导读:本文包含了免疫蛋白表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,病毒,免疫,细胞,杆状,白介素,大鲵。
免疫蛋白表达论文文献综述
仝光杰,王文伟,蔡蓓蓓,王蓓,胡海涛[1]（2019）在《人乳头瘤病毒52型L1蛋白病毒样颗粒在毕赤酵母中的优化表达、纯化及其免疫原性》一文中研究指出目的利用毕赤酵母系统表达人乳头瘤病毒52型(human papillomaviruses 52,HPV52)L1蛋白,并检测其病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的免疫原性。方法采用同义密码子替换的方法对HPV52 L1蛋白的野生型基因进行密码子优化,并在体外构建多拷贝表达质粒,经转化和筛选获得在毕赤酵母系统中高表达的HPV52 L1 VLP菌种。采用15 L发酵罐大规模培养,菌液破碎上清经阳离子交换层析和分子筛排阻层析两步法纯化,获得HPV52 L1VLP。动态光散射和透射电子显微镜观察HPV52 L1 VLP的大小和形态,假病毒中和试验检测HPV52 L1 VLP在小鼠及大鼠体内的免疫原性。结果 HPV52 L1 VLP在溶液中呈较均一的单一组分,水合粒径为91. 37 nm;镜下观察呈均一的、直径约50 nm的球状空心颗粒,大小与HPV52天然病毒颗粒相近。HPV52 L1 VLP相对分子质量约56 000,纯度达95%以上,产量为3. 6 mg/L,且可与小鼠抗HPV L1多克隆单抗发生特异性结合。HPV52 L1 VLP在小鼠体内的半数有效剂量(ED_(50))为0. 010μg,在大鼠体内诱导产生的中和抗体滴度高达106。结论于毕赤酵母系统成功表达了HPV52 L1 VLP,且具有良好的免疫原性,为相关预防性疫苗的研发奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年12期）
胡玲珑,温正旺,俞佳珂,陈洁,石海矾[2]（2019）在《单免疫球蛋白-白介素1受体蛋白在原发性EB病毒感染肝损伤患儿血清中的表达及临床意义》一文中研究指出目的探讨单免疫球蛋白-白介素1受体蛋白(SIGIRR)在原发性EB病毒感染肝损伤患儿血清中的表达及临床意义。方法选取40例原发性EB病毒感染患儿(入院时EB-IgM和EB-DNA检测均阳性)为A组,门诊体检EB-IgG阳性(EB-VCA-IgG、EB-NA-IgG)而EB-IgM阴性的40例儿童为B组,门诊体检EB-IgG和EB-IgM均阴性的40例儿童为C组。检测并比较A组入院时及治疗1周后血清SIGIRR表达水平及AST、ALT水平,比较3组对象血清SIGIRR表达水平,同时分析A组入院时及治疗1周后血清SIGIRR表达水平与ALT水平的相关性。结果治疗1周后,原发性感染患儿血清SIGIRR表达水平明显升高,ALT水平明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);而AST水平变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。A组入院时血清SIGIRR表达水平与B、C组的差异有统计学意义(P<0.05),治疗1周后与B、C组的差异无统计学意义(P>0.05)。原发性感染患儿入院时血清ALT水平明显升高,与血清SIGIRR表达水平呈负相关(r=-0.806,P<0.05),治疗1周后两者未见相关性(r=0.106,P>0.05)。结论 EB病毒感染后患儿血清SIGIRR表达水平明显降低,与ALT水平相关,是肝损伤的保护因子。(本文来源于《浙江医学》期刊2019年23期）
明成玥,柯飞,张奇亚[3]（2019）在《蛙病毒同源蛋白RGV-27R和ADRV-85L的表达及其免疫原性分析》一文中研究指出沼泽绿牛蛙病毒(Rana grylio virus,RGV)和大鲵蛙病毒(Andrias davidianus ranavirus,ADRV)同属虹彩病毒科(Iridoviridae)蛙病毒属(Ranavirus)成员,是引起水产动物高死亡率的病原。其同源早期蛋白RGV-27R和ADRV-85L与蛙病毒代表株蛙病毒3型(Frog virus 3,FV3)25R基因所编码的大小为31kD的早期蛋白P31K(FV3-P31K)同一性超过99%。我们在观察和比较RGV与ADRV感染大鲵胸腺细胞(Giant salamander thymus cell,GSTC)显微病变的基础上,将ADRV-85L和RGV-27R基因分别克隆到原核表达载体pET-32a与pMAL-p5X中,转化宿主菌E·coli BL21(DE3)并诱导表达,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测,对这两种蛋白的原核表达及其产物免疫原性进行分析。结果显示这两种基因在载体pET-32a中的表达效率要显着高于pMAL-p5X。