导读:本文包含了重组鲑鱼降钙素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:鲑鱼降钙素,转基因酵母,喷雾干燥,结肠黏附
重组鲑鱼降钙素论文文献综述
宋益民,范鸣浩,杨青,张学成[1]（2014）在《重组鲑鱼降钙素结肠黏附缓释微球的制备》一文中研究指出为考察重组(酵母)鲑鱼降钙素结肠黏附缓释微球的制备工艺和最优处方,并对释药特性进行探讨。以阿拉伯胶、β-环糊精、可溶性淀粉、明胶为壁材,HPMC和卡波姆为生物黏附剂,运用正交试验确定喷雾干燥法制备微球的最佳工艺条件和处方。结果表明,微球的最佳制备工艺和处方为β-环糊精与阿拉伯胶以15∶1、HPMC与CP以4∶1配比为理想壁材,喷雾干燥进风温度160℃、进料速度10mL·min-1、雾化压力0.5MPa、壁材浓度15%、芯材比1∶3为最佳组合,所得微球能达到缓释12h的试验设计要求。本法工艺稳定、可行,所得鲑鱼降钙素结肠黏附缓释微球具有良好的缓释效果。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2014年01期）
余琼,赵丽华,李洪丽,张巍,梁利恒[2]（2012）在《IPTG诱导浓度、时间及温度对重组鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因表达的影响》一文中研究指出以重组鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因pGEX(CGRP/msCT)的工程菌为研究对象,利用IPTG作为诱导剂,分析比较在不同IPTG诱导条件下融合基因表达的效果,确定最佳IPTG诱导条件。结果表明∶在IPTG终浓度为0.2 mmol.L-1,诱导温度为37℃,诱导时间为5 h的条件下,该融合蛋白的表达量最大。利用光密度扫描对表达产物进行初步定量的结果表明,目的蛋白约占菌体总蛋白的32.11%。(本文来源于《黑龙江大学自然科学学报》期刊2012年02期）
余琼,平文祥,宋永,李洪丽,梁利恒[3]（2009）在《重组鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因分子设计及大肠杆菌表达载体构建》一文中研究指出[目的]:为了获得一种能同时对高血压和骨质疏松两种疾病有治疗作用的融合蛋白。[方法]:根据大肠杆菌偏爱密码子原则,采用基因工程的方法设计并合成了重组降钙素基因相关肽与鲑鱼降钙素融合基因,并将该基因克隆到pGEX-6P-1表达载体上,将重组质粒转化到BL21中表达。[结果]:通过DNA测序验证目的基因被正确克隆到pGEX-6P-1上。[结论]:大肠杆菌表达载体构建成功。(本文来源于《食品工业科技》期刊2009年08期）
姜勇,张学成,孙平楠,陈云松[4]（2009）在《以rDNA为同源重组位点酵母表达鲑鱼降钙素基因多拷贝整合载体的构建》一文中研究指出根据酵母整合质粒的设计要求,PCR扩增2.2 kb rDNA片段,导入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)整合载体pYD1中,设计并合成适合在酵母中表达的鲑鱼降钙素(Salmon Calcitonin),以此为目标基因,构建适合酿酒酵母多拷贝整合的表达载体p-r-sCT。通过载体p-r-sCT引入到酿酒酵母菌株EBY100中,得到酵母重组菌株yAGA2-r-sCT。流式细胞检测结果表明,目标基因鲑鱼降钙素在重组菌株的yAGA2-r-sCT中得到了表达,实现了外源基因在酿酒酵母菌株中的稳定表达。(本文来源于《中国海洋大学学报(自然科学版)》期刊2009年03期）
孙平楠,周小玲,张学成,梁冰[5]（2009）在《载鲑鱼降钙素新型重组酿酒酵母的降血钙活性研究》一文中研究指出目的研究表达鲑鱼降钙素(sCT)基因的表面展示型酿酒酵母经口服给药后对Wistar大鼠血清钙含量的影响。方法鲑鱼降钙素基因克隆到表面展示型载体pYD1,LiAC法转化酿酒酵母EBY100菌株后获得转化子yAGA2-sCT。在荧光显微镜下检测FITC标记的转基因酵母重组鲑鱼降钙素的表达情况。载鲑鱼降钙素重组酿酒酵母经冷冻干燥处理后分别以0.1、0.5g/kg和5g/kg浓度灌喂Wistar大鼠,分别列入低、中、高剂量实验组(n=6);另设阳性药物组(皮下注射200mU/kg的密钙息,n=6))和2个条件对照组(分别灌喂5g/kg冷冻干燥的yAGA2-V5菌株和30μg/kg的密钙息,n=6)。眼球丛静脉毛细采血管取血后测定血钙值。