导读:本文包含了下丘脑神经元培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:神经元,下丘脑,乙基,细胞,二甲酸,星形,胶质。
下丘脑神经元培养论文文献综述
梁慧慧,赵宗胜,杨恒,翟曼君,梁艳萍[1]（2018）在《绵羊下丘脑神经元细胞培养与鉴定》一文中研究指出通过改良神经元细胞体外培养体系,建立一种高效、可行的绵羊下丘脑神经元体外培养方法,为研究绵羊神经内分泌调节体系及季节性发情机理奠定基础。通过Ⅳ型胶原酶将90 d左右的胎羊下丘脑组织消化成单细胞悬液,接种到预先用多聚赖氨酸包被的培养皿中,2 d后更换为无血清培养基进行培养,并采用两种方法对神经元细胞进行鉴定。结果显示:培养2 d的下丘脑神经细胞,胞体较小且单个独立分布。培养4~6 d神经元的突起明显增多增长,神经元胞体变大。培养8 d的神经元细胞更加成熟,突起联系更加紧密,形成密集的神经细胞网络。培养12 d后,下丘脑神经元细胞活性减弱,部分细胞开始凋亡。通过RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞能够表达神经元特异基因Noggin、TUBA4A,经免疫荧光鉴定下丘脑神经元细胞纯度为95.6%。这些结果表明,通过此细胞培养方法能够获得纯度较高的绵羊下丘脑神经元细胞,为进一步研究绵羊神经内分泌调节体系及季节性发情机理提供目标细胞。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2018年08期）
道龙,高娜,孙增荣[2]（2017）在《邻苯二甲酸单乙基己基酯对原代培养新生雌性大鼠下丘脑神经元生殖神经内分泌相关基因表达影响》一文中研究指出目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(mono-2-ethylhexyl phthalate,MEHP)对新生雌性大鼠下丘脑生殖神经内分泌功能的影响。方法对出生24h内的新生雌性SD大鼠下丘脑神经元进行原代培养,分别暴露于含终浓度为0(对照)、10~(-15)、10~(-12)、10~(-9)、10~(-6)mol/L MEHP的培养基染毒24h。采用qRT-PCR法检测Gn RH、Gn RHr、Kiss1及Kiss1r基因的表达水平。结果与对照组相比,各浓度MEHP暴露组原代培养新生雌性大鼠下丘脑神经元Kiss1基因的表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05);而Gn RH、Gn RHr和Kiss1r基因的表达水平均无明显改变。结论 MEHP有可能通过下调新生雌性大鼠下丘脑神经元Kiss1基因表达水平来干扰生殖神经的内分泌调控功能。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2017年01期）
黄玉敬,高娜,孙增荣[3]（2015）在《邻苯二甲酸-单-乙基己基酯对原代培养新生大鼠下丘脑神经元活性的影响及其氧化损伤作用》一文中研究指出目的探讨邻苯二甲酸-单-乙基己基酯[mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]对原代培养新生大鼠下丘脑神经元活性的影响及其氧化损伤作用。方法选取24 h内新生清洁级SD大鼠,取下丘脑神经元进行原代培养,分别加入含终浓度0(溶剂对照)、10~(-12)、10~(-9)、10~(-6)、10~(-3)、1.0 mmol/L MEHP的培养液暴露24 h。采用MTT法测定下丘脑神经元的活性,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)的活力和丙二醛(MDA)的含量。结果与溶剂对照组比较,仅1.0 mmol/L MEHP暴露组新生大鼠下丘脑神经元的存活率较低,差异有统计学意义(P<0.05);且随着MEHP暴露剂量的升高,新生大鼠下丘脑神经元的存活率呈下降趋势。与溶剂对照组比较,仅1.0 mmol/L MEHP暴露组新生大鼠下丘脑神经元上清液中的MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);而各MEHP暴露组新生大鼠下丘脑神经元上清液中的SOD活力均无明显改变。结论MEHP可抑制原代培养新生大鼠下丘脑神经元活性,并具有氧化损伤作用,提示其可能是MEHP神经毒性机制之一。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2015年12期）
