用于细胞水平家蚕转录调控元件研究的简单基础启动子的构建

论文摘要

【目的】本研究致力于构建一种能够在家蚕Bombyx mori细胞水平稳定表达的简单基础启动子,从而更准确地反映单一转录调控元件对基因启动子活性的影响,为研究家蚕乃至其他昆虫的基因转录调控奠定基础。【方法】本研究在本课题组已报道的能在家蚕细胞中稳定表达且基本不含上游转录调控元件的BmVgP78M启动子的基础上,通过PCR技术在其上游添加一定长度的间隔序列和能够应答20-羟基蜕皮激素（20E）且增强启动子活性的BrC-Z2转录因子结合基序（BrC-Z2 element, BrC-Z2E）;通过基因克隆技术构建细胞转染载体;通过细胞转染技术和双荧光素酶报告基因系统检测启动子活性的变化。【结果】通过在BmVgP78M启动子上游添加28 bp间隔序列,成功构建了一个简单基础启动子,命名为VgP78ML,并证明其为可用于研究目标转录调控元件的简单基础启动子。经实验验证表明,该简单基础启动子不仅可以在家蚕细胞中稳定表达,且其本身活性不受20E及转录因子BrC-Z2的影响;当该启动子上游连接BrC-Z2E时,可以显著地应答20E及BrC-Z2转录因子,从而调控报告基因的表达。【结论】VgP78ML能够作为简单基础启动子应用于细胞水平对家蚕基因转录调控进行研究。同时,其构建方法也为其他物种构建研究转录调控的简单基础启动子提供了参考。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 顾健健,刘红玲,李凯荣,孟紫旺,王慧娟,沈关望,张宇靖,阮杨,林英,夏庆友

关键词: 家蚕,细胞,简单基础启动子,双荧光素酶报告基因系统,转录调控,转录元件

来源: 昆虫学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学

单位: 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室,蚕桑学重庆市重点实验室,西南大学生物技术学院

基金: 国家自然科学基金重点项目(31530071),国家自然科学基金项目(3147254),中央高校基本科研业务费(XDJK2017B006)

分类号: Q963

DOI: 10.16380/j.kcxb.2019.04.001

页码: 391-397

总页数: 7

文件大小: 1325K

下载量: 115

相关论文文献

• [1].转录调控网络模块和模体识别算法研究进展[J]. 计算机应用研究 2012(11)
• [2].酿酒酵母转录调控位点生物信息学研究进展[J]. 生物技术世界 2013(03)
• [3].全局转录调控及其在代谢工程中的应用[J]. 生物技术通讯 2009(05)
• [4].预测转录调控模块的数学模型[J]. 中山大学学报(医学科学版) 2009(S1)
• [5].预测转录调控模块的数学模型[J]. 中山大学学报(医学科学版) 2009(S3)
• [6].整合素β6基因在HepG2细胞中主要转录调控区的定位分析[J]. 中华普通外科学文献(电子版) 2013(02)
• [7].利用比较基因组学方法预测短小芽孢杆菌转录调控网络[J]. 四川大学学报(自然科学版) 2012(01)
• [8].肿瘤相关基因转录调控蛋白的识别与研究进展[J]. 中国实验诊断学 2010(04)
• [9].肝脏特异性转录调控序列的研究进展[J]. 生物医学工程学杂志 2009(02)
• [10].酵母转录调控协作网络的分析(英文)[J]. 生物化学与生物物理进展 2008(01)
• [11].基于组合模型的转录调控网络构建算法研究[J]. 计算机科学与探索 2018(07)
• [12].基因组转录调控元件分析方法研究进展[J]. 生物技术通报 2014(10)
• [13].基因非编码区与转录调控元件的识别研究[J]. 生物信息学 2008(04)
• [14].下一代测序技术在干细胞转录调控研究中的应用[J]. 遗传 2017(08)
• [15].植物冷驯化转录调控的影响因素[J]. 黑龙江农业科学 2019(04)
• [16].植物萜烯类合成的转录调控研究进展[J]. 山西农业科学 2020(10)
• [17].Visfatin基因的转录调控及糖异生的调控作用[J]. 畜牧与兽医 2012(S1)
• [18].嗜水气单胞菌转录调控蛋白基因的克隆与序列分析[J]. 生物技术通报 2014(07)
• [19].中国科学院植物研究科研人员揭示叶绿体基因转录调控的新机制[J]. 蔬菜 2019(06)
• [20].植物对非生物逆境响应的转录调控和代谢谱分析的研究进展[J]. 植物生理学报 2011(05)
• [21].一个功能丰富的转录调控分子——下游调控元件拮抗分子[J]. 生理学报 2017(05)
• [22].基于矩阵分解技术的系统性红斑狼疮转录调控网络构建[J]. 河北师范大学学报(自然科学版) 2016(02)
• [23].Lennox-Gastaut综合征相关致病基因研究进展[J]. 山东医药 2020(20)
• [24].基于转录调控元件设计的高级生物化学实验教学[J]. 实验室研究与探索 2019(11)
• [25].LncRNA HOTAIR在肿瘤中转录调控及作用机制的研究进展[J]. 医学综述 2019(09)
• [26].猪MITF-M的转录调控分析[J]. 畜牧兽医学报 2018(11)
• [27].COBRA框架在转录调控、转录翻译和信号传导网络上的应用研究[J]. 计算机应用与软件 2011(11)
• [28].北极狐MITF-M基因启动子活性及转录调控元件的分析[J]. 中国兽医学报 2020(10)
• [29].Foxp3转录调控的研究进展[J]. 中国病原生物学杂志 2016(05)
• [30].真菌次级代谢转录调控研究进展[J]. 菌物研究 2019(03)

标签：家蚕论文;  细胞论文;  简单基础启动子论文;  双荧光素酶报告基因系统论文;  转录调控论文;  转录元件论文;