抗精抗体论文_宋林超,臧运江,张世栋,黎晨曦,崔帅

导读:本文包含了抗精抗体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:抗体,精子,肽酶,活性,基因,免疫,免疫性。

抗精抗体论文文献综述

宋林超,臧运江,张世栋,黎晨曦,崔帅[1](2018)在《显微镜治疗亚临床型精索静脉曲张患者手术前后精液质量和抗精抗体对比研究》一文中研究指出目的观察显微镜治疗亚临床型精索静脉曲张患者手术前后精液质量及抗精子抗体的变化。方法选择在我院泌尿外科住院治疗的亚临床型精索静脉曲张患者50例,排除继发性精索静脉曲张,入院后均行显微镜下精索静脉高位结扎术,分别在术前和术后3个月进行精液质量、抗精子抗体阳性率检测。结果亚临床型精索静脉曲张患者行显微镜下精索静脉低位结扎术后3个月抗精子抗体阳性率较前明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论亚临床型精索静脉曲张患者早行显微镜下精索静脉结扎术可显着提高精液质量,降低As Ab阳性率。(本文来源于《潍坊医学院学报》期刊2018年04期)

郑佩婵[2](2010)在《人羧肽酶A1、抗精浆单链抗体/人羧肽酶A1融合蛋白的表达及活性测定》一文中研究指出前列腺癌是老年男性最常见恶性肿瘤之一。在美国,2009年新增192,280个前列腺癌患者,占男性新发肿瘤的四分之一。随着前列腺癌检出率的提高、人口老龄化及生活习惯的改变,我国前列腺癌发病率逐年增加,已成为中国男性最为常见的恶性肿瘤之一,其死亡率在男性癌症死亡率中仅次于膀胱癌和肾癌。中国民众和中国政府越来越关注前列腺癌的预防,早期发现,早期诊断以及早期治疗等研究。目前,前列腺癌的治疗主要包括手术治疗、内分泌治疗、放疗、化疗和生物疗法等。但所有这些治疗手段都存在其自身局限性。因此,寻找新的治疗前列腺癌的方法具有十分重要的意义。1987年提出的ADEPT是一种使化疗药物局限在肿瘤组织内活化的治疗方案,可以增强药物对肿瘤细胞的杀伤效率,降低对正常组织的毒性作用。达到该目标需具备叁个步骤:首先应用针对肿瘤抗原的特异性抗体作为载体,携带前体药物的专一性活化酶;第二步,血循环中的抗体-酶复合物(antibody-enzyme complex, AEC)需完全清除,只局限于肿瘤部位;第叁步,由静脉给药的未活化的前体药物可以区域特异性地在肿瘤组织内被抗体所携带的酶转化为活性细胞毒分子,发挥对肿瘤细胞的杀伤作用。本实验室应用CPA1针对前列腺癌的ADEPT疗法的研究已取得一定的研究进展。首次合成了前体药物氨甲喋呤-α-苯丙氨酸(MTX-α-Phe)和氨甲喋呤-α-精氨酸(MTX-α-Arg);体外细胞毒试验表明,MTX-α-Phe经CPA1水解转化为MTX,其细胞毒活性大于前体药物100倍以上。用抗人精浆蛋白单克隆抗体-CPA交联物(E4B7McAb-CPA)进行前列腺癌动物模型的体内试验,抑瘤率达87.6%,显示了良好的应用前景。本研究组已制备了CPA1全酶、活性中心等各肽段融合蛋白,研究中我们发现CPA1基因序列较长,与抗精浆蛋白单链抗体构建成融合基因后,由于分子量较大,表达效率低,较难得到具有活性且具备一定量的融合蛋白。而活性中心的分子量较小,约为25KD左右,但活性约为全酶的一半。通过生物信息学分析,发现活性中心N-端有一段β-片层结构,C-端有一段α-螺旋结构,遮蔽了活性中心的关键位点,使活性中心的底物结合位点无法完全暴露,推测这两个结构域可能会使活性中心的活性降低。为此,我们设计克隆了去除活性中心N-端65bp和C-端67bp碱基的活性短片段基因。首先进行活性中心、活性短片段的体外原核表达,经诱导表达分别得到了分子量约25KD和20KD的目的蛋白,进一步用Western blot证实了目的蛋白的成功表达;应用Hippuryl-L-Phenylalanine法、MTT法和细胞凋亡实验进行酶活性的检测,研究结果发现hCPA1活性短片段具有与活性中心相当的活性,但并未如预期的有所增强。推测原因,可能是包涵体变性复性过程所致。为此我们更换表达载体,应用真核表达载体,转染PC-3细胞,表达目的蛋白;RT-PCR、细胞免疫荧光法检测目的蛋白的表达;最后分别用MTT法和细胞凋亡测定表达产物水解酶活性。对表达产物的水解活性测定显示:活性短片段和活性中心均具有部分水解活性,且活性短片段的活性要稍高于活性中心;但与scFv连接后在一定程度上影响其水解活性。我们推测,在实验过程中我们是应用overlap-PCR将scFv的VL直接与酶进行连接,两者可能在一定程度上相互影响自身的结构折迭,而影响了酶的活性。此推测有待于进一步验证。目前,尚不清楚具有一定酶活性的hCPA1活性短片段是否会由于渗透性的增强而大量活化前体药物MTX-α-Phe,从而具有较全长hCPA1更好的对实体瘤的杀伤效率。该hCPA1活性短片段的获得,为抗人精浆蛋白单链抗体/hCPAl融合蛋白系统的进一步优化和用于前列腺癌的治疗奠定基础。(本文来源于《第四军医大学》期刊2010-04-01)