燕美玲[4]（2014）在《MEHP对原代培养新生大鼠下丘脑神经元的毒性作用》一文中研究指出目的下丘脑是人体内的神经-内分泌高级调节中枢,在其发育的的关键时期,对内、外源性激素作用非常敏感。邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)是邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)的活性代谢产物,具有抗雄激素作用和拟雌激素作用,对下丘脑神经元的发育有可能产生干扰作用,但是相关研究少见报道。本研究通过体外试验探讨MEHP对新生大鼠的下丘脑神经元发育的干扰作用及其剂量反应关系模型;并通过MEHP对下丘脑神经元凋亡的影响,以及MEHP对雌激素/雄激素介导的神经元生长发育的影响,初步探讨其作用的途径及机制。方法(1)新生大鼠下丘脑神经元原代培养方法及神经元鉴定:在原代培养的下丘脑神经元中,采用改良的机械吹打法制单细胞悬液,培养液选用添加10%去类固醇血清的DMEM培养液,培养24h后将培养液更换为97%Neurobasal+2%B27+1%Glutamine培养液,以抑制胶质细胞的过度增殖。采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色法鉴定下丘脑神经元;采用H-E染色、Nissl染色法染色以观察下丘脑神经元的形态学特点。(2)不同浓度MEHP(10-15mol/L-10-3mol/L)处理培养7d的下丘脑神经元,作用24h、48h分别MTT法测定吸光度值并且计算细胞活力以及抑制率,建立MEHP对神经元生长抑制作用的剂量-反应关系模型;测量不同浓度MEHP对下丘脑神经元神经突长度、胞体面积以及突起个数的影响,观察其对神经元发育的影响。(3)不同浓度MEHP处理神经元,Hoechst 33258免疫细胞染色法分析神经元凋亡情况并计算凋亡率;不同浓度E2/T处理神经元,MTT法测定吸光度值并且计算细胞活力,确定适宜的E2/T浓度用于后续试验;不同浓度MEHP与雌二醇(E2,10-7mol/L)或睾酮(T,10-7mol/L)联合处理培养的下丘脑神经元,测量不同浓度MEHP与E2或T联合处理组对下丘脑神经元神经突长度、胞体面积以及突起个数的影响,观察其对神经元发育的影响,并且,用Hoechst 33258免疫细胞染色法分析不同浓度MEHP与E2或T联合处理组对神经元凋亡情况的影响并计算凋亡率。结果(1)本研究原代培养的下丘脑神经元纯度可达到95%以上,并且神经元生长发育良好。(2)下丘脑神经元在不同浓度MEHP中处理24h后,10-15mol/L、10-13mol/L、10-11mol/L、10-9mol/L、10-7mol/L、10-5mol/L、10-3mol/L 折光性变差,胞体变小,神经突变短神经元突触之间的连接断裂。10-15mol/L、10-3mol/LMEHP组抑制率分别为30.1%和33.6%,均对神经元的生长具有明显的抑制作用,而10-9mol/LMEHP组抑制率为1.6%,对神经元的生长的抑制作用不明显,MEHP不同处理组对下丘脑神经元的抑制作用呈U型剂量-反应关系曲线。(3)MEHP处理过的细胞,染色质皱缩,呈现不规则形状,有凋亡小体出现。MEHP处理组与对照组比较凋亡率增加,且差异均具有统计学意义(P<0.05),10-3mol/L MEHP组凋亡率最高,为83.98%。(4)不同浓度E2/T处理组对神经元均具有促进生长作用,经过比较,本研究选取10-7mol/LE2/T作为后续试验的终浓度。(5)不同浓度MEHP与E2/T(10-7mol/L)联合处理培养的下丘脑神经元,对下丘脑神经元神经突的长度以及胞体面积均有不同程度的减少。与E2/T组比较发现,MEHP拮抗E2/T介导的下丘脑神经元的增殖作用。(6)10-7mol/L、10-5mol/L、10-3mol/LMEHP+E2/T(10-7mol/L)处理组凋亡率分别为 27.97%、42.8%、68.66%,与对照组比较,差别均具有统计学意义(P<0.05)。MEHP拮抗E2/T介导的下丘脑神经元的抗凋亡作用。结论本研究结果表明,MEHP可抑制下丘脑神经元的增殖,MEHP对下丘脑神经元的影响存在非单调性的剂量-反应关系。MEHP对下丘脑神经元具有直接致凋亡作用,MEHP拮抗性激素E2/T介导的下丘脑神经元的增殖作用及抗凋亡作用,但是其作用机制还有待进一步研究。(本文来源于《天津医科大学》期刊2014-05-01）
