义华.东乡野生稻过氧化物酶分离纯化及其酶学特性研究[J].中国农学通报.2019
[2].杨晓月,李小平,李晨.藜麦麸过氧化物酶分离纯化及酶学特性研究[J].山西农业科学.2019
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