导读:本文包含了隐孢子虫卵囊论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:孢子,虫卵,基因,蛋白,小鼠,敏感性,休克。
隐孢子虫卵囊论文文献综述
张璐,刘珍珍,王臣荣,张振杰,胡苏辉[1]（2018）在《微小隐孢子虫卵囊扩增及其纯化方法筛选》一文中研究指出目的扩增微小隐孢子虫卵囊并筛选其纯化方法,以期获得大量有活性的纯净微小隐孢子虫卵囊。方法将微小隐孢子虫分离株人工感染犊牛,分别采用饱和蔗糖溶液漂浮法、饱和盐水漂浮法、饱和硫酸锌漂浮法浓集粪便中的卵囊,经氯化铯密度离心纯化后,用脱囊率进行纯化卵囊的活力检测。结果 3种卵囊浓集方法中,饱和食盐水漂浮法所获得的卵囊杂质少,显微镜下视野干净,经氯化铯密度离心后获得清晰的卵囊带卵囊量为3.5×108个,其中76%的卵囊保持良好活力。结论饱和盐水漂浮再结合氯化铯密度离心获得微小隐孢子虫卵囊纯度高、活性良好,可作为实验室批量分离纯化微小隐孢子虫卵囊的首选方案。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2018年02期）
赵桂省,马莹,陈甫,王洪举[2]（2017）在《山东部分地区猪源隐孢子虫卵囊的分离与基因型鉴定》一文中研究指出应用抗酸染色技术对山东地区部分猪场隐孢子虫感染情况进行检测,通过PCR扩增部分18s r RNA序列,分析同源性,并绘制基因进化树,鉴定其基因型。结果表明,648份猪粪样品的感染率为12.04%,隐孢子虫卵囊有两种形态,18s r RNA序列分析发现与C.parvum"mouse"型和C.muris有100%和99.8%的同源性,并分别处于同一分支。说明山东地区猪隐孢子虫感染率较高,感染的隐孢子虫基因型是C.parvum"mouse"型和C.muris,提示猪与鼠之间存在交叉传播的可能。(本文来源于《山东畜牧兽医》期刊2017年07期）
孙芳芳,罗楠楠,李俊强,王荣军,菅复春[3]（2015）在《水果、蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立及河南郑汴地区水果、蔬菜表面肠道原虫携带情况调查》一文中研究指出为了建立果蔬表面环孢子虫卵囊的洗脱方法,笔者参考国内外各位学者的方法,建立了检测果蔬表面人源卡耶坦环孢子虫(Cyclospora cayetanensis)卵囊的方法。分别用50、500个环孢子虫卵囊对新鲜环孢子虫卵囊阴性的果蔬进行人工污染,并设置阴性对照;使用含有0.1%Alconox~(?)、0.1%雕牌、0.1%立白、0.1%白猫的四种洗涤液和去离子水,在摇床中洗脱样品:然后,采用反复离心沉淀法收集卵囊;最后,基于环孢子虫18S rRNA基因位点对洗脱后收集到的卵囊液进行巢式PCR扩增。只用去离子水时,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜、甜瓜和草莓的检测敏感性可达到50个,而西红柿可达到500个;当用不同洗涤剂时,各样品的检测敏感性均可达到50个。不同洗涤剂之间检测敏感性无显着差异。为了了解河南部分地区水果、蔬菜表面人兽共患寄生虫的携带情况,我们从2013年5月-10月从河南郑州、开封两地市场上和农田中采集时令水果、蔬菜样品464份,根据建立的检测方法,对样品进行检测,以环孢子虫18S rRNA引物扩增出阳性样本1份,以隐孢子虫18SrRNA引物扩增出阳性样本3份,以微孢子虫ITS引物扩增出阳性样本14份。本研究建立的检测水果、蔬菜表面环孢子虫卵囊的方法,以及对水果、蔬菜中主要肠道原虫的携带情况的调查,对于了解人肠道原虫的传播途径奠定了基础,有助于从根源上阻止肠道原虫病的传播。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十叁次学术研讨会论文集》期刊2015-07-25）
