丹参酮ⅡA通过激活SIRT1/eNOS通路减轻过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞衰老

丹参酮ⅡA通过激活SIRT1/eNOS通路减轻过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞衰老

论文摘要

目的探讨丹参酮ⅡA(TSA)对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞衰老的作用及其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC), H2O2处理诱导细胞衰老, TSA预处理24 h,分为对照组、模型组和TSA组。CCK-8法检测细胞活力, Western blot法检测细胞内细胞衰老相关蛋白(P21和P26)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷酸化eNOS(p-eNOS)蛋白水平,β-半乳糖苷酶染色来评估细胞衰老;转染SIRT1 siRNA敲低SIRT1的表达,检测TSA处理后细胞衰老水平的变化。结果 (10、 20、 40)μg/mL的TSA预处理24 h不影响细胞活力,而(80、 160、 320)μg/mLTSA预处理的细胞活力下降。(10、 20、 40)μg/mL的TSA可成剂量依赖性促进H2O2介导的HUVEC活力。与对照组比较,模型组β-半乳糖苷酶染色阳性率增加,而TSA组阳性率较模型组明显降低。模型组P21和P16蛋白表达量较对照组增加,而SIRT1和p-eNOS/eNOS较对照组降低; TSA组P21和P16蛋白表达量较模型组降低, SIRT1和p-eNOS/eNOS较模型组增加。转染SIRT1 siRNA的细胞内SIRT1水平明显降低,敲低SIRT1的TSA处理组β-半乳糖苷酶染色阳性率增加。结论 TSA通过激活SIRT1/eNOS通路减轻H2O2诱导的血管内皮细胞衰老。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养和siRNA转染
  •     1.2.2 细胞处理和分组
  •     1.2.3 SA-β-gal染色检测HUVEC衰老情况
  •     1.2.4 CCK-8法检测HUVEC的增殖
  •     1.2.5 Western blot法检测HUVEC的P21、 P16、 p-eNOS、 eNOS、 SIRT1蛋白水平
  •     1.2.6 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 TSA对促进H2O2诱导的内皮细胞活力的影响
  •   2.2 TSA抑制H2O2诱导的内皮细胞衰老
  •   2.3 TSA通过激活SIRT1抑制H2O2诱导的内皮细胞衰老
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 肖新怀,徐米清,方燕龄

    关键词: 细胞衰老,过氧化氢,丹参酮,沉默信息调节因子

    来源: 细胞与分子免疫学杂志 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 广州医科大学附属第二医院老年内科

    基金: 广东省科技计划项目(2017ZC0246)

    分类号: R285

    DOI: 10.13423/j.cnki.cjcmi.008905

    页码: 806-811

    总页数: 6

    文件大小: 1566K

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