导读:本文包含了菊粉酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:菊粉,菌株,酵母,真菌,曲霉,离子束,正交。
菊粉酶论文文献综述
聂山山,韩卓[1]（2019）在《1株产菊粉酶菌株的筛选及发酵条件优化》一文中研究指出研究以透明圈法从菊芋根际土壤中筛选产菊粉酶菌株,通过初筛和复筛,筛选出1株产菊粉酶活力较高的菌株Z-4,经菌落和显微镜观察,初步鉴定为霉菌。通过正交试验优化菌株Z-4的发酵条件,分析不同因素对该菌株产菊粉酶活力的影响,结果表明,菌株Z-4产菊粉酶的最优条件为:以菊粉为唯一碳源,最佳氮源为酵母浸粉、添加量9g/L,培养温度32℃,初始pH6.5,培养时间7d,此时菌株Z-4实际产酶活力达到15.62U/mL。(本文来源于《安徽农学通报》期刊2019年16期）
李龙,苏晓琴,方自安,周峻岗,胡小健[2]（2019）在《马克斯克鲁维酵母外切菊粉酶INU1的晶体结构研究》一文中研究指出菊粉酶是一类能够将菊粉水解成果糖和低聚果糖的酶,它广泛应用于糖浆和果糖的工业生产.为了深入研究菊粉酶的结构与功能特征,我们解析了马克斯克鲁维酵母ATCC12424的外切菊粉酶INU1的晶体结构.通过毕赤酵母SMD1168(his4,pep4)对INU1进行了分泌表达,其体积酶活达到了1 671U/mL.使用阴离子交换柱对INU1进行纯化并结晶解析了结构,INU1的晶体属于空间群I4122,晶胞参数a=b=c=172.65,在上海同步辐射光源其衍射分辨率为2.8,一个非对称单位中有两个INU1分子以面对面方式堆积成二聚体.INU1的晶体结构与GH32(糖苷水解酶32)家族其他蛋白一致,主要由N端保守的5个β螺旋桨结构域和C端不保守的β夹层结构域组成.氨基酸序列和晶体结构对比显示,INU1的催化位点为Asp53,Asp182和Glu238.这个晶体结构为菊粉酶INU1的进一步改造以适应工业化生产提供了基础.(本文来源于《复旦学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
高兆建,王先凤,芦宁,李宝林,张抗震[3]（2019）在《用于高果糖浆制备的宛氏拟青霉嗜热嗜酸菊粉酶酶学特性分析》一文中研究指出为实现酶法水解菊糖制备高果糖浆,从宛氏拟青霉(Paecilomyces variotii)XS27发酵液中分离纯化菊粉酶,并对其酶学特性进行研究。发酵液经过硫酸铵盐析、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow层析、Sephacry S-100分子筛过滤层析,得到电泳纯的菊粉酶,比活力327.4 U/mg,纯化倍数37.85。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳测得菊粉酶为单一亚基的酶蛋白,分子质量62.0 kDa。菊粉酶能在较宽的pH值范围(3.5～6.5)内保持高活性,最适作用pH 4.0。在温度40～65℃之间,酶活力较高,最适作用温度为60℃。薄层色谱分析显示菊粉酶水解菊糖最终产物为果糖。以菊糖为底物,酶的K_m和V_(max)分别为5.93μmol/L和75.18μmol/(L·min)。Mg2+、Mn2+、Ca2+对酶有显着激活作用,Ba2+、Ni2+和Hg2+对酶有一定抑制作用。β-巯基乙醇、二硫苏糖醇和乙二胺四乙酸对酶有抑制作用,表面活性剂(十二烷基硫酸钠、Tween 80和Trition X100)以及乙醇对酶活力没有影响。从宛氏拟青霉XS27发酵液中分离纯化的菊粉酶在强酸高热的环境下具有强活性和稳定性,对表面活性剂乙醇有高耐受性,适合于果葡糖浆的工业化生产。(本文来源于《食品科学》期刊2019年08期）