随后,取高效诱导表达的pET-32a-RGV-27R产物,经Ni-NTA His-Bind亲和层析分离提纯,获得浓度为1.2 mg/mL的融合蛋白His-RGV-27R,用其免疫动物,制备了抗体27R-Ab,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体的效价为1∶6.25×10~6。用经正常大肠杆菌菌液和正常GSTC细胞悬液吸附处理后的抗体作为一抗,对被RGV或ADRV感染的GSTC细胞悬液进行Western Blot检测,并以重组原核质粒表达的融合蛋白His-RGV-27R和HisADRV-85L作为阳性对照,以正常GSTC细胞悬液为阴性对照,分别从RGV或ADRV感染的GSTC细胞悬液中,检出大小同为31kD的特异性蛋白条带。本研究证实两种蛙病毒同源早期蛋白RGV-27R和ADRV-85L不仅都能在两栖动物细胞中表达,且具有相同的抗原特性,这为深入研究这类病毒蛋白对蛙病毒复制的影响及其与宿主相互作用的分子机制提供了实验材料。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年06期）
龚凤平,冯晓声,王伟,罗梦萍,马海彬[4]（2019）在《鸭坦布苏病毒全长E蛋白可溶性表达及免疫原性分析》一文中研究指出鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)引起的一种以产蛋量和采食量严重下降为主要特征的传染病。应用RT-PCR方法扩增DTMUV GDHD2014-3毒株的囊膜(E)蛋白全基因序列,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c5x,构建重组表达质粒E-pMAL。将其转化E.coli BL21感受态细胞,经诱导表达条件优化,在30℃条件下IPTG诱导,可溶性表达重组的全长E蛋白(rf E),大小约110 ku。用Amylose Resin对目的蛋白进行纯化,并将纯化的rf E蛋白免疫Balb/c小鼠,制备多克隆血清抗体。经Nu-PAGE以及Western blot分析,成功实现rf E蛋白可溶性表达,并能与DTMUV灭活疫苗免疫鸭血清多抗产生特异性反应。间接免疫荧光试验结果表明,rf E蛋白免疫小鼠获取的多克隆血清抗体能与DTMUV反应。实现了rf E蛋白的可溶性表达及纯化,并验证rf E蛋白具有良好的免疫原性,为DTMUV的亚单位疫苗的研制以及相关诊断试剂的开发奠定了基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期）
陈薪竹,柯法钧,王丹,洪艳平,王玉波[5]（2019）在《抗呋喃它酮代谢物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件优化及直接竞争酶联免疫分析方法的建立》一文中研究指出优化抗呋喃它酮代谢物(AMOZ)单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(AMOZscFv-AP)的可溶性表达条件,提高融合蛋白的表达量,建立基于此融合蛋白的AMOZ残留直接竞争酶联免疫分析方法(dcELISA)。将含有AMOZscFv-AP融合蛋白的基因工程菌进行液体发酵培养,研究在不同宿主菌、培养基、培养基初始PH、诱导时期、诱导时间以及诱导剂浓度等条件下此融合蛋白表达水平的差异,优选出最佳表达条件,制备得到融合蛋白,建立AMOZ残留的dcELISA方法。结果表明:融合蛋白AMOZscFv-AP的最佳表达条件为选用E.coli BL21(DE3)pLysS为宿主菌,在初始PH为7.0的SB培养基中培养至A600nm为0.6左右时,用浓度为0.6 M的IPTG诱导9 h;建立的dcELISA方法IC_(50)值和LOD值分别10.62 ng/mL、4.83 ng/mL,线性检测范围为6.38～23.13 ng/mL,批内变异系数均小于10%,除原药呋喃它酮外,此融合表达单链抗体与其它硝基呋喃类抗生素及其代谢物交叉反应率均小于0.1%,鱼肉样品添加回收率为71.31%～82.88%,均符合相关检测要求。本研究建立的dcELISA方法可更快、更简便的检测食品中的呋喃它酮代谢物AMOZ残留。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13）
