蒙药尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导H9c2细胞氧化损伤的保护作用

蒙药尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导H9c2细胞氧化损伤的保护作用

论文摘要

目的:研究蒙药尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导的H9c2细胞损伤的保护作用机制。方法:首先从尖叶假龙胆中提取雏菊叶龙胆酮单体化合物,然后建立H9c2细胞模型,将H9c2细胞分成五组:对照组,模型组,低、中、高剂量雏菊叶龙胆酮给药组(3.125、12.5、50μmol/L)。利用Real-time Cell Analysis(RTCA)多功能实时细胞功能分析仪建立最适过氧化氢损伤模型并检测活性。采用生化法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,Western blot技术检测抑制剂作用前后血红素氧合酶-1(HO-1)、谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)蛋白表达情况。结果:雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤有一定的治疗作用。它能够减轻或抵消H2O2诱导的细胞损伤和LDH的释放,并增强SOD活力;HO-1、GCLC蛋白的表达与模型组相比有明显的升高(P<0.05),BOS (GCLC抑制剂)和ZnPP (HO-1抑制剂)预处理显著降低雏菊叶龙胆酮的保护作用。结论:蒙药尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导H9c2细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能是通过激活Nrf2/ARE信号通路下游的抗氧化蛋白酶HO-1、GCLC表达来达到抗氧化保护作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 尖叶假龙胆样品药材
  •   1.2 细胞株
  •   1.3 实验仪器
  •   1.4 实验试剂和耗材
  • 2 实验方法
  •   2.1 尖叶假龙胆中各极性部位的制备
  •   2.2 H9c2细胞的培养
  •   2.3 RTCA监测最适铺板浓度
  •   2.4 RTCA检测H9c2细胞氧化损伤模型的建立
  •   2.5 雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用
  •   2.6 雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导的H9c2细胞损伤中LDH、SOD含量的影响
  •   2.7 Western blotting检测细胞内HO-1和GCLC蛋白的表达
  •   2.8 MTT法检测ZnPP(HO-1抑制剂)和BOS(GCLC抑制剂)预处理后雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用
  •   2.9 统计学分析
  • 3 结果
  •   3.1 尖叶假龙胆中雏菊叶龙胆酮的分离
  •   3.2 H9c2细胞最适铺板浓度
  •   3.3 H9c2细胞氧化损伤模型的建立
  •   3.4 雏菊叶龙胆酮对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用
  •   3.5 雏菊叶龙胆酮预保护H9c2细胞中LDH活性测定
  •   3.6 雏菊叶龙胆酮预保护H9c2细胞中SOD活性测定
  •   3.7 Western blot检测各组H9c2心肌细胞HO-1、GCLC蛋白的表达
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张园,任凯,龚雪,张瑞芬

    关键词: 尖叶假龙胆,雏菊叶龙胆酮,细胞

    来源: 中国民族医药杂志 2019年11期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中医学

    单位: 内蒙古自治区人民医院,内蒙古自治区中医医院,包头医学院

    基金: 内蒙古自治区人民医院院内基金项目(No.2016040)

    分类号: R29

    DOI: 10.16041/j.cnki.cn15-1175.2019.11.022

    页码: 38-42

    总页数: 5

    文件大小: 2428K

    下载量: 85

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