王旭辉,张岫竹,王伍超,刘大维,代维[5]（2009）在《大鼠下丘脑神经元培养的新方法》一文中研究指出目的通过对大鼠下丘脑神经元培养方法的改进研究,寻找更佳的下丘脑神经元培养方法。方法基于目前常用的Neurobasal+B27+GlumaxⅠ的神经元培养体系,采用多重过滤替代原来的取上清过滤的方法处理神经元,并对换液方式作出相应调整。以NF-200对细胞进行免疫组织化学染色鉴定。通过观察比较培养下丘脑神经元的细胞密度、神经元轴突长度和胞体面积等指标,对培养方法作出评价。结果2种培养方法均获得良好的培养效果,改进的方法在细胞密度,3、7、10、12 d 4个时间点均优于原培养方法;神经元轴突长度和胞体面积方面,新方法只在3 d时优于原方法,至7 d时二者差异已不明显。结论新方法具有稳定的可重复性,可应用于神经元的培养实验。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2009年17期）
王江华[6]（2008）在《瘦素对长时间培养的下丘脑神经元细胞内钙信号的调节及机制研究》一文中研究指出第一部分培养时间对下丘脑神经元细胞内钙信号的影响目的:衰老会引起细胞内静息钙离子浓度的升高,更能够引起细胞对各种损伤因素所导致的钙超载的处理能力下降。而在衰老的神经-内分泌学说中,认为下丘脑是衰老的起步点。长时间培养的细胞在一定程度上能够反映在体细胞的衰老、退化过程。因此,本实验选用原代培养不同时间的下丘脑神经元作为研究对象,采用高浓度的KCl处理神经元造成细胞内钙超载,观察培养时间对下丘脑神经元细胞内钙信号的影响。方法:采用荧光钙离子成像和膜片钳技术,对四个培养时间段的下丘脑神经元分别进行以下研究:(1)细胞内钙离子水平记录,采用25 mM KCl处理下丘脑神经元,探讨培养时间对细胞处理钙超载能力的影响,观察钙离子浓度升高的幅度与恢复到基础水平的过程。(2)采用全细胞膜片钳记录,观察培养时间对电压依赖性钙通道功能的影响。结果:(1)对于不同培养时间的下丘脑神经元,分别给予25 mM KCl所引起的细胞内静息钙离子浓度升高的幅度相似,但随后的恢复过程存在很大差异。随培养时间的延长,钙离子恢复的速度和幅度均明显降低。(2)膜片钳实验中,随着培养时间的延长,电压依赖性钙通道所介导的电流的幅值,膜电容的大小均升高,给予nifedipine后发现,其中L-型钙通道所占的比率随着培养时间的延长明显增加。结论:下丘脑神经元内,钙稳态调节机制的损害与培养时间存在相关性,与培养早期的神经元相比,培养中晚期的神经元排出细胞内过多的钙离子所需的时间更长。而胞膜L-型钙通道电流的增加参与了钙稳态调节机制的异常。第二部分瘦素对不同培养时间的下丘脑神经元细胞内钙信号的调节目的:瘦素是肥胖基因编码,脂肪细胞分泌的蛋白质,主要作用于下丘脑调节摄食和能量代谢。钙离子是细胞内常见的第二信使,是参与下丘脑神经内分泌调节的主要离子。本实验中,我们主要研究瘦素对下丘脑神经元细胞内钙信号的调节作用及该调节作用与培养时间的关系,以观察瘦素在“能量代谢异常-神经内分泌紊乱”联动机制中的作用及其与衰老的关系。方法:对四个培养时间段的下丘脑神经元分别进行以下实验:(1)采用荧光钙离子成像技术,研究瘦素对细胞内静息钙离子浓度的影响,及其对25 mM KCl引起的细胞内钙升高的调节作用。(2)采用全细胞膜片钳技术,研究瘦素对不同培养时间的下丘脑神经元电压依赖性钙通道的作用。(3)采用免疫荧光和Western Blot技术,检测各个培养时间段下丘脑神经元上瘦素受体的表达情况。结果:(1)瘦素对四个培养时间段的下丘脑神经元细胞内静息钙离子浓度没有影响,但能够抑制KCl所引起的钙离子浓度升高的幅度,抑制作用在体外培养的16天达到峰值,到培养晚期,抑制作用减弱。(2)瘦素对电压依赖性钙通道的作用,出现电流增加和减少两种反应,统计每一培养时间段的两种反应的比例后发现,调节作用在培养的中期最强,培养晚期减弱。(3)在体外培养的第3天,9天,16天,随培养时间延长,瘦素受体的表达增强,到培养的第23天,瘦素受体的表达显着降低。结论:瘦素能够抑制KCl所诱发的下丘脑神经元细胞内钙离子的升高,电压依赖性钙通道在其中起了重要作用,抑制作用与培养时间相关,而瘦素受体的表达变化可能在这种相关性中扮演了重要角色。第叁部分瘦素通过不同的信号通路介导对NPY和POMC神经元电压依赖性钙电流的作用目的:NPY和POMC神经元是下丘脑内调节摄食和能量代谢的主要效应细胞,大量研究已证实,瘦素能够抑制NPY神经元的活性而增加POMC神经元的活性。电压依赖性钙通道在调节神经细胞兴奋性上发挥了重要作用。