结果荧光显微镜下观察到重组酿酒酵母yAGA2-sCT成功表达了sCT蛋白。载鲑鱼降钙素重组酿酒酵母对大鼠的降血钙活性呈现剂量效应,实验组3个不同剂量的亚组中,高剂量组5g/kg载鲑鱼降钙素酵母yAGA2-sCT的降血钙活性最为显着(P<0.01),且在第2h时降血钙效应达到最大。口服5g/kg的yAGA2-sCT的高剂量组在2h之后,大鼠血钙值从2.685±0.023mmol/L降低到2.355±0.012mmol/L。结论5g/kg的载鲑鱼降钙素酵母yAGA2-sCT能明显降低血钙值,是实现鲑鱼降钙素口服的一种可能的新途径。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2009年03期）
刘栋,言湛军,沈忆新,郝剑,毛路[6]（2008）在《重组鲑鱼降钙素对突然制动所致急性骨丢失的防治作用》一文中研究指出目的观察基因重组鲑鱼降钙素对突然制动所致急性骨丢失的防治效果。方法将44例需长期制动患者随机分成两组:实验组22例,予以基因重组鲑鱼降钙素肌肉注射,50 IU,每天1次;对照组22例,予以化学合成鲑鱼降钙素皮下注射,50 IU,每天1次。疗程均为2周。两组患者都同时加服钙尔奇D,每天600 mg,顿服。用药前及用药后7、15 d分别测定血清Ⅰ型胶原羧基交联肽(CTx)、血清骨碱性磷酸酶(BALP)、尿脱氧吡啶/尿肌酐(DPD/Cr)等指标。结果治疗后15 d,重组鲑鱼降钙素组与合成鲑鱼降钙素组治疗前后各指标(CTx、BALP、DPD/Cr)差值经等效检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基因重组鲑鱼降钙素对突然制动所致急性骨丢失具有预防和治疗作用,且其疗效优于化学合成鲑鱼降钙素。(本文来源于《苏州大学学报(医学版)》期刊2008年03期）
付海云[7]（2006）在《重组鲑鱼降钙素生产工艺研究》一文中研究指出本研究的主要内容是从原始工程菌建立高效表达重组鲑鱼降钙素融合蛋白的基因工程大肠杆菌生产种子库；对工程菌发酵、表达产物的纯化及体外修饰工艺进行系统研究，建立一套适合中试规模生产的重组鲑鱼降钙素生产工艺。首先，以原始工程菌建立了生产用种子库，经验证种子库的基因型为：gal~-，met~-，mal~+，λS，与原始菌种一致；菌种具备卡那霉素抗性。为了实现菌体细胞的高密度培养及产物的高效表达，通过实验选择了适合的培养基，建立了接种量、pH、溶氧、诱导剂浓度、诱导时机、诱导后发酵时间等一系列发酵条件。在40L发酵罐(20L发酵体积)下，最佳发酵和诱导表达条件为接种量5～10％，溶氧大于40％，pH为7.0，诱导剂IPTG浓度0.150 mmol／L，对数生长期后期诱导培养4小时。在此条件下，融合蛋白GST-rsCT-Gly表达量可达到4.87g／l。利用亲和吸附技术，采用固定了谷胱甘肽的琼脂糖凝胶颗粒对菌体细胞匀浆液中的融合蛋白进行吸附和洗脱，快速纯化和浓缩了目的产物。为了防止肽链的侧基在裂解过程中断裂，在对初步纯化的融合蛋白GST-rsCT-Gly进行化学裂解前进行了磺化和浓缩。之后，以CNBr对融合蛋白进行裂解，得到了SO_3-rsCT-Gly。体外C末端酰胺化是重组鲑鱼降钙素制备的关键所在，本研究利用α-酰胺化酶对裂解产物C末端的甘氨酸残基进行酰胺化转化。在此之前，以离子交换层析法去除裂解后残留的SO_3-GST和CNBr，以反相液相层析法脱盐。SO_3-rsCT-Gly在α-酰胺化酶的作用下转化为C末端为脯氨酰胺的与天然鲑鱼降钙素一致的rsCT。经过复性后，在肽链分子1位和7位的半胱氨酸间形成二硫键，rsCT获得全部生物活性。为了进一步去除产物中的杂质和潜在污染物，我们采用阳离子交换层析、反相液相层析等一系列纯化方法对rsCT进行高度纯化，最终rsCT纯度达到98％以上。最后经冷冻干燥获得了高纯度rsCT冻干粉。总之，通过本研究，我们建立了rsCT发酵、纯化及化学修饰工艺，rsCT总产量达到30～50mg／L，为大规模工业化生产和临床应用打下了坚实的基础。(本文来源于《沈阳药科大学》期刊2006-05-01）
付海云,王红权,何建勇[8]（2006）在《重组鲑鱼降钙素融合蛋白工程菌发酵工艺研究》一文中研究指出为研究大肠杆菌表达重组鲑鱼降钙素融合蛋白(GST-sCT-Gly)工程菌的发酵工艺,采用瑞士比欧生物工程公司40 L发酵罐发酵,对影响工程菌生长和目的蛋白的表达条件进行优化;在优化条件下,以40 L发酵罐发酵工程菌,菌体收获量可达到57 g/L,目的蛋白表达量占总蛋白的23.5%;结果表明,研究确定的发酵工艺可以提高工程菌收获量及目的蛋白的表达量,且稳定可靠,可应用于生产。(本文来源于《河北科技大学学报》期刊2006年01期）
