导读:本文包含了包涵体膜蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:衣原体,包涵体膜蛋白,生物学功能
包涵体膜蛋白论文文献综述
肖健,王川,吴移谋[1]（2019）在《衣原体包涵体膜蛋白的结构特征及生物学功能研究进展》一文中研究指出包涵体膜蛋白是一类由衣原体分泌并被转运至包涵体膜的衣原体特异性蛋白。进入宿主细胞后,衣原体即可分泌大量蛋白对包涵体膜进行修饰,这类蛋白位于衣原体-宿主细胞界面处,因此可在维持包涵体稳定性、衣原体营养摄取及与宿主细胞发生相互作用的过程中发挥重要功能。本文就包涵体膜蛋白的结构特征及生物学功能研究进展进行了综述,以期更深入了解这种衣原体效应蛋白。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2019年04期）
郭芫,陈超群[2]（2018）在《沙眼衣原体包涵体膜蛋白的研究进展》一文中研究指出沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一种专性细胞内寄生的革兰阴性病原体,在宿主细胞内增殖形成包涵体,通过包涵体与宿主细胞发生相互作用。包涵体膜蛋白(inclusion membrane proteins,Inc蛋白)是一类定位于衣原体包涵体膜上的含独特双叶片状疏水性基序结构的衣原体蛋白。Inc蛋白广泛存在于衣原体属各个种内,每种衣原体既有各自独特的Inc蛋白,又有其关键Inc蛋白同系物,基于生物信息学方法,预测Ct有59个Inc蛋白。Inc蛋白在衣原体与宿主细胞相互作用过程中发挥重要作用。在过去的十年内,鉴定Inc蛋白并对其功能进行研究受到了重视,但对于Inc蛋白的功能仍知之甚少。衣原体基因操控技术的应用,推动了Inc蛋白等衣原体单个蛋白的功能研究。现就Ct Inc蛋白的鉴定及其功能研究进展作一概述。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2018年05期）
马良[3]（2018）在《肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308与ACBD3相互作用的鉴定研究》一文中研究指出肺炎衣原体(Chlamydia pneumonia,Cpn)是一种重要的非典型病原体,常可引起肺炎、支气管炎等呼吸系统疾病,也有研究表明其与心内膜炎、反应性关节炎等肺外疾病密切相关。肺炎衣原体感染宿主细胞后,主要依靠包涵体提供生存环境和所需营养,逃避宿主免疫。包涵体膜蛋白作为包涵体的重要组成部分,承担着重要的生物学功能,引起研究者高度关注。Cpn0308是已经实验研究证实的包涵体膜蛋白,但其生物学功能还有待进一步研究。前期实验运用酵母双杂交技术初步筛选出了与Cpn0308相互作用的分子为乙酰辅酶A结合域蛋白3(Acyl-coenzyme A binding domain-containing 3,ACBD3),本研究利用免疫共沉淀技术、GST pull-down技术和亚细胞共定位技术对两者间的相互作用做进一步鉴定。首先,以He La细胞c DNA为模板,根据前期酵母双杂交实验所得配体基因序列设计引物,通过PCR方法扩增ACBD3基因片段,与pc DNA3.1+/Flag载体质粒经双酶切和T4连接酶连接,构建真核表达载体pc DNA3.1+/Flag-ACBD3,并利用菌落PCR、双酶切及质粒测序的方法进行质粒筛选鉴定。然后,采用免疫共沉淀技术,验证Cpn0308与ACBD3间的相互作用。利用脂质体转染的方法,将实验室保存的pc DNA3.1/Myc-HisCpn0308和新构建的pc DNA3.1+/Flag-ACBD3两种质粒共转染至He La细胞,培养48h后收集细胞,离心裂解后加入Myc beads翻转吸附过夜,通过western blot技术进行检测,结果显示在33.5k D和15k D处有两条条带,分别对应为ACBD3和Cpn0308蛋白,证明两种蛋白间存在相互作用。同时,利用GST pull-down技术,分别制备诱饵蛋白GST-Cpn0308和猎物蛋白ACBD3,经诱饵蛋白固定、猎物蛋白捕获、洗涤等步骤后,通过western blot检测,发现实验组存在39k D和33.5k D两条条带,分别对应了GST-Cpn0308蛋白和ACBD3蛋白,进一步确认了两种蛋白间的相互作用。