何丽梅[4]（2018）在《外切菊粉酶的热改性研究》一文中研究指出菊粉富含于菊芋、菊苣等多种菊科植物中,是一种来源丰富的可再生资源。菊粉能被菊粉酶水解,生产果糖或高果糖浆、菊粉寡糖和燃料酒精等产品,在食品、医疗保健、生物能源等方面都有广泛的应用。本文所研究的InuAGN25DVS是一种低温外切菊粉酶。地球总面积的大约75%都属于低温环境,很适合低温酶作用;在低温下的处理可防止营养损失和食品品质降低,酶的生产需要酶具有良好的热稳定性,而低温酶普遍热稳定性差,需要在保证活性的同时提高热稳定性;随着温度降低,酶的催化活性往往降低,需要提高酶在低温下的活性。为了得到热稳定性提高的InuAGN25DVS突变体或者低温活性提高的InuAGN25DVS突变体,本文通过理性设计的方法设计了删除137 EEDRK 141的突变体MutE137Δ5、8点突变的N61E-K156R-P236E-T243K-D268E-T277D-Q390K-R409D Mut8S、删除了InuAGN25DVS N端3个氨基酸—Q23、T24和G25的MutQ23Δ3。将野生酶和突变酶在大肠杆菌中进行异源表达、纯化,切除纯化酶的His标签,并进行酶学性质测定,研究结果如下:1.突变体MutE137Δ5的最适pH为6.0,与野生酶InuAGN25DVS一样;最适温度为35℃,与野生酶相比下降了10℃,在30℃时相对酶活比野生酶增加了约20%,在低温下的活性有了提高。在50℃下保温1小时后野生酶有约65%的相对酶活,而突变体MutE137Δ5有约40%的酶活。2.突变体Mut8S的最适pH为6.5,较野生酶增加了0.5个pH;最适温度为40℃,与野生酶相比下降了5℃;在50℃下保温1小时后野生酶有约65%的相对酶活,而突变体Mut8S的相对酶活基本没变为100%。3.突变体MutQ23Δ3的最适pH为6.0,与野生型酶InuAGN25DVS一样;最适温度是45℃;在50℃下保温1小时后野生酶有约65%的相对酶活,而突变体MutQ23Δ3的相对酶活基本没变为100%。本文通过理性设计的方法得到了1个低温活性提高的外切菊粉酶MutE137Δ5、2个热稳定性提高的外切菊粉酶Mut8S和MutQ23Δ3。本研究提高了低温外切菊粉酶InuAGN25DVS的应用潜能,同时也为糖苷水解酶第32家族外切菊粉酶的热改性及相关适应机理提供依据。(本文来源于《云南师范大学》期刊2018-06-08）
安启坤[5]（2018）在《菊粉酶基因克隆、工程菌构建、表达及应用》一文中研究指出菊粉是由果糖通过β-2,1-糖苷键连接而成的线性直链多糖,末端以α-1,2-糖苷键连接一个葡萄糖残基。菊粉酶能水解β-2,1-糖苷键,其中菊粉内切酶能作用于菊粉内部的β-2,1-糖苷键,产生低聚果糖,菊粉外切酶能从菊粉非还原性末端催化水解产生单糖。本文以菊粉降解菌Paenibacillus sp.Lfos16为出发菌,从其基因组中克隆出两段菊粉酶基因,分别为菊粉酶基因inu-1及菊粉酶基因inu-2。其中inu-1的ORF全长为2274bp,GC%含量为51.67%,编码757个氨基酸,属于糖苷水解酶32家族,与来源于Paenibacillus polymyxa DSM365的糖苷水解酶的具有98%的同源性;inu-2的ORF全长为2265bp,GC%含量为49.49%,编码754个氨基酸,属于糖苷水解酶32家族,与来源于Paenibacillus polymyxa F2的糖苷水解酶具有99%的同源性。分别将inu-1、inu-2重组到表达载体pET-28a(+),并通过大肠杆菌表达宿主E.coli BL21(DE3)进行异源表达。利用组氨酸标签纯化重组酶Inu-1和Inu-2,并对其进行酶学性质的研究。其中重组Inu-1的表观分子量为88kDa,粗酶液比酶活为46.07U/mg,其水解菊粉主要产物为F3,其中以醇沉菊粉为底物的终产物中F3质量分数达到78.5%,因此重组Inu-1为菊粉内切酶。经纯化后,重组Inu-1比酶活为185.16U/mg,纯化倍数达到4.02。重组Inu-1最适作用温度为35oC,且当温度低于45oC时酶活较稳定。最适作用pH为7,且当pH在7-8时菊粉酶保持较高酶活。Ca~(2+)、Mn~(2+)对重组Inu-1有明显的激活作用,而Ag~+、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Hg~(2+)、Fe~(2+)及Fe~(3+)对重组Inu-1具有显着抑制作用。重组Inu-1对醇沉菊粉的V_(max)为0.14mg/(mL·min),K_m为19.91mg/mL。