ELISA试剂检测抗-HIV反应性结果分析

ELISA试剂检测抗-HIV反应性结果分析

于兰芝(辽宁省朝阳市中心医院检验科122000)

【中图分类号】R512.91【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)13-0172-02

【摘要】目的目前大多HIV初筛实验室采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行定性检测,当检测标本的吸光度值大于试剂盒设定的临界值时为阳性,反之为阴性。对于强阳性和明显阴性的标本几乎不会错检,但是在检测临界值附近的弱显色反应的标本时可能出现假阳性结果,ELISA法操作过程中也存在一部分影响因素会导致出现假阳性;同时也要慎重低于临界值的阴性若显色反应标本,即假阴性反应,以免阳性标本漏检。为此对ELISA测定抗-HIV假阳性和假阴性的发生率和可能导致假阳性影响因素进行了分析,旨在探讨减少假阳性和假阴性的方法,提高检测结果的准确性。

【关键词】人类免疫病毒抗体酶联免疫吸附试验

获得性免疫缺陷综合征,又称艾滋病,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的免疫缺陷性疾病。HIV抗体的血清学诊断是目前最成熟最有效的和最易行的HIV感染分析方法。一般在HIV感染后3~8周即可检测出来。目前临床初筛实验室一般采用第三代ELISA法试剂检测抗-HIV:使用重组或多肽抗原制备的双抗原夹心法试剂盒,这种试剂可检测针对HIV抗原的所有抗体亚类,包括IgG、IgA、IgM、IgE、IgD,具有较高的敏感性。对于初筛阳性的标本,送HIV筛查中心实验室和HIV确证实验室确证。

1材料和方法

1.1标本来源:从2012年8月至2013年1月6个月我院门诊和住院患者12124的血液标本中,统计了抗-HIV检测S/CO值大于和接近临界值血清标本15份。

1.2实际与仪器:所用筛查试剂为国产均通过国家批批检,原理均为双抗原夹心法。筛查试验用试剂(简称试剂A,批号为2012061012),复检试验按2009版技术操作规范要求:第一次复检仍用试剂A,第二次复检用另一厂家试剂(简称试剂B,批号为201206011);酶标仪:anthos2010型;洗板机:MW-12型。试剂均在有效期内使用,仪器设备定期维护检验,室内质控均在控。

1.3方法:所有标本均按说明书进行操作。如初筛试验呈阴性反应,即判为阴性。如初筛试验呈反应性,需用原有试剂对相应标本进行双孔复检,双孔均呈无反应性则判为阴性;双孔呈反应性或双孔中有1孔呈反应性,则进行第二次复检,仍是双孔,测得结果,将结果连同标本上报院感染管理科,按要求专人送疾控HIV筛查中心实验室。

2结果

注:①对于初筛结果处于灰区的标本复检时测双孔取均值.②序号4序号与12是同一患者,间隔3个月,2次住院常规检查;序号9与序号13也是同一患者;③反馈结果:+为阳性,—为阴性。

3讨论

目前HIV感染临床诊断在实验室大多采用ELISA检测血清或血浆中的抗-HIV。虽然抗-HIV的ELISA试剂从1990年诞生以来,现已发展到第3代,敏感性和特异性都有很大的提高,但由于各个厂家、个体差异及方法特点,所以检测结果存在一定差异。

对于艾滋病,是非常敏感的问题,真阳性除积极治疗外,假阳性更要认真对待:科研部门的近一步研究,多种方法联合检测,严格遵守操作规程,尽可能排除干扰因素是我们的责任和义务。对于弱显色反映的假阴性标本,除多选择几家试剂检测外,还应做动态观察。当然,了解这些情况,对患者耐心解释,减少患者的心里负担及不必要的医患矛盾和医疗纠纷也很重要,也是我们相关工作人员的责任。

参考文献

[1]王兰兰,许化溪.临床免疫学检验[M].第5版.人民卫生出版社,2012:248-249.

[2].全国艾滋病检测技术规范2009年修订版版中国疾病预防控制中心.

[3]胡丽涛,王治国.临床检验定性检测的质量控制[J].检验医学2011:26(8)564-566.

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