在本实验中,我们分别研究瘦素对于NPY和POMC神经元电压依赖性钙通道的作用,探讨瘦素调控这两类神经元兴奋性的电生理机制。方法:(1)采用免疫组化方法鉴定与摄食相关的NPY和POMC神经元;(2)结合形态学特征,采用全细胞膜片钳技术及及记录后的再次鉴定比对,研究瘦素对这两类神经元电压依赖性钙通道的调节作用及其信号通路。结果:(1)NPY和POMC神经元在形态上存在明显差异,典型的NPY神经元细胞体较小,成叁角形或纺锤形,大部分具有1-3个细小的,不分枝的一级树突。POMC神经元细胞体较大,成四边形或多极核周体,一级树突数量不定,且分支较多。(2)瘦素通过LEPR-JAK2-MAPK信号通路抑制NPY神经元的钙电流,通过LEPR-JAK2-PI3-k信号通路增强POMC神经元的钙电流,其中主要是L-型钙通道介导了瘦素的调节作用。结论:瘦素通过不同的信号通路调节NPY和POMC神经元电压依赖性钙通道,对神经元活性产生不同的影响。(本文来源于《华中科技大学》期刊2008-05-01）
曹荣,兰莉,段丽,张萍,熊鹰飞[7]（2006）在《渗透压变化对缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元表达的影响》一文中研究指出目的观察渗透压改变对培养的下丘脑星形胶质细胞的缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)和神经元的缝隙连接蛋白Cx32表达的影响。方法体外培养孕14 d或新生1d SD大鼠下丘脑的神经元和星形胶质细胞并进行纯化和鉴定。实验各分两组,第1组:细胞由等渗培养液移至高渗培养液(含9%NaCl)分别放置1min、3min、5min、10min和15min后将液体吸出常规固定;第2组:细胞先置于高渗培养液中15min后换成等渗培养液,分别在1min、3min、5min和10min后将等渗培养液吸出常规固定。两者均进行抗Cx43或抗Cx32的免疫荧光染色,Confocal显微镜观察。结果第1组,Cx43在刺激1min后在星形胶质细胞表达比对照组有所增加,3 min达到高峰,以后逐渐降低,15 min恢复正常;而Cx32在刺激后1min的神经元中表达比对照组增加,5 min达到高峰,以后降低,15min恢复正常。第2组同样为Cx43在星形胶质细胞刺激1min后表达增加,3 min达到高峰,以后降低,10 min恢复正常;神经元的Cx32表达在刺激后5 min达到高峰,以后降低,10 min恢复正常。两组Cx43表达的高峰期均早于Cx32。结论Cx43和Cx32可能参与星形胶质细胞与神经元渗透压的调节。(本文来源于《解剖学报》期刊2006年04期）
曹荣,饶志仁[8]（2005）在《低渗刺激后缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元的表达变化》一文中研究指出目的:本文应用细胞培养和免疫组织化学方法,通过观察低渗刺激后,培养的下丘脑星形胶质细胞的缝隙连接蛋白Connexin43(CX43)和神经元的缝隙连接蛋白Connexin32(CX32)表达变化的时程关系,探讨下丘脑星形胶质细胞在低渗刺激调节过程中的作用。方法:使用SD新生鼠和孕鼠分别培养星形胶质细胞和神经元,并进行纯化鉴定,纯度达到99%以上。随后进行低渗刺激实验。等渗液选用正常细胞培养液,低渗液则选用0.3%氯化钠和0.83%葡萄糖混合溶液。实验分为两个步骤:(1)低渗刺激期:吸出培养血中的等渗培养液,加入低渗刺激液,分别在1、3、5、10、15、25min时,将培养液吸出,换成0.01mol/L PBS洗1次,用4%多聚甲醛固定1h。(2)低渗恢复期:(本文来源于《中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编》期刊2005-10-01）
杨春,崔慧先,樊平,吴文娟,李媛[9]（2005）在《观察大鼠下丘脑NPY神经元的培养及瘦素对其mRNA表达的影响》一文中研究指出目的观察大鼠下丘脑NPY神经元的培养及瘦素对其mRNA表达的影响。方法用无血清限定性培养基体外培养新生大鼠的下丘脑神经元,观察其生长状况;用NSE、NF、NPY抗血清检测神经元的鉴定和表达,并对叁者阳性细胞的胞体和突起做统计学分析。给予Leptin10-10mol/L、10-8mol/L、10-6mol/L3个浓度,观察leptin对NPYm RNA表达的影响。结果培养的NSE和NF阳性细胞生长至第7天时均达高峰;NPY阳性神经元在培养7～10d时,亦处于一稳定时期。NPYmRNA的表达在给予Leptin10-10mol/L时,与对照组相比无显着性差异;10-8mol/L、10-6mol/L浓度时,表达增强,与对照组相比有显着性差异(P<0.05)。结论取材于新生大鼠的下丘脑亦可进行体外培养;培养一周时是研究单因素影响神经元的最佳实验时间;在离体环境下,高浓度的leptin(10-8mol/L、10-6mol/L)能促进NPYmRNA的表达,NPY可能表现为抑制GnRH分泌的作用。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2005年03期）
