半定量杂交论文-仇丽红,史宏灿,钱建军,陈建民

半定量杂交论文-仇丽红,史宏灿,钱建军,陈建民

导读:本文包含了半定量杂交论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:FISH,基因组半定量法,c-erbB-2,乳腺癌

半定量杂交论文文献综述

仇丽红,史宏灿,钱建军,陈建民[1](2007)在《荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c-erbB-2基因扩增》一文中研究指出目的利用荧光原位杂交(FISH)与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织,抽提收集样品基因组DNA并扩增c-erbB-2的特异序列构建转化子,以c-erbB-2的特异序列为探针进行间期核FISH检测乳腺肿瘤组织中c-erbB-2基因的扩增,并采用基因组半定量法比较不同组别乳腺组织中c-erbB-2基因的扩增。结果FISH检测发现正常乳腺组织中未出现c-erbB-2扩增,而良性与恶性组织中有不同程度的扩增,基因组半定量分析显示恶性肿瘤组织中c-erbB-2扩增程度高于良性与正常组织。结论c-erbB-2扩增是乳腺癌变的可靠的分子指标。可用荧光原位杂交与基因组半定量法对乳腺癌进行分子生物学诊断,且前者的敏感性与稳定性优于后者。(本文来源于《实用临床医药杂志》期刊2007年11期)

张黎明,朱珊珊,李素珍,吕建新[2](2003)在《核酸夹心杂交法半定量检测人IL-1α mRNA》一文中研究指出目的 建立一种半定量检测人外周血单个核细胞 (PBMC)表达IL 1αmRNA的方法。方法 确定RT PCR反应体系及扩增循环的各项参数 ,确定酶联夹心杂交反应所需的试剂、试剂的配制及杂交反应的温度、时间。选择最适数量的PBMC进行RT PCR并用核酸夹心杂交法检测扩增产物。结果 本方法检测IL 1αmRNA的灵敏度明显高于RT PCR琼脂糖凝胶电泳 ;无非特异性阳性信号出现 ,重复性良好 ,操作简便。结论 本方法是一种较好的定量检测IL 1αmRNA的方法 ,操作简便适合临床实验室(本文来源于《临床检验杂志》期刊2003年04期)

武军[3](2003)在《HBV、DNA斑点杂交半定量分析之探讨》一文中研究指出检出HBVDNA是乙型肝炎病毒在体内感染及病毒复制的直接证据。我们利用斑点杂交法定性试剂对乙肝患者血清中HBVDNA的含量进行半定量检测 ,为临床了解病毒复制及转归 ,评估疗效提供较为科学的依据。1 材料与方法1 .1 材 料1 .1 .1 标本收集 :(本文来源于《河北医学》期刊2003年05期)

邹立林,吕建新[4](2003)在《逆转录-聚合酶链反应酶联夹心杂交法半定量检测人白细胞介素-6 m RNA》一文中研究指出白细胞介素 6 (Ⅱ 6 )mRNA的表达高低 ,与临床疾病有极为密切的关系。目前定量检测IL 6mRNA主要采用实时聚合酶链反应 (PCR)方法 ,但该方法需要实时PCR仪和昂贵的荧光标记探针[1] 。本研究建立的逆转录 (RT)PCR 酶联夹心杂交(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2003年01期)

