一种优化的猪卵泡颗粒细胞分离方法及验证

论文摘要

目前,进行体外研究的卵泡颗粒细胞主要通过抽取卵泡液的方式获得。而笔者前期研究发现,通过该方式获得的颗粒细胞贴壁率低且活力差。为解决该问题,在抽取方式的基础上采用FICOLL-Paque分离液对细胞进行进一步纯化,并通过CCK-8、Western Blot、免疫荧光染色、QRT-PCR、ELISA等方法分别对纯化细胞的形态、增殖能力、激素分泌相关受体（FSHR、LHCGR）和基因（CYP19A1、CYP11A1、StAR）的表达及激素分泌情况进行检测。结果发现,经纯化的细胞贴壁能力、细胞形态和增殖能力明显改善,且各激素分泌相关基因都有表达;E2分泌量明显提高,而P4分泌明显降低。研究结果表明,经FICOLL-Paque分离液纯化后的猪卵泡颗粒细胞中黄体化的颗粒细胞被大部分清除,纯化后的细胞活力更好且更能体现出颗粒细胞的特性。

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类型: 期刊论文

作者: 曲小露,施振旦,李辉

关键词: 颗粒细胞,细胞增殖,孕酮,免疫荧光染色,受体

来源: 江苏农业科学 2019年23期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 畜牧与动物医学

单位: 吉林农业大学动物科技学院,江苏省农业科学院畜牧研究所/动物品种改良与繁育重点实验室

基金: 国家自然科学基金(编号:31402080),江苏省自然科学基金(编号:BK20151365)

分类号: S828.3

DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.23.045

页码: 190-194

总页数: 5

文件大小: 1259K

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标签：颗粒细胞论文;  细胞增殖论文;  孕酮论文;  免疫荧光染色论文;  受体论文;