胡麻脂氧合酶基因LuLOX1的克隆与表达分析

胡麻脂氧合酶基因LuLOX1的克隆与表达分析

论文摘要

胡麻的籽粒富含多不饱和脂肪酸-亚麻酸,易被脂氧合酶(LOX)氧化,导致油脂的酸败。因此,油脂的稳定性和风味是影响胡麻油质量的重要因素。脂氧合酶是一类非血红素双加氧酶,其催化不饱和脂肪酸如亚油酸和亚麻酸的氢过氧化反应。本研究旨在阐明在胡麻种子发育时期脂氧合酶基因(LuLOX1)的表达、酶活性与品质的关系。本试验利用基于亚麻全基因组DNA测序数据,对LuLOX1基因进行克隆,利用RT-PCR方法进行LuLOX1基因表达分析,采用分光光度计法进行LOX酶活性测定。结果显示,LuLOX1基因的cDNA全长为2 607 bp,编码868个氨基酸,LuLOX1蛋白分子质量和等电点分别为98.87 kD、6.36。LuLOX1在种子发育早期高表达,之后呈下降的趋势,成熟期几乎检测不到该基因的表达。LuLOX1的酶活性变化与LuLOX1基因表达模式一致。该研究结果表明,LuLOX1可能参与了种子发育过程中脂肪酸氧化的调控。本研究为进一步研究其功能,通过脂氧合酶调控改进胡麻油脂品质奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 植物材料
  •   1.2 总RNA的提取与cDNA合成
  •   1.3 LuLOX1基因克隆
  •   1.4 LuLOX1蛋白的生物信息学分析
  •   1.5 LuLOX1基因RT-PCR
  •   1.6 脂氧合酶(LOX)提取与活性测定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 胡麻LuLOX1基因克隆及LuLOX1的序列特征分析
  •   2.2 系统发育树分析
  •   2.3 LuLOX1基因表达和酶活性分析
  •     2.3.1 LuLOX1基因籽粒发育时期的表达模式
  •     2.3.2 籽粒发育时期的LOX酶活性分析
  •     2.3.3 脂氧合酶(LOX)蛋白的SDS-PAGE检测分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 姜晓东,杨建春,韩梅,谢冬微,李新凤,张春来

    关键词: 胡麻,脂氧合酶基因,基因表达,脂氧合酶活性

    来源: 激光生物学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 山西农业大学农学院,山西省农业科学院高寒区作物研究所,黑龙江省农业科学院经济作物研究所

    基金: 山西省基础研究计划项目(201601D202053),山西省重点研发计划项目(201703D221006-3),山西省农谷建设科研专项(SXNGJSKYZX201702)

    分类号: Q78

    页码: 431-438

    总页数: 8

    文件大小: 8101K

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