彭婧1韦拔雄1陈炳旭2廖红兴1
（1广州市第十二人民医院病理科广东广州510620；2广州军区陆军总医院广东广州510130）
【中图分类号】R737.9【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)10-0009-02
【摘要】目的探讨癌蛋白(C-erbB-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的表达情况及与临床预后的关系。方法应用免疫组织化学S-P法对128例乳腺浸润性导管Ca的C-erbB-2和VEGF的阳性表达进行检测分析。结果128例中有83例（64.84%）C-erbB-2过表达，82例（64.06%）VEGF过表达，C-erbB-2和VEGF同时阳性表达者65例（50.8%）。两者阳性率均随组织分级升高而上升。但各级间未见明显差异（P＞0.05）。在转移组中，81.5%（44/54）的病例C-erbB-2过表达，70.4%(38/54)VEGF过表达。两者的过表达与转移呈正相关关系（C-erbB-2P＜0.005，VEGFP＜0.005）。C-erbB-2和VEGF阳性配对分析表明，两者间阳性表达互为正相关（P＜0.005，r=0.366）。结论在乳腺浸润性导管癌中，C-erbB-2和VEGF的过表达提示转移增加，可作为乳腺癌的预后指标。
【关键词】免疫组织化学乳腺浸润性导管癌癌蛋白(C-erbB-2)生长内皮生长因子(VEGF)
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，浸润和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征。随着分子生物学的发展,对细胞分子生物学行为的研究发现,肿瘤细胞内各种特异蛋白的表达能更早期、准确地反映出乳腺Ca的预后状况。C-erbB-2和VEGF被认为是乳腺癌浸润转移的一个重要因素。采用免疫组化方法联合检测C-erbB-2和VEGF在乳腺浸润性导管癌的表达情况及相互关系,探讨它们作为乳腺癌的有效预后因素和预测指标的可行性。
1材料与方法
1.1材料病例选自(我院和陆军总医院)1999年7月-2006年12月存档的乳腺浸润性导管癌128例。根据临床病理资料对肿瘤细胞进行组织学分级(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),按远处淋巴结转移情况分为有淋巴结(LN+)和无淋巴结(LN-)转移两组。选用的蜡块重切4um三张,一张作常规HE染色,余两张作免疫组化染色。
1.2试剂和免疫组化染色C-erbB-2、VEGF抗体及免疫组化试剂盒均由DAKO公司提供,采用免疫组化S-P法,行高温修复抗原处理。一抗4℃过夜,DAB显色,苏木素衬染,设立阳性对照和阴性对照。
1.3统计学处理x2检验。
2结果
2.1临床病理资料本组128例乳腺浸润性导管癌中,男性3例,女性125例,年龄21-79岁,平均47.3岁,根据细胞分化程度以肿瘤进行分级(Bloon-Richards分级),Ⅰ级45例,Ⅱ级47例,Ⅲ级36例,其中54例伴有腋窝和(或)锁骨下淋巴结转移(LN+),74例未见淋巴结转移(LN-)。
2.2免疫组织染色C-erbB-2阳性表达在细胞膜上，见图1,VEGF阳性表达在乳腺癌细胞胞质内,见图2。本组研究中C-erbB-2阳性表达率为64.8%(83/128),VEGF阳性表达率为64.06%(82/128)。
图1肿瘤细胞膜C-erbB-2图2肿瘤细胞质内VEGF阳性，阳性,S-P法,200S-P法,200X
2.3C-erbB-2、VEGF过表达与乳腺浸润性导管癌的临床病理联系，见表1C-erbB-2在乳腺癌Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级的阳性表达率分别为58%、66%、72%,随着组织学分级升高而呈上升的趋势,但三组间无明显差异，0.25＜P＜0.5;而在有远处淋巴结转移的病例中C-erbB-2阳性率为81.5%(44/54),而无淋巴结转移者(LN-)则为41.9%(31/74)。两者具有显著差异性，P＜0.005。VEGF在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌的表达率为55.5%、63.8%、75%，三组间无显著差异(0.01＜P＜0.25)。
表1C-erbB-2、VEGF在乳腺浸润性导管癌的表达情况