最后,利用亚细胞共定位技术,将pc DNA3.1/Myc-His-Cpn0308和pc DNA3.1+/Flag-ACBD3质粒共转染至He La细胞,培养24h后进行丙酮固定,以兔抗Myc抗体和鼠抗Flag抗体作为一抗,羊抗鼠Ig G-Cy3抗体、羊抗兔Ig G-FITC抗体作为二抗,对表达的融合蛋白Myc-Cpn0308和Flag-ACBD3进行免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察,发现Cpn0308显绿色荧光,ACBD3显红色荧光,两者融合显黄色荧光,确认外源性的两种蛋白间存在相互作用。基于同样的方法,将pc DNA3.1/Myc-His-Cpn0308转染至He La细胞,利用鼠抗Cpn0308抗体和兔抗ACBD3抗体作为一抗,羊抗小鼠Ig G-Cy3抗体、羊抗兔Ig G-FITC抗体作为二抗,进行免疫荧光染色实验,发现Cpn0308显红色荧光,ACBD3显绿色荧光,两者融合显黄色荧光,对Cpn0308蛋白和内源性ACBD3间的相互作用进行了鉴定。综合以上实验结果,证实了肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308与ACBD3存在相互作用,为Cpn0308的生物学功能研究提供了依据,并可能有助于对肺炎衣原体生长发育的分子机制的进一步研究。(本文来源于《河北北方学院》期刊2018-03-01）
程永婷,贾天军,李萍,贾晓晖,马良[4]（2016）在《沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体的构建及表达》一文中研究指出目的构建沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体并观察其在Hela细胞中的表达,为研究其与宿主间的相互作用奠定基础。方法克隆CT813基因,分别对CT813与pcDNA3.1/Myc-HisA空质粒进行双酶切,T4连接酶进行连接,然后进行菌落PCR、酶切及测序鉴定;将构建的重组质粒pcDNA3.1/Myc-HisA-CT813转染Hela细胞后采用Western blot与间接免疫荧光法检测目的蛋白表达。结果 PCR显示,扩增的目的基因片段约795bp,与预期相符;经NotⅠ与kpnⅠ双酶切鉴定重组质粒构建正确,测定其序列与NCBI数据库完全一致;Western blot显示重组质粒转化Hela表达的CT813融合蛋白分子质量单位为29.4kd左右;间接免疫荧光法检测该蛋白位于细胞胞浆中,是衣原体分泌性蛋白。结论成功构建了PcDNA3.1/Myc-His A-CT813真核表达载体并表达了沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813,对研究其生物学功能及与宿主配体间的相互作用具有重要意义。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2016年09期）
李鹏,何君,朱虹,李岩伟,于永慧[5]（2016）在《鹦鹉热衣原体的B598_0590基因编码包涵体膜蛋白》一文中研究指出目的:鹦鹉热衣原体的B598_0590基因与沙眼衣原体的毒力基因CT135同源,本研究旨在分析该基因的表达和定位。方法:生物信息学方法分析B598_0590基因的进化地位,比较B598_0590蛋白和沙眼衣原体毒力蛋白CT135的氨基酸疏水特征;重组表达、纯化鹦鹉热衣原体的B598_0590蛋白,免疫小鼠制备抗血清;共聚焦免疫荧光观察鹦鹉衣原体在正常培养条件和使用Lpx C抑制剂时B598_0590基因的表达和定位。结果:衣原体属内12个种的基因组均含有CT135同源基因,它们编码的蛋白质有相似的疏水特征;B598_0590与CT135的氨基酸同源性为21%;B598_0590的免疫荧光染色特征与包涵体膜蛋白Inc A相似,浓染包涵体膜;Lpx C抑制剂可抑制网状体的分裂、包涵体的生长及网状体向原体转化,包涵体膜蛋白的染色呈现典型的空泡结构。结论:Lpx C抑制剂可用于鉴定未知的鹦鹉热衣原体包涵体膜蛋白;鹦鹉热衣原体的B598_0590基因编码此前尚未鉴定的包涵体膜蛋白。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2016年01期）