黄燕,米荣升,贾海燕,胡盼,詹婷婷[4]（2015）在《叁种实时荧光定量PCR方法检测粪便中隐孢子虫卵囊的比较》一文中研究指出传统镜检方法检测粪样中的隐孢子虫(Cryptosoridium spp.)卵囊存在敏感性低、计数困难等缺点,本研究旨在对叁种隐孢子虫实时荧光定量PCR检测方法进行比较,筛选一种有效的检测方法,用于准确评估小鼠粪便中隐孢子虫卵囊的数量。根据文献报导,选取种间保守的隐孢子虫小亚基核糖体RNA(small subunit ribosomal RNA,SSU rRNA)基因序列,合成叁组引物,以及叁种特定的TaqMan探针,分别命名为JVAF/JVAR(探针:JVAP18s)、CcF18s/CcR18s(探针:Csp18s)和CRU18sF/CRU18sR(探针:CRU18s)。利用含微小隐孢子虫(Cryptosoridium parvum)18S rRNA序列的重组质粒DNA绘制标准曲线;以10~(-2)~10~6个微小隐孢子虫卵囊提取的DNA为模板进行扩增,比较叁种方法的敏感性;对柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella)卵囊基因组DNA、刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)速殖子基因组DNA等进行扩增,观察叁种方法的特异性。选择敏感性和特异性较好的方法,对3周龄和8周龄小鼠感染泰泽隐孢子虫(C tyzzeri)后的排卵囊情况进行观察。结果显示,以JVAF/JVAR(探针:JVAP18S)、CcF18s/CcR18s(探针:Csp18s)和CRU18sF/CRU18sR(探针:CRU18s)为引物的实时荧光定量PCR方法的标准曲线斜率和方差相关系数(square correlation coefficients)分别在-3.10~-3.24和0.994~0.999之间。JVAF/JVAR(探针:JVAP18S)和CcF18s/CcR18s(探针:Csp18s)方法可以检测到0.1个卵囊,CRU18sF/CRU18sR(探针:CRU18s)则只能检测到最低1个卵囊。叁种方法均不能扩增柔嫩艾美尔球虫卵囊以及刚地弓形虫速殖子DNA,显示其特异性良好。选择JVAF/JVAR(探针:JVAP18s)为引物对小鼠感染泰泽隐孢子虫后排卵囊情况进行检测,结果3周龄和8周龄小鼠感染后第3天(3 days post infection,3DPI),排出的粪便中皆可检测到隐孢子虫卵囊,在12 DPI排卵囊量达到高峰,但3周龄小鼠排卵囊高峰下降缓慢,而8周龄小鼠在达到高峰后则迅速下降,提示以JVAF/JVAR和JVAP18s为引物和探针的实时荧光定量PCR检测方法敏感性高、特异性好,适合用于小鼠粪便中隐孢子虫卵囊的定量研究。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十叁次学术研讨会论文集》期刊2015-07-25）
李军,唐林生,彭昊,陶立,潘艳[5]（2014）在《安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因与热休克蛋白70基因的重组联合表达》一文中研究指出利用双酶切方法将安氏隐孢子虫热休克蛋白70(HSP70)基因部分编码区连接到含有安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因(COWP)的表达质粒pET-32a-COWP上,构建了表达质粒pET-32a-COWP-HSP70。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,30℃,经1.5mmol/L IPTG诱导表达6h,表达产物主要以可溶的形式表达。使用小鼠抗安氏隐孢子虫超免疫血清为第一抗体进行Western-blot检测,结果有明显的目的条带出现,说明重组蛋白能被抗安氏隐孢子虫抗体识别。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2014年12期）
孙芳芳,罗楠楠,李俊强,赵金凤,李廷文[6]（2014）在《水果及蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立》一文中研究指出为了建立检测果蔬表面人源卡耶坦环孢子虫(Cyclospora cayetanensis)卵囊的方法,分别用50,500个环孢子虫卵囊对环孢子虫卵囊阴性的新鲜果蔬进行人工污染,并设置阴性对照;使用含有0.1%Alconox,0.1%雕牌,0.1%立白、0.1%白猫的4种洗涤液和去离子水,在摇床中洗脱样品;然后,反复离心3次收集卵囊并提取卵囊DNA;最后,基于环孢子虫18S rRNA基因位点对卵囊DNA样品进行巢式PCR扩增.结果表明,卵囊污染吸附最佳时间为24 h,样品洗脱最佳时间为30 min.其中,只用去离子水时,生菜、西葫芦、黄瓜、西瓜、甜瓜和草莓的检测敏感性可达到50个卵囊,而西红柿可达到500个卵囊;当用不同洗涤剂时,各样品的检测敏感性均可达到50个卵囊.不同洗涤剂之间检测敏感性无显着差异.该研究初步建立检测水果、蔬菜污染环孢子虫卵囊的技术,采用此方法可特异、敏感、快速的检测果蔬表面环孢子虫卵囊,为食源性环孢子虫病暴发溯源提供技术支持.(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2014年06期）
