猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立

猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立

论文摘要

根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的238 bp和152 bp特异性片段。该方法敏感性高、稳定性好、特异性强,临床样品检测结果与单项PCR检测结果符合率100%,该方法适合JEV和PPV的联合检测和鉴别诊断。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病毒
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 病毒DNA的提取及检测
  •     1.3.2 病毒RNA的提取、检测及反转录
  •     1.3.3 引物的设计和合成
  •     1.3.4 单项PCR反应体系的建立
  •     1.3.5 复合PCR反应体系的建立
  •     1.3.6 敏感性试验
  •     1.3.7 特异性试验
  •     1.3.8 稳定性试验
  •     1.3.9 临床样品检测
  • 2 结果
  •   2.1 DNA的检测结果
  •   2.2 RNA的检测结果
  •   2.3 PPV和JEV的单项PCR扩增结果
  •   2.4 复合PCR扩增结果
  •   2.5 敏感性试验
  •   2.6 特异性试验
  •   2.7 稳定性试验
  •   2.8 临床样品检测
  • 3 讨论与分析
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吕玉金,吴凤笋,刘胜利,李文刚

    关键词: 日本乙型脑炎病毒,细小病毒,复合

    来源: 江苏农业科学 2019年19期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 河南牧业经济学院动物医学院,河南省猪病防控工程技术研究中心,河南农业大学

    基金: 河南牧业经济学院预防兽医学重点学科建设项目(编号:MXK2016102)

    分类号: S852.651

    DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.19.042

    页码: 176-179

    总页数: 4

    文件大小: 973K

    下载量: 135

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