翁华,金之瑾,顾志芬,陈健[3](2009)在《免疫斑点法检测抗精抗体的建立及其与ELISA法比较》一文中研究指出目的建立检测抗精抗体的免疫斑点法,并与ELISA法进行比较。方法收集20份正常精液,混合,洗涤,混悬于0.5%NP-40 Tris-HCl缓冲液中,制备精子膜抗原,辣根过氧化物酶标记SPA,制备HRP-SPA,建立免疫斑点法检测抗精抗体,并对两种方法检测结果进行比较。结果免疫斑点法检测正常生育组30对夫妇共60例,其中阳性者1例为男性,阳性率为3.3%;检测不孕夫妇116对,共232例,阳性患者51例,阳性率为22.0%,其中男方占23例,阳性率为19.8%,女方占28例,阳性率为24.1%;检测习惯性流产夫妇53对,共106例,阳性患者16例,阳性率为15.1%,其中男方占2例,阳性率为3.8%,女方占14例,阳性率为26.4%。两种方法检测结果一致或差异不显着。结论免疫斑点法是一种比较稳定和敏感的方法,重复性、特异性好,结果易于判断,可应用于临床检验。(本文来源于《中国优生与遗传杂志》期刊2009年09期)

陈日益[4](2003)在《抗精抗体——免疫性不孕的罪魁祸首》一文中研究指出李山与张妮青梅竹马,一起读完小学、中学和大学,又双双被分配在同一城市工作,被人们称为是“天生的一对”。在新婚宴会上,亲朋好友举杯祝福:今年喝你们的结婚喜酒,明年再喝你们的贵子喜酒。然而,一眨眼叁年过去了,小俩口生活恩爱美满,但美中不足的,张妮至今未孕。这可急坏了想早抱孙子的公婆。俩老人四处为儿媳妇(本文来源于《健康生活》期刊2003年11期)

王旻晨,邵君飞,蔡杰,邢卫星[5](2002)在《不育男子血清中抗精抗体与抗精浆抗体的相关性研究》一文中研究指出目的研究不育男子血清中抗精抗体与抗精浆抗体的相关性。方法以ELISA间接法检测50例不育男子血清抗精抗体和抗精浆抗体。结果不育男子血清中抗精抗体和抗精浆抗体阳性率分别为36%、38%,两者均为阳性为16例,均为阴性为29例;抗精抗体阳性、抗精浆抗体阴性为2例;抗精抗体阴性、抗精浆抗体阳性为3例。结论两者阳性检出率间无显着性差异(P>0.05),但有相关关系(P<0.01,相关系数γ=0.79)。(本文来源于《中国航天医药杂志》期刊2002年02期)