彭昊,唐林生,李军,黄维义,陶立[7]（2014）在《安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究》一文中研究指出【目的】验证安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白(COWP)的免疫原性,为建立安氏隐孢子虫病免疫学诊断方法奠定基础。【方法】根据Gen Bank已公布的安氏隐孢子虫COWP同源基因序列(DQ060431)设计引物,克隆COWP基因并构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用蛋白印迹法检测其免疫原性。【结果】扩增获得的COWP基因片段为549bp,其序列与Gen Bank已公布COWP同源基因序列(DQ060431)的同源性达100%,将其插入p ET-32a载体可构建p ET-32a-COWP表达载体。重组菌在30℃下经0.5 mmol/L IPTG诱导5 h后,其表达形式以可溶性表达为主;NTA-Ni亲和层析柱层析时用200 mmol/L咪唑洗脱液洗脱,即能得到纯化的重组蛋白,重组蛋白分子量约40 k Da。以抗His标签鼠单克隆抗体或鼠抗安氏隐孢子虫高免血清为一抗进行Western blotting检测,均能获得预期的目的条带。【结论】重组COWP蛋白具有良好的免疫原性,可作为安氏隐孢子虫病免疫学诊断的候选抗原。(本文来源于《南方农业学报》期刊2014年10期）
路平,袁涛,冯启言,李敬,孙悦[8]（2014）在《游泳池中隐孢子虫卵囊替代物的去除》一文中研究指出隐孢子虫是常见的球状寄生虫。接触含有隐孢子虫卵囊的水体可致隐孢子虫病,主要的临床表现为腹泻,严重者可致死。游泳池是主要的传播场所。采用容积为5 500 L的游泳池,进行隐孢子虫卵囊替代物的修复模拟实验,研究在游泳池条件下絮凝沙滤技术对直径为4.5μm隐孢子虫卵囊替代物的去除效果。实验结果表明,氯化铝剂量为0.1 mg/L,沙滤料高度为30 cm,内循环流速为11.5 L/min,对隐孢子虫卵囊替代物去除率在90%以上。该技术对浊度具有较好的处理效果,当进水浊度降低且接近于出水浊度时,系统进入稳定运行阶段,对虫卵囊替代物去除率可以达到96%。(本文来源于《环境工程学报》期刊2014年07期）
刘振伟,岳耀辉,张龙现[9]（2013）在《隐孢子虫卵囊纯化技术研究进展》一文中研究指出隐孢子虫呈全球性分布,隐孢子虫病是一种世界性的人兽共患寄生虫病,具有重要的公共卫生意义。卵囊的分离、收集和纯化是研究隐孢子虫和隐孢子虫病的基础工作,国内外专家学者经过大量探索,建立了一系列的纯化技术或方法,例如漂浮法、沉淀法以及新兴分子生物学技术或仪器的应用。本文针对隐孢子虫卵囊纯化技术的研究进展状况作了简要的回顾综述。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2013年09期）
李廷文[10]（2013）在《郑州和开封病人胃肠道主要寄生虫感染情况调查及蔬菜表面隐孢子虫卵囊洗脱方法的建立》一文中研究指出隐孢子虫(Crycolosporidium)是一种专一的、寄生于胞内的寄生原虫，寄生于人和动物的胃肠道。能够引起严重的腹泻。食源性隐孢子虫病有明显的季节性，春季、夏季为易发季节。其传播途径非常广泛，可以以水源、食物、空气为介质进行传播，还能通过直接接触等途径传播，但是通过空气传播的报道非常少，通过以水源为介质传播的报道非常多，其在灌溉用水中被发现，是公认的世界范围内的水源性传播的病原体。食源性暴发的报道也非常多，1976年第一次有记录的人类感染隐孢子虫病暴发。此后很多国家相继报道该病的暴发。目前全球6大洲至少80个国家，300多个地区报道了隐孢子虫病。近十几年来已经报道了多起食源性隐孢子虫病的暴发。隐孢子虫对人类健康造成了威胁，并且造成了不必要的经济损失。检测蔬菜表面的隐孢子虫卵囊，阻止其传播可以减免其造成的危害。Cook、Palmer和Joan等先后建立了水果、蔬菜表面检测隐孢子虫的方法。这些方法是基于4个基本阶段：从蔬菜中提取出卵囊；浓集并分离卵囊；使分离出的卵囊可视化；卵囊能在显微镜下识别。