吴华,卿文衡,刘军,张黎黎[6]（2015）在《肺炎嗜衣原体包涵体膜蛋白Cpn0147诱导单核细胞分泌TNF-α和IL-8》一文中研究指出目的探讨肺炎嗜衣原体(Cpn)包涵体膜蛋白Cpn0147诱导人单核细胞分泌炎症因子的分子机制。方法用去除内毒素活性的不同浓度Cpn0147重组蛋白(1.0、10.0、30.0和50.0μg/m L)刺激THP-1细胞0~48 h,ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-8(IL-8)的分泌水平;实时定量PCR检测TNF-α和IL-8 m RNA的表达;用Toll样受体2(TLR2)和TLR4中和抗体处理THP-1细胞,或采用TLR2和TLR4 si RNA沉默其表达,ELISA检测THP-1处理前后TNF-α和IL-8分泌的变化。结果 Cpn0147可诱导THP-1细胞表达TNF-α和IL-8的m RNA和蛋白;同时,不同时间点Cpn0147对TNF-α和IL-8的诱导水平有所不同,Cpn0147作用2~6 h后即可诱导TNF-α和IL-8分泌,12 h时达到峰值,随后逐渐下降。采用TLR2和TLR4中和抗体封闭THP-1细胞后,TNF-α和IL-8分泌水平明显减少,采用TLR2和TLR4 si RNA干扰其表达后,TNF-α和IL-8的分泌也得到了类似的结果。结论 Cpn0147可能通过TLR2和TLR4介导TNF-α和IL-8分泌。(本文来源于《中南医学科学杂志》期刊2015年06期）
冉欧[7]（2015）在《鹦鹉热嗜衣原体包涵体膜蛋白CPSIT_0846抗感染免疫保护作用》一文中研究指出[目的]研究鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci,Cps)包涵体膜蛋白(Inclusion membrane proteins,Incs)CPSIT_0846的抗感染保护作用,为研制新型、有效和特异的Cps亚单位疫苗奠定基础。[方法]:将Cps 6BC经鼻感染BALB/c小鼠,设置5×104、5×105、5×106IFU叁个剂量组,建立小鼠呼吸道感染模型。将CPSIT_0846蛋白编码基因,经原核表达、HIS树脂纯化后获得重组蛋白。将CPSIT_0846重组蛋白经腹腔注射途径免疫小鼠,末次免疫后15d,ELISA法检测免疫小鼠血清中特异性Ig A、Ig G及Ig G亚类;检测小鼠脾细胞培养上清中的IFN-γ、IL-6等细胞因子产生水平;并经呼吸道感染Cps 6BC,比较免疫组与非免疫组小鼠发病情况、存活率及肺组织病变程度,评价CPSIT_0846的免疫保护作用。[结果]1.5×104、5×105、5×106IFU Cps 6BC经呼吸道感染BALB/c小鼠,小鼠出现不同程度的临床症状及脏器器官的病理改变,并呈明显的剂量依赖关系。根据临床症状、存活率及组织病变程度等指标,确定5×105 IFU为最佳感染剂量。2.将重组蛋白经腹腔注射途径免疫叁次后,小鼠血清中产生高效价的特异性Ig G与Ig A抗体,其中总Ig G效价为1:48000,Ig G1为1:10400,Ig G2a为1:3000,Ig G2b 1:16000,Ig G31:10400,Ig A为1:400,均明显高于对照组(P<0.01)。3.检测各组小鼠脾细胞上清中细胞因子,结果显示,在脾细胞上清中检测到了高浓度的IFN-γ和IL-6,CPSIT_0846免疫组的IFN-γ含量为544.97±80.93 pg/m L,PBS组25.86±12.54 pg/m L、卵清蛋白组32.29±12.77pg/m L,CPSIT_0846组IFN-γ水平与PBS组和卵清蛋白组比较差异有统计学意义(P<0.01);免疫组IL-6含量334.25±34.47pg/m L,PBS组和卵清蛋白组含量分别为27.07±7.55 pg/m L和30.20±7.17 pg/m L,CPSIT_0846组IL-6含量明显高于对照组(P<0.01)。CPSIT_0846免疫组的脾淋巴细胞刺激指数(SI)为2.27,明显高于PBS组和卵清蛋白组刺激指数(P<0.01)。4.CPSIT_0846蛋白免疫组小鼠经Cps呼吸道感染10d后,肺部组织病理改变较轻,而对照组没有明显保护作用。[结论]1.建立了Cps 6BC标准株呼吸道感染BALB/c小鼠的动物模型。2.CPSIT_0846蛋白可使免疫小鼠产生特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,对小鼠抗感染Cps感染具有较好的免疫保护效果。(本文来源于《南华大学》期刊2015-05-01）