董轲[6](2001)在《人羧肽酶A突变基因的构建、表达及突变羧肽酶A/抗精浆蛋白抗体融合基因的构建》一文中研究指出高选择性肿瘤化疗是目前研究的重要课题之一,大多化疗药物缺乏对肿瘤组织的高选择性,往往在对肿瘤组织发挥作用的同时也对身体正常组织产生毒副作用。为了解决这些问题,人们希望通过单克隆抗体直接将毒性药物特异地带到肿瘤组织部位,单克隆抗体与毒性药物连接成“抗体-药物”偶联物,单克隆抗体特异地与肿瘤组织内的抗原结合,从而将药物带到肿瘤组织部位,发挥杀死肿瘤细胞的作用。但经过实践发现,“抗体-毒性药物”偶联物并不能 第③零医夭管砸士管硅伦支非常有效地到达肿瘤部位发挥作用,这是因为:门)一定量的抗体所携带的药物数量毕竟有限,(2)每一种肿瘤组织中含有的抗原数量多少不一,有些肿瘤组织中所含有的能与抗体有效结合的抗原数量非常有限,(3)抗体与毒性药物形成大的“抗体-药物”交联物,难以有效地达到实质性肿瘤部位,(4)“抗体-药物”交联物分于较大,易引起免疫反应,影响其在病人中的应用。 1987年,Bngshawenl提出“抗体导向酶哺药疗法\AD EPT)引起了人们的广泛关注,其设想利用抗体作为载体来携带前体药物的专一性活化酶,可以选择性地结合于肿瘤部位。此前体药物能在人体内稳定存在,并且对身体正常组织没有或仅仅有非常低的毒性作用,但可以区域特异性地在肿瘤组织内被抗体所携带的酶转化为活性细胞毒分于,发挥对肿瘤细胞的杀伤作用。这种设想利用少量的酶即可催化前药生成大量有肿瘤细胞毒性的药物,而且前药的分于量较小,比较容易达到实质性肿瘤部位,克服T“抗体。药物”大分于难以达到肿瘤组织的问题,只需要少量的抗体-酶交联物就可以在肿瘤部位催化大量的前药变为有毒性作用的活性药物。 Huennekens等*l将抗人肺癌单克隆抗体 McAb KSI/4与竣肽 4 第@军医丈学碾士管硅萌支酶A(CPA)交联,制备成KS l/4(PA交联物,并且将甲氨酸吟的a氨基酸进行修饰以获得ADEPT前药,其中前药甲氨碟吟A-丙氨酸(MTX*《lan劝e)可以被CPA酶解成为有细胞毒活性的药物甲氨骤吟(MTX)。体外肺癌细胞毒性试验发现,前药IC50为二.2X 10‘moVL,力入交联物 48h后,IC扣为 6.3 X 10‘moUL,降低 了约 35倍。本实验室郝晓柯等f3I合成了两种前药甲氨瞟吟川-肽衍生物:甲氨碟吟J-苯丙氨酸和甲氨碟吟川。精氨酸(MTX* he,MTX a-吨),并进行了体外细胞毒试验。结果发现,前药对任何细胞均无毒性,但经梭肽酶A水解后,MTX-aPhe转化为活性的MTX,其细胞毒活性大于iJ药约 1000 {f。用抗人精浆蛋白单克隆抗体/骏肽酶A交联物(E4B7.ra--Ab。CPA)进行前列腺癌动物模型的体内试验,抑癌率也在85%以上。 酶是ADEPT治疗方案中的一个重要组成部分,其可以分为两大类:l)非人源化酶,这是目前ADEPT研究中大多应用的酶。特异性虽好,但兔疫原性相对较强,易引起免疫反应,免疫抑制剂的应用在一定程度上可以延缓患者免疫反应的发生,但兔疫抑制剂只是在动物模型中获得了较理想的实验结果,也仅仅在ADEPT方 5 第@零医大管涤士学伯论支 案中能应用两到叁个循环;2)人源性酶(内源性酶),虽免疫原性 较低,不易引起兔疫反应,但特异性较差。因在身体的正常组织中 也存在相同的酶,可以在非肿瘤组织催化前药转变为有毒性的药 物,引起全身毒副反应,因而也迟迟不能应用于临床l‘-八 本实验通过计算机模拟人梭肽酶 AhCPA)的结构,设计突 变位点,并应用PCR重迭延伸法对其进行定点突变。引物A、B为 竣肽酶A基因两端引物,完全与竣肽酶A基因两端互补,在两边分 别设计了不同的酶切位点,5’端为限制性内切酶EcoR J,3’端为 Saflo 引物C、D为突变引物,其包含了突变位点,将11 26位的核 昔酸G突变为A,GCC为hCPA376位氨基酸密码子,编码丙氨酸, ACC为突变后的376位的密码子,编码苏氨酸。 我们首先以A,D引物PCR出大约 1126hP的产物,应用琼脂 糖凝胶电泳鉴定,纯化,回收;以B,C引物PCR出大约125hp的 产物,鉴定,纯化,回收,再应用这两个产物做重迭延伸,得到了 大约1250hP的产物,符合我们的要求,应用DNA测序仪进行测序, 结果在1126位的核昔酸由G变为A,其余序列未变。 此酶突变体可以将MTX-a-环丁基苯丙氨酸水解为有毒性的 6 第一零医丈营@寸营懂范支甲氨碟吟,而内源性的浚肽酶不能将此底物催化,这样就可能避兔了应用内源性酶特异性差,可能在肿瘤组织以外的正常组织中活化前药分于,产生毒副作用的缺点,另一方面因为此突变酶和内源性酶有较大的同源性,故免疫原性较低,不会引起全身的免疫反应,或仅仅引起较低的免疫反应,使ADEPT方案可以(本文来源于《第四军医大学》期刊2001-05-01)

