猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及其在免疫组化试验中的初步应用

论文摘要

为制备猪圆环病毒3型（PCV3）Cap蛋白单克隆抗体（MAb）,并初步应用于感染细胞或组织样品中PCV3抗原的间接免疫荧光试验（IFA）或免疫组化（IHC）检测,本研究将PCV3 Cap蛋白的去核定位信号肽基因克隆于原核表达载体pET-28a中,经IPTG诱导表达了具有免疫原性的融合蛋白。以表达的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,共获得8株能够稳定分泌针对PCV3 Cap蛋白的MAb杂交瘤细胞株。Western blot与IFA试验结果显示,8株MAbs均能够与真核表达的重组Cap蛋白反应。选取3株杂交瘤细胞制备3株MAbs,小鼠腹水效价分别为1∶409 600、1∶204 800和1∶409 600。利用3株MAbs对自然感染PCV3临床病猪的腹股沟淋巴结进行IHC检测,结果显示3株MAbs的腹水均能够与感染PCV3的临床样品发生特异性的免疫反应。本研究制备的MAbs具有较好的特异性,为深入研究Cap蛋白的结构和PCV3快速诊断奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵冬,王小波,高清清,郇长超,王万彬,高崧,刘秀梵

关键词: 猪圆环病毒型,蛋白,单克隆抗体,免疫组化

来源: 中国预防兽医学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州大学农业科技发展研究院,扬州大学兽医学院

基金: 江苏现代农业(生猪)产业技术体系疾病防控创新团队(SXGC[2017]231),国家重点研发计划(2016YFD0500704-2),江苏高校优势学科建设工程(PAPD)

分类号: S852.651

页码: 174-178

总页数: 5

文件大小: 1415K

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