2.4C-erbB-2与VEGF在乳腺癌中的关系在所研究的128例乳腺浸润性导管癌中，C-erbB-2阳性表达有83例，VEGF阳性82例，C-erbB-2和VEGF同时表达的有65例（50.8%）,P＜0.005，r=0.366，LN+组54例中40例(74.07%)，LN-组74例中28例（37.83%），相关分析表明两者间有密切的正相关关系。
3讨论
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一。发生淋巴结转移很常见。研究证实淋巴结转移与否是乳腺癌临床预后的重要因素。
（1）C-erbB-2又称HER-2，是185KD的跨膜糖蛋白，为表皮生长因子受体家族成员之一。C-erbB-2在乳腺癌中表达目前仍有许多争论，Van的研究发现，在侵袭性乳腺癌中，疾病早期即可发现C-erbB-2癌蛋白的过表达[1]；Kaptain等研究也发现C-erbB-2过表达的乳腺癌侵袭力较阴性者强，肿痛更易，更早出现转移[2]。杨金巧等认为C-erbB-2的表达与乳腺癌的临床分期、组织学分级及腋窝淋巴结转移有明显关系。而许炳基等则认为C-erbB-2表达与乳腺癌组织学分级无关，但与有淋巴结转移有关。本实验中C-erbB-2阳性率为68.8%，阳性率随组织学分级升高而有所增加，但未见明显的正相关关系；在淋巴结转移因素的分析中发现远处淋巴结转移与C-erbB-2过表达具有明显的相关关系，乳腺癌中C-erbB-2阳性表达预示肿瘤转移的几率更大，因此，C-erbB-2可以作为乳腺癌淋巴结转移的一个预后和预测性的因素。
（2）C-erbB-2在人类浸润性乳腺癌阳性率高达74.1%，与本组研究结果相符，C-erbB-2的过表达提示预后不良。最近的研究证实，C-erbB-2基因产物P185的单克隆抗体（Herceptin）对转移的乳腺癌有效，并已用于临床[3，4]。
VEGF是强有力的淋巴管内皮生长因子和血管生成因子，选择性地作用于内皮细胞促进有丝分裂[5]刺激其增殖。许多研究结果表明，在人类肿瘤组织中肿瘤周边新生淋巴管，扩张的淋巴管，有癌栓的淋巴管和有肿瘤细胞较多的淋巴结内有淋巴管内皮细胞VEGF呈高表达。肿瘤内新生血管内皮细胞VEGF重新表达，提示VEGF调控系统可调节肿瘤间血管网和淋巴管生成。本组实验结果显示64.06%（82/128）的乳腺癌VEGF阴性，统计学分析表明与上述发现相一致。肿瘤间质血管网和淋巴管在为肿瘤生长提供养分的同时，也为肿瘤转移创造了条件，本研究结果显示，VEGF在乳腺癌淋巴结转移组中阳性率为70.37%（38/54）。提示：VEGF在乳腺癌细胞中表达与转移相关。
128例乳腺癌淋巴结转移组中VEGF阳性表达明显高于阴性表达。说明VEGF促进乳腺癌淋巴管形成，因此，淋巴管数目增多使癌细胞接触淋巴管的机会增多，易于侵入淋巴管，从而使发生淋巴管转移机会增加[5]。综上所述，本实验研究表明，VEGF在人乳腺癌细胞中有高水平表达并与淋巴结转移密切相关。因此，VEGF可以作为乳腺癌淋巴结转移的一个预后和预测因素，为临床治疗肿瘤提供一个新的途径。
C-erbB-2和MMP2与肿瘤转移的关系密切，但目前对两者间相互影响的研究报道很少。Kueizaki指出活化的MMP2水解细胞外基质使之释放多种细胞生长因子，加强C-erbB-2的功能，从而促进肿瘤细胞和血管内皮细胞的生长。在本研究中，C-erbB-2和VEGF同时表达者65例（50.8%），而且在转移组中高达40例（74.07%），非转移组中28例（37.83%），相关分析表明，两者间具有明显的相关关系，与上述文献相互支持，表明C-erbB-2和VEGF在乳腺癌的发生发展中存在着互为反馈、互相激活的作用，C-erbB-2和VEGF过表达增加肿瘤细胞的侵袭转移能力，预后不良，它们之间相互促进作用的机理有待进一步探讨。
参考文献
[1]JvandeVijverMJ.Assessoftheneedandappropriatemethadfortestingforthehumanepidermalgrowthfactorreceptor(HER-2)［J］.EurJCancer,2001,37:11.
[2]KaptainS，TanLK，ChenB.HER-2/neuandbreastCancer[J].DiagnMolPathol,2001,10:139.
[3]杨金巧，幸天勇，胡锐等.C-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义[J].华西医科大学学报，1999，30（1）：75.
[4]许炳基，倪灿荣，范淼.乳腺癌中nm-23与C-erbB-2、ER、PE的表达及预后相关研究[J].诊断病理学杂志，1999，6(3):171.
[5]崔志明，李晓杰，李冰.血管内皮生长因子D的表达与乳腺Ca转移与预后的关系[J].中国现代医学杂志，2006，916(18):2785.