龙敏[7](1999)在《体外受精前抗精抗体试验的价值》一文中研究指出作者对1992~1997年间无怀孕史、精液分析显示凝集或性交试验提示有抗精抗体的251对夫妇,在接受体外受精(IVF)前进行抗精抗体试验研究。 在IVF周期前采集精液标本,将精子液(本文来源于《国外医学(计划生育分册)》期刊1999年03期)

苏兆娟,乔玉环,杨秋霞[8](1998)在《女性不孕症患者血清衣原体抗体及抗精抗体测定》一文中研究指出沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,CT)是当今世界流行最为广泛的性传播病原体之一。目前,关于衣原体的微生物学、分子生物学以及临床等方面的研究,几乎毫无争议地肯定了它对生殖、妊娠及新生儿的危害。但是,CT感染与不孕不育确切的致病机理...(本文来源于《河南医药信息》期刊1998年12期)

崔永根,任淑子,花玉波[9](1998)在《抗精浆免疫抑制物等抗生育抗体与不孕不育关系》一文中研究指出用间接酶联免疫吸附测定法检测20对生育夫妇和28对不孕不育夫妇血清和精浆中抗精子抗体、抗精浆免疫抑制物抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体,结果不孕不育男性血清和精浆中抗精子抗体阳性率(分别为28%和35%)与生育组间有非常显着性差异,抗精浆免疫抑制物抗体阳性率(分别为21%和25%)与生育组间有显着性差异.不孕不育女性血清中抗精子抗体阳性率(为21%)与生育组间无显着性差异,抗精浆免疫抑制物抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体阳性率(分别为25%,25%,21%)与生育组间具有显着性差异.不孕和流产夫妇血清、精浆中含有1种以上抗体阳性率为78%,提示血清和精浆中抗生育抗体的产生与不孕不育有密切关系(本文来源于《延边大学医学学报》期刊1998年02期)

朱庆文[10](1997)在《Mar法检测抗精抗体与经典试验方法的比较》一文中研究指出本文采用混合抗球蛋白试验法(Mar)检测不育夫妇的抗精抗体,52例不育夫妇的检测结果如下:男方精子表面抗体阳性:3.8%(2/52),男女双方血清阳性率:14.42%,同时采用经典方法(SIT、TSAT、GAT)作对比,其百分率均低于Mar法。(本文来源于《中国优生与遗传杂志》期刊1997年04期)