高云山,刘丹丹,徐俊林,桑雨浓,梁夏夏[6]（2019）在《嗜水气单胞菌孔蛋白OmpF重组表达及其免疫原性分析》一文中研究指出气单胞菌外膜蛋白OmpF是β-桶状结构的孔蛋白,参与渗透压环境适应调控,在人鱼共患病原气单胞菌属中保守性较高,作为免疫检测靶点具有较高的研究价值。通过人工合成得到了GenBank已发表的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)OmpF基因片段,将其插入质粒pET-28a(+)后转入大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达出分子量为40 kD左右的重组蛋白。经过优化表达温度和IPTG诱导浓度等后,重组蛋白主要以包涵体的形式表达。采用纯化的包涵体免疫BALB/c小鼠,ELISA结果表明小鼠血清与煮沸灭活的11株气单胞菌中的10株(10/11)均有特异性交叉反应,效价在1∶81 000,与副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、鳗弧菌、哈维氏弧菌及地衣芽孢杆菌无交叉反应。上述结果表明重组蛋白OmpF具有较好的免疫原性和气单胞菌保守性,可以用于制备气单胞菌交叉型抗体。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年09期）
孙一,李如梦,李军,马春喜,赵以恒[7]（2019）在《表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗候选株的构建与免疫效果评估》一文中研究指出为了有效防控H7N9亚型禽流感疫情,研制能够预防高致病性H7N9亚型禽流感的疫苗非常必要。研究基于昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS),构建并拯救了一株表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白(HA)的重组杆状病毒rBac-GD15HA。间接免疫荧光试验及免疫印迹试验鉴定结果表明rBac-GD15HA的HA蛋白在Sf9细胞中成功表达;重组病毒细胞传代试验结果表明rBac-GD15HA在传代过程中能保持较高的病毒滴度,且遗传稳定;鸡的免疫试验结果显示,重组疫苗在一次免疫后即能诱导较高水平的针对H7N9 AIV的抗体应答,并能提供针对高致病性H7N9 AIV 100%的临床保护。因此,研究结果可作为H7N9亚型禽流感疫苗研发策略的参考,为其防控提供一种安全有效的方法,也为今后广谱流感疫苗的研发奠定一定的基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年18期）
罗文姬,李瑞珍,罗清平,余光银,魏蔚霞[8]（2019）在《全自动免疫组化法与手工免疫组化法检测卵巢癌ALK蛋白表达的对比分析》一文中研究指出目的探讨全自动免疫组化法与手工免疫组化法检测ALK(anaplastic lymphoma kinase,ALK)在卵巢癌中的表达,并对两者进行比较。方法选取53例卵巢癌组织的石蜡病理,应用抗体ALK(D5F3)全自动IHC法联合抗ALK(5A4)手工IHC法分别检测卵巢癌中ALK蛋白水平,并对两种方法进行比较。结果抗ALK(D5F3)检测发现ALK在卵巢癌组织中表达,阳性率9.43%(5/53),而抗ALK(5A4)组化法未检测出卵巢癌组织中有ALK蛋白表达。结论 ALK蛋白在卵巢癌中有表达,抗D5F3全自动IHC法优于抗5A4手工免疫组化法,抗D5F3联合全自动免疫组化法敏感度更高。(本文来源于《罕少疾病杂志》期刊2019年05期）
聂恺阳,吴云燕,易琳,吴祖雄,陈金顶[9]（2019）在《重组优势T、B细胞表位的猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及免疫原性研究》一文中研究指出为探究猪圆环病毒2型(PCV2)优势T、B细胞表位对Cap蛋白免疫原性的影响,本研究将前期研究筛选到的PCV2 Rep和Cap蛋白中的T、B细胞表位,分别构建pET-rB-Cap、pET-rT-Cap和pET-rT-B-Cap重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达后,采用SDS-PAGE和western blot检测3种重组蛋白:rB-Cap、rT-Cap和rT-B-Cap。结果显示,上述3种重组蛋白均高效表达且具有良好的反应原性。将70只4周龄～6周龄的BALB/c雌鼠随机分为7组,分别免疫不同的重组蛋白或者全病毒灭活疫苗,并对其产生的免疫原性进行检测。结果显示,各实验组小鼠的血清抗体水平均显着高于PBS组(p<0.01),其中rT-B-Cap组小鼠抗体水平显着高于PCV2全病毒灭活疫苗组和rCap组(p<0.01)。综上所述,PCV2 Cap蛋白同时串联T、B优势抗原表位时的免疫原性显着提高。本研究为PCV2多表位疫苗及基于Cap蛋白的亚单位疫苗的研究提供了新的途径。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2019年09期）