童伟,李峥,贾天军[8]（2011）在《肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0147抗原性分析》一文中研究指出目的:在大肠杆菌中表达纯化融合蛋白GST-Cpn0147,研究其免疫原性。方法:将Cpn0147基因克隆到原核表达载体PGEX-6P2,转化入大肠杆菌XL-Blue,经IPTG诱导表达并纯化;以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫血清,ELISA法证实其免疫原性并检测免疫血清的效价,Western-blot检测免疫反应性。结果:在大肠杆菌中表达了GST-Cpn0147融合蛋白,以该蛋白免疫小鼠获得了免疫血清。结论:获得了GST-Cpn0147融合蛋白,并证实其具有免疫原性和免疫反应性。(本文来源于《湖北医药学院学报》期刊2011年06期）
相兴伟,吴小锋[9]（2010）在《昆虫包涵体衍生病毒囊膜蛋白的分子生物学》一文中研究指出了解杆状病毒的囊膜蛋白对揭示病毒入侵、囊膜蛋白核定向转运机制以及研究控制昆虫新策略等方面具有重要意义。目前研究表明,包涵体衍生病毒(occlusion-derived virus,ODV)的囊膜蛋白包括ODV-E25,ODV-E66,ODV-E56,ODV-E18,ODV-E28,P74,PIF1,PIF2,PIF3,GP41,ODV-EC27,ODV-E35,ODV-EC43,BV/ODV-E26,P91和ORF150。本文结合国内外的研究成果系统地综述了囊膜蛋白的结构和功能,其在经口感染、调节细胞周期和囊膜蛋白的传送等方面起作用。囊膜蛋白的核定向转运机制,ODV与昆虫中肠之间和包涵体基质之间相互作用以及ODV结构蛋白之间的相互作用等将是今后的研究重点。(本文来源于《昆虫学报》期刊2010年07期）
童伟[10]（2010）在《肺炎衣原体六种包涵体膜蛋白的原核表达和免疫原性分析》一文中研究指出本课题在对临床肺部疾病人群、心脑血管疾病人群以及健康对照人群进行肺炎衣原体感染的初步流行病学调查基础上,进一步分析已经确定的肺炎衣原体包涵体膜蛋白,即CPn0146、CPn0147、CPn0186、CPn0308、CPn0585和CPn1027在自然人群中的免疫原性,筛选出具有免疫原性的膜蛋白,以期为后期的衣原体的诊断和预防研究奠定基础。根据文献提供信息选择六个编码肺炎衣原体包涵体膜蛋白的基因,使用Expasy和antheprot2000软件对六种基因编码的蛋白进行生物信息学分析。经Expasy分析得出六个基因编码蛋白的分子式,摩尔消光系数,半衰期,溶液中的不稳定系数,脂肪族指数、总亲水性及修饰位点;经Antheprot2000分析获得六个基因编码蛋白的抗原性、疏水性、易溶性、亲水性、跨膜结构和二级结构图。通过比较我们发现选择的六种肺炎衣原体包涵体膜蛋白均具有其特征的疏水性跨膜区域,位于其40-100位氨基酸,由60多个氨基酸组成。收集62例心脑血管疾病、88例肺部疾病患者和24例健康对照人群的血浆标本及PBMC标本,通过间接ELISA检测临床血浆标本中CpnIgG、CpnIgM和CpnIgA叁种肺炎衣原体抗体的水平,并通过PCR扩增PBMC中编码16sRNA的CpnDNA,经四格表资料的?2检验,比较叁组人群中各指标的阳性率。在检测的62例心脑血管疾病病例中,血浆中CpnIgG、CpnIgM、CpnIgA以及PBMC中Cpn DNA的阳性率分别为67.7%、14.5%、61.3%和71.6%,经?2检验,心脑血管疾病人群的CPnIgG、CPnIgA和16SRNA阳性率高于对照组,P<0.05;88例肺部疾患的病例中,血浆中CpnIgG、CpnIgM、CpnIgA以及PBMC中CpnDNA的阳性率分别为50.0%、17.0%、55.6%和82.2%,经?2检验,肺部疾病人群的16SRNA明显高于对照组,P<0.05。