重组Inu-2的表观分子量为87kDa,粗酶液的比酶活为87.43U/mg,且I/S为0.499,水解菊粉的主要产物为果糖,因此重组Inu-2为菊粉外切酶。经纯化后,重组Inu-2比酶活为348.30U/mg,纯化倍数达到3.98。重组Inu-2最适作用温度为40oC,且当温度低于30oC时酶活较稳定;最适作用pH值为6,且当pH在6.6-7.6时菊粉酶保持较高酶活;Mg~(2+)、Ca~(2+)及Fe~(2+)对Inu-2有一定的抑制作用;Ag~+、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Hg~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)对重组Inu-2具有显着抑制作用。重组Inu-2对醇沉菊粉的V_(max)为0.18mg/(mL·min),K_m为19.28mg/mL。(本文来源于《大连工业大学》期刊2018-05-01）
包建莹,刘斌,耿阳,颜日明,张志斌[6]（2018）在《内生真菌Shiraiasp.Slf 14中菊粉酶基因的克隆、表达及包涵体复性》一文中研究指出为了实现内生真菌Shiraia sp.Slf 14菊粉酶基因在大肠杆菌中的高效表达,建立有效的包涵体复性技术,获得有活性的重组菊粉酶,本研究通过提取Shiraia sp.Slf 14的总RNA,反转录合成cDNA,设计PCR引物扩增出菊粉酶基因,将其克隆至pET-22b(+)载体后转入E.coli BL21(DE3),利用SDS-PAGE法检测IPTG诱导表达后重组蛋白的表达情况,并进一步检测了包涵体复性及重组酶酶活情况,最终成功获得了相对分子量为62.07 kD的重组蛋白,成功复性包涵体,复性率为25.23%,重组菊粉酶活力为6.84 U/m L。本研究为活性重组菊粉酶的获得及包涵体复性提供了新的方法和依据。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年04期）
包建莹,刘斌,耿阳,颜日明,张志斌[7]（2018）在《内生真菌Shiraiasp.Slf 14中菊粉酶基因的克隆、表达及包涵体复性》一文中研究指出为了实现内生真菌Shiraia sp.Slf 14菊粉酶基因在大肠杆菌中的高效表达,建立有效的包涵体复性技术,获得有活性的重组菊粉酶,本研究通过提取Shiraia sp.Slf 14的总RNA,反转录合成cDNA,设计PCR引物扩增出菊粉酶基因,将其克隆至pET-22b(+)载体后转入E.coli BL21(DE3),利用SDS-PAGE法检测IPTG诱导表达后重组蛋白的表达情况,并进一步检测了包涵体复性及重组酶酶活情况,最终成功获得了相对分子量为62.07 kD的重组蛋白,成功复性包涵体,复性率为25.23%,重组菊粉酶活力为6.84 U/m L。本研究为活性重组菊粉酶的获得及包涵体复性提供了新的方法和依据。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年04期）
刘燕,任欢欢,马秀梅,徐运飞,张继[8]（2018）在《1株产菊粉酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化》一文中研究指出筛选分离可以分解菊芋中菊糖的菌株。采用平板稀释法从土样中筛选出能够分解菊芋中菊糖的菌株,并从中得到1株酶活较高的真菌A-15,经菌落观察及采用18S rRNA基因测序鉴定,研究不同因素对菌株菊粉酶活力的影响。通过对分离得到的菌株形态观察及分子鉴定后,确定菌株A-15为黑曲霉(Aspergillus niger)。通过正交试验优化菌株A-15的发酵条件分析结果显示,菌株A-15产菊粉酶最优条件:最佳氮源为酵母膏,氮源量1.0%,氯化钠0.5%,磷酸氢二钾0.3%,菊芋汁定容,初始pH 6,培养温度30℃,摇瓶发酵6 d。结果表明菌株A-15具有很好地降解菊芋中菊糖的性能。(本文来源于《微生物学杂志》期刊2018年01期）