黄迎春,何璧梅,张义正,王欣荣[9]（2003）在《鲑鱼降钙素串联基因的克隆、表达及重组蛋白的生物学活性》一文中研究指出目的 :将鲑鱼降钙素 (salmoncalcitonin,sCT)基因以同向串联方式连接 ,构建串联多拷贝基因的表达质粒pHis-nCT(n≤3) ,并在原核中表达 ,研究表达产物的降钙活性。方法 :采用半化学半酶促法合成sCT基因 ,利用基因的特点及特殊的酶切位点NdeI和SamI在表达载体pTrcHisC中进行sCT基因与载体基因的融合及sCT基因的串联 ,并在TOP10中表达串联多拷贝基因。表达产物形成包含体 ,对包含体变性、复性后 ,以Ni-ChelatingSepharose亲和纯化。用血清钙浓度测定法研究串联表达产物及裂解产物的降钙活性。结果 :重组菌表达的串联融合蛋白经过变性、复性及亲合层析 ,纯度达到 90 %以上。活性试验表明 ,串联融合蛋白及其裂解产物可以抑制破骨细胞 ,降低血清钙浓度 ,且呈剂量效应关系。结论 :原核表达质粒pTrcHisC可以有效表达串联的sCT基因 ,重组的串联蛋白及裂解产物均有降钙活性。(本文来源于《生物技术》期刊2003年06期）
刘颖,王正坤,梁东春,郭刚,张镜宇[10]（2003）在《鲑鱼降钙素重组杆状病毒载体的构建及表达》一文中研究指出目的 利用昆虫细胞杆状病毒系统表达重组鲑鱼降钙素 (recombinantsalmonCalcitonin ,rsCT) ,探索一条真核生物表达生物活性rsCT的新途径。方法 将鲑鱼降钙素基因重组到 pFastBac杆状病毒穿梭载体(baculovirusshuttlevector,Bacmid)中 ,构建重组鲑鱼降钙素杆状病毒表达载体即重组鲑鱼降钙素Bacmid ,后将其转染昆虫细胞Sf9,表达目的蛋白 ,并对表达产物进行分子量及免疫反应性鉴定。结果 证实目的基因在昆虫细胞中获得了表达。结论 成功构建了鲑鱼降钙素重组杆状病毒载体并在昆虫细胞中初步表达(本文来源于《现代口腔医学杂志》期刊2003年01期）
重组鲑鱼降钙素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以重组鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因pGEX(CGRP/msCT)的工程菌为研究对象,利用IPTG作为诱导剂,分析比较在不同IPTG诱导条件下融合基因表达的效果,确定最佳IPTG诱导条件。结果表明∶在IPTG终浓度为0.2 mmol.L-1,诱导温度为37℃,诱导时间为5 h的条件下,该融合蛋白的表达量最大。利用光密度扫描对表达产物进行初步定量的结果表明,目的蛋白约占菌体总蛋白的32.11%。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组鲑鱼降钙素论文参考文献
[1].宋益民,范鸣浩,杨青,张学成.重组鲑鱼降钙素结肠黏附缓释微球的制备[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2014
[2].余琼,赵丽华,李洪丽,张巍,梁利恒.IPTG诱导浓度、时间及温度对重组鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因表达的影响[J].黑龙江大学自然科学学报.2012
[3].余琼,平文祥,宋永,李洪丽,梁利恒.重组鲑鱼降钙素与降钙素基因相关肽融合基因分子设计及大肠杆菌表达载体构建[J].食品工业科技.2009
[4].姜勇,张学成,孙平楠,陈云松.以rDNA为同源重组位点酵母表达鲑鱼降钙素基因多拷贝整合载体的构建[J].中国海洋大学学报(自然科学版).2009
[5].孙平楠,周小玲,张学成,梁冰.载鲑鱼降钙素新型重组酿酒酵母的降血钙活性研究[J].解放军医学杂志.2009
[6].刘栋,言湛军,沈忆新,郝剑,毛路.重组鲑鱼降钙素对突然制动所致急性骨丢失的防治作用[J].苏州大学学报(医学版).2008
[7].付海云.重组鲑鱼降钙素生产工艺研究[D].沈阳药科大学.2006
[8].付海云,王红权,何建勇.重组鲑鱼降钙素融合蛋白工程菌发酵工艺研究[J].河北科技大学学报.2006
[9].黄迎春,何璧梅,张义正,王欣荣.鲑鱼降钙素串联基因的克隆、表达及重组蛋白的生物学活性[J].生物技术.2003
[10].刘颖,王正坤,梁东春,郭刚,张镜宇.鲑鱼降钙素重组杆状病毒载体的构建及表达[J].现代口腔医学杂志.2003