外泌体双膜蛋白共表达检测平台:基于磁性分离和催化发夹组装

论文摘要

目的构建基于磁性分离和催化发夹组装（CHA）信号放大策略的外泌体双膜蛋白共表达检测平台。方法细胞培养与细胞上清液中外泌体的分离纯化和表征。超分辨成像技术与免疫印迹实验表征CD63在外泌体膜上的表达。外泌体与AptEpCAM-T催发链反应电泳图验证EpCAM适配体与外泌体结合。荧光检测法验证CHA核酸序列的可行性、优化反应条件以及验证该方法特异性。结果超分辨成像技术与免疫印迹实验显示乳腺癌MDA-MB-231细胞来源外泌体富含CD63膜蛋白。外泌体与AptEpCAM-T催发链反应电泳结果显示EpCAM适配体能够识别并结合外泌体。检测平台特异性试验:人正常乳腺上皮细胞外泌体（MCF-10a exo）荧光检测信噪比:1.10±0.01,乳腺癌细胞外泌体（MDA-MB-231 exo）荧光检测信噪比:2.09±0.08。结论构建基于磁性分离和CHA信号放大策略的外泌体双膜蛋白共表达检测平台。可同时检测外泌体膜上表达的两种蛋白:CD63和EpCAM。乳腺癌细胞外泌体与人正常乳腺上皮细胞外泌体膜蛋白CD63和蛋白EpCAM表达有区分度。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈贤华,潘炜伦,李博,郑磊

关键词: 外泌体,膜蛋白,磁性分离,催化发夹组装

来源: 南方医科大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 南方医科大学南方医院检验科,广西医科大学附属柳铁中心医院检验科

基金: 国家自然科学基金青年基金(81702100),广州市健康医疗协同创新重大专项(201604020015),广州市健康医疗协同创新重大专项(201704020213)~~

分类号: R730.43

页码: 1453-1460

总页数: 8

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标签：外泌体论文;  膜蛋白论文;  磁性分离论文;  催化发夹组装论文;