为了了解郑州开封两地患者肠道寄生虫感染情况，2012年7月4日至2012年8月31日期间，在郑州河南省人民医院，开封解放军第155医院和淮河医院采集的共2698份样品。采用卢戈氏碘染色法和饱和蔗糖漂浮法对所有样品进行了检查。共发现了5种肠道寄生虫，分别是环孢子虫、贾第虫、阿米巴原虫、线虫和钩虫。寄生虫阳性粪便样品29例，肠道总感染率为1.07%（29/2698）。其中环孢子虫和贾第虫感染率并列最高，均为0.4%（11/2698），其次为阿米巴原虫肠道感染，感染率为0.19%(5/2698)，线虫和钩虫，感染率都为0.04%(1/2698)。此次调查没有发现混合感染，也没有发现隐孢子虫。为了建立一种能检测蔬菜表面隐孢子虫的方法，用不同数量梯度的隐孢子虫卵囊对蔬菜进行接种，分别设置为5×101个、5×102个、5×103个、5×104个；再对蔬菜进行洗脱，采用不同的洗涤剂，分别为Alconox洗洁精、雕牌洗洁精、立白洗洁精、白猫洗洁精和去离子水；对卵囊的收集，采用反复离心收集沉淀法；被接种的蔬菜的用量也被加以对比，最后基于隐孢子虫18S rRNA基因位点对洗脱后的卵囊进行PCR扩增，建立了一个系统的检测方法。结果表明用50g西葫芦、15g生菜时，卵囊最小洗脱量均为5×101个；洗脱时间10min和20min结果无明显差异；接种12h和接种24h结果无明显差异；不同洗涤剂（Alconox洗洁精、雕牌洗洁精、立白洗洁精、白猫洗洁精、去离子水）洗脱结果无明显差异。成功建立一种能够检测农产品表面污染隐孢子虫卵囊的检测技术，为进一步开展病原溯源研究提供了技术支持。(本文来源于《河南农业大学》期刊2013-05-01）
隐孢子虫卵囊论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
应用抗酸染色技术对山东地区部分猪场隐孢子虫感染情况进行检测,通过PCR扩增部分18s r RNA序列,分析同源性,并绘制基因进化树,鉴定其基因型。结果表明,648份猪粪样品的感染率为12.04%,隐孢子虫卵囊有两种形态,18s r RNA序列分析发现与C.parvum"mouse"型和C.muris有100%和99.8%的同源性,并分别处于同一分支。说明山东地区猪隐孢子虫感染率较高,感染的隐孢子虫基因型是C.parvum"mouse"型和C.muris,提示猪与鼠之间存在交叉传播的可能。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
隐孢子虫卵囊论文参考文献
[1].张璐,刘珍珍,王臣荣,张振杰,胡苏辉.微小隐孢子虫卵囊扩增及其纯化方法筛选[J].中国病原生物学杂志.2018
[2].赵桂省,马莹,陈甫,王洪举.山东部分地区猪源隐孢子虫卵囊的分离与基因型鉴定[J].山东畜牧兽医.2017
[3].孙芳芳,罗楠楠,李俊强,王荣军,菅复春.水果、蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立及河南郑汴地区水果、蔬菜表面肠道原虫携带情况调查[C].中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十叁次学术研讨会论文集.2015
[4].黄燕,米荣升,贾海燕,胡盼,詹婷婷.叁种实时荧光定量PCR方法检测粪便中隐孢子虫卵囊的比较[C].中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十叁次学术研讨会论文集.2015
[5].李军,唐林生,彭昊,陶立,潘艳.安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白基因与热休克蛋白70基因的重组联合表达[J].中国兽医科学.2014
[6].孙芳芳,罗楠楠,李俊强,赵金凤,李廷文.水果及蔬菜表面环孢子虫卵囊检测方法的建立[J].河南农业大学学报.2014
[7].彭昊,唐林生,李军,黄维义,陶立.安氏隐孢子虫卵囊壁蛋白的原核表达及其免疫原性研究[J].南方农业学报.2014
[8].路平,袁涛,冯启言,李敬,孙悦.游泳池中隐孢子虫卵囊替代物的去除[J].环境工程学报.2014
[9].刘振伟,岳耀辉,张龙现.隐孢子虫卵囊纯化技术研究进展[J].热带医学杂志.2013
[10].李廷文.郑州和开封病人胃肠道主要寄生虫感染情况调查及蔬菜表面隐孢子虫卵囊洗脱方法的建立[D].河南农业大学.2013
论文知识图
