反硝化基因工程菌株YP4S的构建及对污水除氮特性研究

反硝化基因工程菌株YP4S的构建及对污水除氮特性研究

论文摘要

从养殖场污泥中筛选出菌株YP4,经16S rDNA分子发育树的同源序列比对,确定为克雷伯什菌属(Klebsiella sp.)。由NCBI数据库查编码亚硝酸还原酶(Nir)的基因nirS序列,设计引物,以铜绿假单胞菌PAOI基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增目的片段nirS,经过双酶切、克隆和转化,得到重组质粒pYP4S,然后转化野生菌株YP4,构建反硝化基因工程菌YP4S。菌株生长曲线测定表明,工程菌株YP4S与YP4的生长特性基本一致。工程菌株YP4S对模拟污水COD、TN、NH4+-N和NO3--N具有较高的去除率,YP4S与YP4相比,对NO2--N积累的减少量为(32.44±3.96)%,明显减少了NO2--N的积累。通过正交试验获得工程菌株YP4S在C/N=10、T=30℃、r=200 r/min和pH=7.0的最佳组合条件下,对模拟污水TN去除率较高。应用工程菌株YP4S处理猪场沉淀池的实际污水,COD、TN、TP、NH4+-N和NO3--N去除率分别为(95.87±0.82)%、(76.38±3.84)%、(97.13±0.54)%和(75.35±2.57)%,NO2--N积累量为(3.31±1.24) mg/L,表明工程菌株YP4S具有较好反硝化作用,对含氮量高的实际污水修复具有潜在的应用前景。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 菌株的鉴定
  •   1.2 反硝化基因nir S工程菌株YP4S的构建及鉴定
  •   1.3 工程菌株YP4S生长曲线的测定
  •   1.4 工程菌株YP4S对模拟污水的除氮效果检测
  •   1.5 正交试验优化工程菌YP4S除氮的效能
  •   1.6 工程菌株YP4S对实际废水含氮去除效果的检测
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 培养基与试剂
  •   3.2 菌株的富集筛选与分离
  •   3.3 菌株的鉴定
  •   3.4 反硝化基因nirS克隆和工程菌构建
  •   3.4 工程菌株YP4S生长曲线的测定
  •   3.5 工程菌株YP4S对模拟污水的除氮效果检测
  •   3.6 正交试验
  •   3.7 工程菌株YP4S对实际污水的除氮效果检测
  •   3.8 数据处理
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 曾梅,涂玉佩,周锡梅,詹福建,黄铭辉,刘励杰,巫光宏

    关键词: 反硝化基因,基因工程菌株,反硝化,生物除氮

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,环境科学与资源利用

    单位: 华南农业大学生命科学学院,华南农业大学公共基础课实验教学中心

    基金: 2016年国家级大学生创新创业训练计划项目(201610564158),广东省科技计划项目(2011B031000019)共同资助

    分类号: X172;X703

    DOI: 10.13417/j.gab.038.000670

    页码: 670-676

    总页数: 7

    文件大小: 302K

    下载量: 260

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