张云东,朱佩芳,王正国,周继红,许民辉[10]（2004）在《培养大鼠下丘脑CRH神经元生长规律研究》一文中研究指出目的 探讨体外培养胎鼠下丘脑神经元的形态、生长变化规律及促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的表达变化。方法 取孕 1 7天胎鼠下丘脑分散培养下丘脑神经元 ,光镜下连续观察神经元胞体直径、突起长度、数目等变化规律 ,应用扫描电镜、免疫细胞化学染色方法观察CRH神经元的生长变化规律。结果 培养下丘脑CRH神经元 3～ 6天生长速度最快 ;7～ 1 0天神经元细胞数量、胞体直径、突起长度和CRH染色强度均达高峰 ;1 2天后部分神经元可出现退形性改变。结论 培养下丘脑CRH神经元 7～ 1 0天生长迅速趋于成熟 ,是神经元机能测试的最佳时期(本文来源于《创伤外科杂志》期刊2004年01期）
下丘脑神经元培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(mono-2-ethylhexyl phthalate,MEHP)对新生雌性大鼠下丘脑生殖神经内分泌功能的影响。方法对出生24h内的新生雌性SD大鼠下丘脑神经元进行原代培养,分别暴露于含终浓度为0(对照)、10~(-15)、10~(-12)、10~(-9)、10~(-6)mol/L MEHP的培养基染毒24h。采用qRT-PCR法检测Gn RH、Gn RHr、Kiss1及Kiss1r基因的表达水平。结果与对照组相比,各浓度MEHP暴露组原代培养新生雌性大鼠下丘脑神经元Kiss1基因的表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05);而Gn RH、Gn RHr和Kiss1r基因的表达水平均无明显改变。结论 MEHP有可能通过下调新生雌性大鼠下丘脑神经元Kiss1基因表达水平来干扰生殖神经的内分泌调控功能。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
下丘脑神经元培养论文参考文献
[1].梁慧慧,赵宗胜,杨恒,翟曼君,梁艳萍.绵羊下丘脑神经元细胞培养与鉴定[J].畜牧与兽医.2018
[2].道龙,高娜,孙增荣.邻苯二甲酸单乙基己基酯对原代培养新生雌性大鼠下丘脑神经元生殖神经内分泌相关基因表达影响[J].环境与健康杂志.2017
[3].黄玉敬,高娜,孙增荣.邻苯二甲酸-单-乙基己基酯对原代培养新生大鼠下丘脑神经元活性的影响及其氧化损伤作用[J].环境与健康杂志.2015
[4].燕美玲.MEHP对原代培养新生大鼠下丘脑神经元的毒性作用[D].天津医科大学.2014
[5].王旭辉,张岫竹,王伍超,刘大维,代维.大鼠下丘脑神经元培养的新方法[J].第叁军医大学学报.2009
[6].王江华.瘦素对长时间培养的下丘脑神经元细胞内钙信号的调节及机制研究[D].华中科技大学.2008
[7].曹荣,兰莉,段丽,张萍,熊鹰飞.渗透压变化对缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元表达的影响[J].解剖学报.2006
[8].曹荣,饶志仁.低渗刺激后缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元的表达变化[C].中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编.2005
[9].杨春,崔慧先,樊平,吴文娟,李媛.观察大鼠下丘脑NPY神经元的培养及瘦素对其mRNA表达的影响[J].基础医学与临床.2005
[10].张云东,朱佩芳,王正国,周继红,许民辉.培养大鼠下丘脑CRH神经元生长规律研究[J].创伤外科杂志.2004
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