导读:本文包含了格拉利素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:格拉利素,抗菌肽,生物信息学,原核表达
格拉利素论文文献综述
杨超文[1]（2007）在《抗菌肽基因格拉利素的克隆及功能研究》一文中研究指出人Glyrichin基因(中文：人格拉利素，又称HL52)是在本室首次发现并注册的鼠Glyrichin基因(GenBank number：AY028425，又称mL52)的基础上，以22周人胎肝cDNA文库为模板扩增出的新基因。本研究是在鼠.Glyrichin的基础上，通过生物信息学和分子细胞生物学对人Glyrichin基因进行功能研究。生物信息学分析显示人Glyrichin基因核苷酸长度为240bp，具有完整的开放阅读框架，编码79个氨基酸。电子PCR染色体定位提示人Glyrichin基因定位于染色体的20q11.22，基因组结构分析显示Glyrichin由两个外显子和一个内含子组成。蛋白序列同源性分析未发现有已知功能的同源蛋白，也未发现已知的功能域，是一个功能未知的蛋白，这对该基因功能的研究带来了一定的困难。但其理化特点如富含甘氨酸(21.5％)，pI=9.58。在pH=7时带正电荷，是小分子碱性蛋白，二级结构使用DNAstar5.0软件分析为集亲水性与疏水性于一体，以β折叠为主，这与已知抗菌肽共有的结构特点相似。本研究对人Glyrichin的天然存在性进行了探讨，以Northern杂交方法分析该基因在四种人源性肿瘤细胞中的表达及转录本大小，证实了人Glyrichin具有单一转录本，大小为600bp左右：以RT-PCR分析其在胎肝、胎肾、胎脾、胎肺等四种组织中的表达情况，以GFP为标记蛋白对基因的亚细胞定位进行探索，证实了该蛋白可能分布于胞浆。生物信息学分析显示人Glyrichin理化性质具有了抗菌肽的诸多特点，我们合成了代表人Glyrichin功能的肽段pCM-19进行抗菌功能分析，证实了pCM-19良好的抗菌功能，然后利用原核表达系统，构建了含有格拉利素基因的系列缺失体的pET22b表达载体，并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。观察到该基因诱导表达时对宿主菌菌体生长具有明显的抑制作用，初步证实了人Glyrichin具有明显的抗菌活性，同时也证实了蛋白C端对其抗菌活性的发挥是必须的。人Glyrichin完整蛋白原核表达也证实了具有良好的抗菌活性。我们选用了毕赤酵母表达系统对该基因进行功能分析，将人Glyrichin基因构建到毕赤酵母表达载体pPIC9和pPIC9K中，锂盐法转化毕赤酵母GS115中，G418抗生素筛选高拷贝转化子，进行培养诱导，对表达上清通过“纸片法”、“试管法”、“琼脂糖纸片扩散法”验证表达产物的活性。证实了人Glyrichin具有抗菌活性。通过生物信息学比较我们发现了有29个成员组成的高度同源的全新抗菌肽家系，通过代表家系九个成员的4个合成肽的抗菌活性检测和线虫源格拉利素基因原核表达分析，证实了它们具有良好的抗菌活性，强烈提示一个跨物种的抗菌肽家系的存在。综上所述，本研究获得了人源性和线虫源的格拉利素基因，确认了其天然存在性，通过原核表达和毕赤酵母表达系统证实了其具有明显的抗菌活性。生物信息学分析及实验验证提示一个跨物种的有29个成员的新的抗菌肽家系的存在。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2007-05-24）
杨超文,尹丽莉,沙继斌,赵光,胡锴勋[2]（2007）在《格拉利素抗菌肽家系的发现及部分功能验证》一文中研究指出目的:继发现人源性新抗菌肽基因并进行功能验证后,进一步发现高度同源蛋白质家系并进行功能验证。方法:利用生物信息学分析手段对该蛋白家系各成员进行系统分析,人工合成具有代表性的不同肽段,采用比浊法和菌落计数法测定人工合成肽段的抗菌活性。结果及结论:发现了富含甘氨酸并且序列高度同源的抗菌肽家系,命名为格拉利素(G lyrich in),目前含有来自不同生物的29个成员,所有成员均无相关功能研究报道;根据多序列比对结果所合成的、代表家系中9个成员的4条多肽均有不同程度的抗菌作用。上述生物信息学分析和实验研究结果强烈提示了新抗菌肽家系的存在,其中跨越哺乳动物的抗菌肽家系的存在已得到充分证实。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2007年01期）
格拉利素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:继发现人源性新抗菌肽基因并进行功能验证后,进一步发现高度同源蛋白质家系并进行功能验证。方法:利用生物信息学分析手段对该蛋白家系各成员进行系统分析,人工合成具有代表性的不同肽段,采用比浊法和菌落计数法测定人工合成肽段的抗菌活性。结果及结论:发现了富含甘氨酸并且序列高度同源的抗菌肽家系,命名为格拉利素(G lyrich in),目前含有来自不同生物的29个成员,所有成员均无相关功能研究报道;根据多序列比对结果所合成的、代表家系中9个成员的4条多肽均有不同程度的抗菌作用。上述生物信息学分析和实验研究结果强烈提示了新抗菌肽家系的存在,其中跨越哺乳动物的抗菌肽家系的存在已得到充分证实。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
格拉利素论文参考文献
[1].杨超文.抗菌肽基因格拉利素的克隆及功能研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2007
[2].杨超文,尹丽莉,沙继斌,赵光,胡锴勋.格拉利素抗菌肽家系的发现及部分功能验证[J].军事医学科学院院刊.2007