抗精抗体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

前列腺癌是老年男性最常见恶性肿瘤之一。在美国,2009年新增192,280个前列腺癌患者,占男性新发肿瘤的四分之一。随着前列腺癌检出率的提高、人口老龄化及生活习惯的改变,我国前列腺癌发病率逐年增加,已成为中国男性最为常见的恶性肿瘤之一,其死亡率在男性癌症死亡率中仅次于膀胱癌和肾癌。中国民众和中国政府越来越关注前列腺癌的预防,早期发现,早期诊断以及早期治疗等研究。目前,前列腺癌的治疗主要包括手术治疗、内分泌治疗、放疗、化疗和生物疗法等。但所有这些治疗手段都存在其自身局限性。因此,寻找新的治疗前列腺癌的方法具有十分重要的意义。1987年提出的ADEPT是一种使化疗药物局限在肿瘤组织内活化的治疗方案,可以增强药物对肿瘤细胞的杀伤效率,降低对正常组织的毒性作用。达到该目标需具备叁个步骤:首先应用针对肿瘤抗原的特异性抗体作为载体,携带前体药物的专一性活化酶;第二步,血循环中的抗体-酶复合物(antibody-enzyme complex, AEC)需完全清除,只局限于肿瘤部位;第叁步,由静脉给药的未活化的前体药物可以区域特异性地在肿瘤组织内被抗体所携带的酶转化为活性细胞毒分子,发挥对肿瘤细胞的杀伤作用。本实验室应用CPA1针对前列腺癌的ADEPT疗法的研究已取得一定的研究进展。首次合成了前体药物氨甲喋呤-α-苯丙氨酸(MTX-α-Phe)和氨甲喋呤-α-精氨酸(MTX-α-Arg);体外细胞毒试验表明,MTX-α-Phe经CPA1水解转化为MTX,其细胞毒活性大于前体药物100倍以上。用抗人精浆蛋白单克隆抗体-CPA交联物(E4B7McAb-CPA)进行前列腺癌动物模型的体内试验,抑瘤率达87.6%,显示了良好的应用前景。本研究组已制备了CPA1全酶、活性中心等各肽段融合蛋白,研究中我们发现CPA1基因序列较长,与抗精浆蛋白单链抗体构建成融合基因后,由于分子量较大,表达效率低,较难得到具有活性且具备一定量的融合蛋白。而活性中心的分子量较小,约为25KD左右,但活性约为全酶的一半。通过生物信息学分析,发现活性中心N-端有一段β-片层结构,C-端有一段α-螺旋结构,遮蔽了活性中心的关键位点,使活性中心的底物结合位点无法完全暴露,推测这两个结构域可能会使活性中心的活性降低。为此,我们设计克隆了去除活性中心N-端65bp和C-端67bp碱基的活性短片段基因。首先进行活性中心、活性短片段的体外原核表达,经诱导表达分别得到了分子量约25KD和20KD的目的蛋白,进一步用Western blot证实了目的蛋白的成功表达;应用Hippuryl-L-Phenylalanine法、MTT法和细胞凋亡实验进行酶活性的检测,研究结果发现hCPA1活性短片段具有与活性中心相当的活性,但并未如预期的有所增强。推测原因,可能是包涵体变性复性过程所致。为此我们更换表达载体,应用真核表达载体,转染PC-3细胞,表达目的蛋白;RT-PCR、细胞免疫荧光法检测目的蛋白的表达;最后分别用MTT法和细胞凋亡测定表达产物水解酶活性。对表达产物的水解活性测定显示:活性短片段和活性中心均具有部分水解活性,且活性短片段的活性要稍高于活性中心;但与scFv连接后在一定程度上影响其水解活性。我们推测,在实验过程中我们是应用overlap-PCR将scFv的VL直接与酶进行连接,两者可能在一定程度上相互影响自身的结构折迭,而影响了酶的活性。此推测有待于进一步验证。目前,尚不清楚具有一定酶活性的hCPA1活性短片段是否会由于渗透性的增强而大量活化前体药物MTX-α-Phe,从而具有较全长hCPA1更好的对实体瘤的杀伤效率。该hCPA1活性短片段的获得,为抗人精浆蛋白单链抗体/hCPAl融合蛋白系统的进一步优化和用于前列腺癌的治疗奠定基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗精抗体论文参考文献

[1].宋林超,臧运江,张世栋,黎晨曦,崔帅.显微镜治疗亚临床型精索静脉曲张患者手术前后精液质量和抗精抗体对比研究[J].潍坊医学院学报.2018

[2].郑佩婵.人羧肽酶A1、抗精浆单链抗体/人羧肽酶A1融合蛋白的表达及活性测定[D].第四军医大学.2010

[3].翁华,金之瑾,顾志芬,陈健.免疫斑点法检测抗精抗体的建立及其与ELISA法比较[J].中国优生与遗传杂志.2009

[4].陈日益.抗精抗体——免疫性不孕的罪魁祸首[J].健康生活.2003

[5].王旻晨,邵君飞,蔡杰,邢卫星.不育男子血清中抗精抗体与抗精浆抗体的相关性研究[J].中国航天医药杂志.2002

[6].董轲.人羧肽酶A突变基因的构建、表达及突变羧肽酶A/抗精浆蛋白抗体融合基因的构建[D].第四军医大学.2001

[7].龙敏.体外受精前抗精抗体试验的价值[J].国外医学(计划生育分册).1999

[8].苏兆娟,乔玉环,杨秋霞.女性不孕症患者血清衣原体抗体及抗精抗体测定[J].河南医药信息.1998

[9].崔永根,任淑子,花玉波.抗精浆免疫抑制物等抗生育抗体与不孕不育关系[J].延边大学医学学报.1998

[10].朱庆文.Mar法检测抗精抗体与经典试验方法的比较[J].中国优生与遗传杂志.1997

论文知识图

稀释抗IAsys系统分析GST一V一S...一4人大隐静脉内皮细胞生长曲线蛋白在精子上的免疫定位在精子的基部...各组入驻高原前后精浆生化指标的比较以组辜丸组织HE染色结果(xZOO)各级生精细胞Cenexin基因表达的半分析

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

抗精抗体论文_宋林超,臧运江,张世栋,黎晨曦,崔帅
下载Doc文档

猜你喜欢