说明心脑血管疾病人群的CpnDNA、CPnIgA和CPnIgG阳性率明显高于健康人群,而在肺部疾病人群仅Cpn DNA阳性率明显增高,血清学指标无统计学意义。同时,通过上述指标的检测筛选出肺炎衣原体感染的阳性人群和阴性人群,作为下一步肺炎衣原体包涵体膜蛋白的自然人群中免疫原性分析的标本。用PCR法从CPn菌株AR39基因组中扩增出六个编码包涵体膜蛋白的基因,利用BamHⅠ和NotⅠ进行酶切,用T4连接酶与相同酶切处理后的载体pGEX-6P2连接构建重组质粒,转化入感受体细菌XL1-blue,通过菌落-PCR、交叉-PCR、序列分析和BLAST对阳性克隆进行鉴定,从而获得了六种重组质粒,序列分析显示克隆片段的DNA序列与基因库中的序列比对的一致性均为100%;IPTG诱导表达,经过GlutathioneSepharose TM 4B纯化后,经过SDS-PAGE电泳对表达的融合蛋白进行鉴定,显示条带与预期结果一致。选择表达较好的蛋白充当抗原,使用间接ELISA法测定Cpn感染者血浆中六种包涵体膜蛋白的抗体水平,进一步通过Western-blot确证。间接ELISA结果显示,当血浆稀释度为1:500时,抗CPn0147、CPn0308和CPn0186的抗体仍为阳性,Western-blot分析进一步证实了抗体的特异性。说明六种肺炎衣原体包涵体膜蛋白中,CPn0147、CPn0308和CPn0186在自然人群中具有一定的免疫原性。(本文来源于《河北北方学院》期刊2010-05-01）
包涵体膜蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一种专性细胞内寄生的革兰阴性病原体,在宿主细胞内增殖形成包涵体,通过包涵体与宿主细胞发生相互作用。包涵体膜蛋白(inclusion membrane proteins,Inc蛋白)是一类定位于衣原体包涵体膜上的含独特双叶片状疏水性基序结构的衣原体蛋白。Inc蛋白广泛存在于衣原体属各个种内,每种衣原体既有各自独特的Inc蛋白,又有其关键Inc蛋白同系物,基于生物信息学方法,预测Ct有59个Inc蛋白。Inc蛋白在衣原体与宿主细胞相互作用过程中发挥重要作用。在过去的十年内,鉴定Inc蛋白并对其功能进行研究受到了重视,但对于Inc蛋白的功能仍知之甚少。衣原体基因操控技术的应用,推动了Inc蛋白等衣原体单个蛋白的功能研究。现就Ct Inc蛋白的鉴定及其功能研究进展作一概述。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
包涵体膜蛋白论文参考文献
[1].肖健,王川,吴移谋.衣原体包涵体膜蛋白的结构特征及生物学功能研究进展[J].中国人兽共患病学报.2019
[2].郭芫,陈超群.沙眼衣原体包涵体膜蛋白的研究进展[J].微生物学免疫学进展.2018
[3].马良.肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0308与ACBD3相互作用的鉴定研究[D].河北北方学院.2018
[4].程永婷,贾天军,李萍,贾晓晖,马良.沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体的构建及表达[J].中国病原生物学杂志.2016
[5].李鹏,何君,朱虹,李岩伟,于永慧.鹦鹉热衣原体的B598_0590基因编码包涵体膜蛋白[J].生物技术通讯.2016
[6].吴华,卿文衡,刘军,张黎黎.肺炎嗜衣原体包涵体膜蛋白Cpn0147诱导单核细胞分泌TNF-α和IL-8[J].中南医学科学杂志.2015
[7].冉欧.鹦鹉热嗜衣原体包涵体膜蛋白CPSIT_0846抗感染免疫保护作用[D].南华大学.2015
[8].童伟,李峥,贾天军.肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0147抗原性分析[J].湖北医药学院学报.2011
[9].相兴伟,吴小锋.昆虫包涵体衍生病毒囊膜蛋白的分子生物学[J].昆虫学报.2010
[10].童伟.肺炎衣原体六种包涵体膜蛋白的原核表达和免疫原性分析[D].河北北方学院.2010