利用番茄cDNA酵母双杂交文库筛选Pti4互作蛋白

利用番茄cDNA酵母双杂交文库筛选Pti4互作蛋白

论文摘要

以番茄的根、叶、花及不同发育时期的果实提取RNA,构建酵母双杂交文库。经检测,文库容量为1.1×10~7 CFU,阳性率大于95%,插入片段平均长度大于1 000 bp,可用于互作蛋白的筛选。依据番茄抗病途径相关基因Pti4编码序列设计引物,构建重组诱饵载体并转化酵母菌,筛选与Pti4相互作用的蛋白质。经初步检测获得6个可能与Pti4互作的转录因子,为进一步研究番茄Pti基因的作用机制提供了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 植物材料。
  •     1.1.2 菌株与载体。
  •     1.1.3 试剂与药品。
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 番茄酵母双杂交cDNA文库构建。
  •     1.2.2 Pti4载体构建与酵母转化。
  •     1.2.3 酵母双杂交文库筛选Pti4互作蛋白。
  • 2 结果与分析
  •   2.1 番茄cDNA酵母双杂交文库的构建
  •   2.2 Pti4基因酵母双杂交载体构建
  •   2.3 Pti4互作蛋白的筛选
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王洋,张政,王莹莹,冯国栋,陈丹阳,周宇,牛向丽

    关键词: 番茄,酵母双杂交,文库筛选,蛋白质相互作用

    来源: 安徽农业科学 2019年18期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 合肥工业大学食品科学与工程学院

    分类号: Q943.2

    页码: 111-114

    总页数: 4

    文件大小: 3156K

    下载量: 363

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