王红涛,肖智[10]（2019）在《轮状病毒VP7糖蛋白基因的克隆及在毕赤酵母菌中的表达及免疫原性的分析》一文中研究指出轮状病毒(Rotavirus,RV)是一种双链核糖核酸病毒,属于呼肠孤病毒科,流行病学调查显示,轮状病毒是秋冬季引起婴幼儿感染性腹泻的重要致病因子,全世界每年有大约一亿人感染该病毒。目前,研制安全有效的疫苗是控制轮状病毒感染的重要手段之一。本研究通过基因克隆和重组技术检测20份患儿的粪便标本,提取病毒RNA,再逆转录为cDNA,根据GenBank中发表的VP7全序列设计引物,应用RT-PCR技术,从分离的轮状病毒中扩增出来960bp特异性目的片段,并构建融合表达载体pPICZαA-VP7,转入GS115毕赤酵母中。经1%甲醇诱导,镍柱亲和层析蛋白纯化,获得浓度为0.65mg/mL单一目的蛋白,经SDS-PAGE和Western Blot分析VP7蛋白的表达。结果显示克隆的VP7基因与预计的糖蛋白基因大小一致,构建的重组表达载体在GS115毕赤酵母中表达出分子质量约34kD重组糖蛋白,说明成功克隆和表达了轮状病毒的糖蛋白基因。经小鼠免疫实验结果表明,VP7蛋白加强免疫2周后,肌注组(IM)和滴鼻组(IN)小鼠IgG抗体几何平均滴度分别达到492和676,滴鼻组SIgA平均几何滴度达到43.5,可产生高水平的IFN-γ,表明VP7蛋白免疫可以有效地诱导机体产生细胞免疫,具有进一步开发研究的价值。(本文来源于《病毒学报》期刊2019年05期）
免疫蛋白表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨单免疫球蛋白-白介素1受体蛋白(SIGIRR)在原发性EB病毒感染肝损伤患儿血清中的表达及临床意义。方法选取40例原发性EB病毒感染患儿(入院时EB-IgM和EB-DNA检测均阳性)为A组,门诊体检EB-IgG阳性(EB-VCA-IgG、EB-NA-IgG)而EB-IgM阴性的40例儿童为B组,门诊体检EB-IgG和EB-IgM均阴性的40例儿童为C组。检测并比较A组入院时及治疗1周后血清SIGIRR表达水平及AST、ALT水平,比较3组对象血清SIGIRR表达水平,同时分析A组入院时及治疗1周后血清SIGIRR表达水平与ALT水平的相关性。结果治疗1周后,原发性感染患儿血清SIGIRR表达水平明显升高,ALT水平明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);而AST水平变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。A组入院时血清SIGIRR表达水平与B、C组的差异有统计学意义(P<0.05),治疗1周后与B、C组的差异无统计学意义(P>0.05)。原发性感染患儿入院时血清ALT水平明显升高,与血清SIGIRR表达水平呈负相关(r=-0.806,P<0.05),治疗1周后两者未见相关性(r=0.106,P>0.05)。结论 EB病毒感染后患儿血清SIGIRR表达水平明显降低,与ALT水平相关,是肝损伤的保护因子。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫蛋白表达论文参考文献
[1].仝光杰,王文伟,蔡蓓蓓,王蓓,胡海涛.人乳头瘤病毒52型L1蛋白病毒样颗粒在毕赤酵母中的优化表达、纯化及其免疫原性[J].中国生物制品学杂志.2019
[2].胡玲珑,温正旺,俞佳珂,陈洁,石海矾.单免疫球蛋白-白介素1受体蛋白在原发性EB病毒感染肝损伤患儿血清中的表达及临床意义[J].浙江医学.2019
[3].明成玥,柯飞,张奇亚.蛙病毒同源蛋白RGV-27R和ADRV-85L的表达及其免疫原性分析[J].病毒学报.2019
[4].龚凤平,冯晓声,王伟,罗梦萍,马海彬.鸭坦布苏病毒全长E蛋白可溶性表达及免疫原性分析[J].动物医学进展.2019
[5].陈薪竹,柯法钧,王丹,洪艳平,王玉波.抗呋喃它酮代谢物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件优化及直接竞争酶联免疫分析方法的建立[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019
[6].高云山,刘丹丹,徐俊林,桑雨浓,梁夏夏.嗜水气单胞菌孔蛋白OmpF重组表达及其免疫原性分析[J].生物技术通报.2019
[7].孙一,李如梦,李军,马春喜,赵以恒.表达高致病性H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白的重组杆状病毒疫苗候选株的构建与免疫效果评估[J].中国家禽.2019
[8].罗文姬,李瑞珍,罗清平,余光银,魏蔚霞.全自动免疫组化法与手工免疫组化法检测卵巢癌ALK蛋白表达的对比分析[J].罕少疾病杂志.2019
[9].聂恺阳,吴云燕,易琳,吴祖雄,陈金顶.重组优势T、B细胞表位的猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及免疫原性研究[J].中国预防兽医学报.2019
[10].王红涛,肖智.轮状病毒VP7糖蛋白基因的克隆及在毕赤酵母菌中的表达及免疫原性的分析[J].病毒学报.2019
论文知识图
