基于实时荧光环介导等温扩增快速检测鸡肉中的大肠杆菌O157:H

论文摘要

以大肠杆菌O157:H7的VT2基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立鸡肉中大肠杆菌O157:H7实时荧光定量环介导等温扩增（Rti-LAMP）检测方法。纯培养大肠杆菌O157:H7检测灵敏度达3.5 CFU/反应,需时45 min。模拟大肠杆菌O157:H7污染鸡肉样品,经37℃增菌4 h,用Whirl-pak无菌袋过滤离心得沉淀,提取样品DNA模板用于Rti-LAMP反应,检测大肠杆菌O157:H7灵敏度达140 CFU/g,整个检测流程约7 h。采用蒙脱石封闭的活性炭前处理污染鸡肉样品,不经增菌过程,结果表明:该Rti-LAMP检测方法灵敏度达12 CFU/g,整个检测耗时约4.5 h。市购鸡肉样品51份,以大肠杆菌国标检测法为对照,研究基于Rti-LAMP联合增菌或封闭活性炭预处理而不经增菌的两种方法,对比检测临床鸡肉样品大肠杆菌O157:H7污染率。结果:国标法和增菌的Rti-LAMP两种方法均检测到同一鸡肉样品为大肠杆菌O157:H7阳性,经封闭活性炭预处理而未经增菌的Rti-LAMP则检测到8份鸡肉样品大肠杆菌O157:H7阳性。研究表明,封闭活性炭预处理的Rti-LAMP检测方法较国标法更灵敏、快速、简便、特异地检测鸡肉中大肠杆菌O157:H7污染。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵远洋,王瑾,林丽萍,郜彦彦,吴国平

关键词: 大肠杆菌,鸡肉,实时环介导等温扩增,增菌,封闭的活性炭

来源: 中国食品学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,轻工业手工业

单位: 江西农业大学食品科学与工程学院南昌市农产品加工与质量控制重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目(31560480),江西省自然科学基金项目(20171ACB20013)

分类号: TS251.55;O657.3

DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.03.035

页码: 281-288

总页数: 8

文件大小: 920K

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