赵春海,王志鹏,池振明[9]（2017）在《菊粉酶基因克隆表达与油脂的组分分析》一文中研究指出为了实现解脂亚罗威亚酵母(Yarrowia lipolytica)直接利用菊粉进行油脂生产,将外切菊粉酶基因INU1与表达质粒p INA1317连接,在解脂亚罗威亚酵母(Y.lipolytica)ACA-DC尿嘧啶缺陷突变菌株中表达。以尿嘧啶缺陷型筛选作为筛选标记获得转化子C37,经过培养菊粉酶酶活达到37.15 U/mL。在2 L发酵罐中,转化子C37以菊粉为底物进行发酵,油脂产量和细胞干质量分别为49%和14 g/L。脂肪酸分析结果显示棕榈酸、硬脂酸和油酸总和占总脂肪酸的92%以上,其中油酸含量高达59%,表明通过菊粉酶基因在解脂亚罗威亚酵母中的表达,实现了以菊粉为底物一步发酵产单细胞油脂。(本文来源于《中国酿造》期刊2017年12期）
曹泽虹,董玉玮,王陶,高兆建,袁航[10]（2017）在《低能离子束诱变选育高产内切型菊粉酶菌株》一文中研究指出从18株黑曲霉菌株中,筛选得到产内切型菊粉酶酶活最高的一株菌株,编号为08013,酶活为3.01U/mL。用低能离子束N~+对选育出的黑曲霉菌株进行诱变研究,当N~+注入能量为10Kev,注入靶室的真空度为10~(-3)Pa,脉冲剂量为10~(14) N~+/cm~2s,N~+注入剂量为60×2.6×10~(13)N~+/cm~2时,筛选出一株内切型菊粉酶酶活最高的菌株,编号为08-DT-60-09,酶活为4.20 U/mL,比出发菌株的酶活提高了39.53%。(本文来源于《中国食品添加剂》期刊2017年12期）
菊粉酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
菊粉酶是一类能够将菊粉水解成果糖和低聚果糖的酶,它广泛应用于糖浆和果糖的工业生产.为了深入研究菊粉酶的结构与功能特征,我们解析了马克斯克鲁维酵母ATCC12424的外切菊粉酶INU1的晶体结构.通过毕赤酵母SMD1168(his4,pep4)对INU1进行了分泌表达,其体积酶活达到了1 671U/mL.使用阴离子交换柱对INU1进行纯化并结晶解析了结构,INU1的晶体属于空间群I4122,晶胞参数a=b=c=172.65,在上海同步辐射光源其衍射分辨率为2.8,一个非对称单位中有两个INU1分子以面对面方式堆积成二聚体.INU1的晶体结构与GH32(糖苷水解酶32)家族其他蛋白一致,主要由N端保守的5个β螺旋桨结构域和C端不保守的β夹层结构域组成.氨基酸序列和晶体结构对比显示,INU1的催化位点为Asp53,Asp182和Glu238.这个晶体结构为菊粉酶INU1的进一步改造以适应工业化生产提供了基础.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
菊粉酶论文参考文献
[1].聂山山,韩卓.1株产菊粉酶菌株的筛选及发酵条件优化[J].安徽农学通报.2019
[2].李龙,苏晓琴,方自安,周峻岗,胡小健.马克斯克鲁维酵母外切菊粉酶INU1的晶体结构研究[J].复旦学报(自然科学版).2019
[3].高兆建,王先凤,芦宁,李宝林,张抗震.用于高果糖浆制备的宛氏拟青霉嗜热嗜酸菊粉酶酶学特性分析[J].食品科学.2019
[4].何丽梅.外切菊粉酶的热改性研究[D].云南师范大学.2018
[5].安启坤.菊粉酶基因克隆、工程菌构建、表达及应用[D].大连工业大学.2018
[6].包建莹,刘斌,耿阳,颜日明,张志斌.内生真菌Shiraiasp.Slf14中菊粉酶基因的克隆、表达及包涵体复性[J].基因组学与应用生物学.2018
[7].包建莹,刘斌,耿阳,颜日明,张志斌.内生真菌Shiraiasp.Slf14中菊粉酶基因的克隆、表达及包涵体复性[J].基因组学与应用生物学.2018
[8].刘燕,任欢欢,马秀梅,徐运飞,张继.1株产菊粉酶菌株的筛选、鉴定及发酵条件优化[J].微生物学杂志.2018
[9].赵春海,王志鹏,池振明.菊粉酶基因克隆表达与油脂的组分分析[J].中国酿造.2017
[10].曹泽虹,董玉玮,王陶,高兆建,袁航.低能离子束诱变选育高产内切型菊粉酶菌株[J].中国食品添加剂.2017
论文知识图