何建国[5](2002)在《喉癌组织HPV16/18DNA非同位素原位杂交半定量研究》一文中研究指出研究发现HPVs与人类多种癌发生相关,特别是HPV16、18型,有学者将之称为“高危型”肿瘤病毒。目前,除宫颈癌外,HPVs与喉癌的关系也已受到重视。 多种实验手段研究证实,HPV16/18-DNA可在喉癌组织检出,但是HPV16/18感染在喉癌发生机制中的作用仍未阐明,本文采用非同位素原位杂交和显微图像分析技术,对喉癌组织HPV16/18-DNA杂交信号进行形态学定位和量化,结合免疫组化染色和图像分析测得的增殖细胞核抗原(PCNA)和突变型p53蛋白表达水平,进行相关性分析,讨论HPV感染与喉癌组织的增殖活性和恶性程度的量化关系。 一、材料和方法 收集63例喉癌手术切除石蜡包埋标本,另取声带息肉标本42例作为对照,所有标本均经病理学诊断证实。l)将石蜡包埋标本sw连续切片,每例切取4片,分别作非同位素原位l 杂交、阴性对照、以及p53和 PCNA免疫组化实验。 l、原位杂交:(ISH) 石蜡切片 73℃烤片过夜,脱蜡后,加入 0℃新鲜配制的 IX蛋白酶 K 和DNAjRNA酶稀释缓冲液消化,然后加入HPV16/18生物素核酸探针在 95℃水中变性 10分钟,放入冰水中防止复性 15分钟,之后置入 sthe甲酷 胺湿盒 37℃温箱中杂交过夜,杂交过夜的玻片分次滴加 IX和 ZX封闭蛋白 液5分钟,然后加入生物素抗体及BCIPWBT显色。 2、免疫组化SI方法 切片脱蜡后依次滴加过氧化酶阻断剂、Ich非免疫血清、P53-Ah-2 pCNA-pC10鼠单克隆抗体、生物素标记的第二抗体、链霉素蛋白一过氧化 酶溶液,最后加新鲜配置的DAB溶液显色。 3、所有标本均行显微图像分析 二、结 果 显微镜下 HPV 6/l非同位素原位杂交阳性信号位于细胞核内,为深蓝 色,呈斑块状分布。喉癌组织HPV16/18-DNA杂交阳性率明显高于声带息 肉组织,见表1。经卡方检验,有统计学卜显着性差异(f叫4m,p<0阴1)。 表IHPV16/18DNA原位杂交阳性率 组织标本 例数 阳性例数 阳性率 喉 癌 63 23 3650O/ 声带息肉42 2 476% 63例喉癌中,病理分化程度不同的标本阳性率、阳性细胞数和阳性面 2 积见表 2。高分化喉癌组 HPV 6/l-DNA阳性细胞数和面积均高于中低分 化喉癌组(。25750,尸<0001;u=25700,尸<0001)。 表2 HPV16/18-DNA阳性细胞数和面积与喉癌分化程度-,、,,一—_.._HPV阳性 细胞数 面积’分化程度 例数“二二、二’广—— ~‘-’——…一 例数(%)中位数 四分位数 中位数 四分位数 高分化 35 2叮57)2640 00O-9720 050 000-326 中、低分化28 3(107) 000 000-000 00 000-000 HPV16/18-DNA阳性组的PCNA阳性细胞数和阳性面积均明显高于 HPV16/18-DNA阴性组(u=27300 p<001;。,25750 p<00OI),见 表3。 表3 喉癌组织HPV16/8-DNA和PCNA半定量 PCNA阳性细胞数PCNA阳性面积 原位杂交 例数—— 中位数 四分位数 中位数 四分位数 HP\’阳性23 9320 2320-12200 330 067-504 HPV阴性 4O 3 760 000-7570 098 00-2.81 HP\’阳性组的p53阳性细胞数和阳性面积均高于WhV16/18-DNA阴性 组…,2门m 厂<0m1;I,刀05o p<0皿1),见表4。 3 表4 喉癌组织HPV16/18-DNA和p53半定量 p53阳性细胞数p53阳性面积 原位杂交 例数—— 中位数 四分位数 中位数 四分位数 HPV阳性 23 126.80 0.00-168.00 3.82 0.0-5.75 HI,V阴性 40 15.20 0.00-65.40 0.37 0.o(本文来源于《浙江大学》期刊2002-05-01)

张德华,傅松滨[6](1998)在《一种敏感、快速和半定量的适于双杂交体系统的LacZ分析法》一文中研究指出一种敏感、快速和半定量的适于双杂交体系统的LacZ分析法本文提供一种方便的程序用来对以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷为底物酵母细胞中LacZ活性进行可靠的比较。这种方法一个成功的例证是蛋白—蛋白相作用与酵母双杂交系统之间的调节。最近几年中...(本文来源于《国外医学.遗传学分册》期刊1998年02期)

杨晓林,王申五,郭乃榄,陆道培,王虹[7](1995)在《PCR与半定量分子杂交法检测骨髓移植受者巨细胞病毒病》一文中研究指出PCR与半定量分子杂交法检测骨髓移植受者巨细胞病毒病杨晓林,王申五,郭乃榄,陆道培,王虹,孙继红,毛滕淑巨细胞病毒病(CMVDisease)包括CMV肺炎,肝炎,肠炎,肾炎等是爱滋病和器官移植受者等免疫低下人群最严重的感染并发症之一,病死率可达80%...(本文来源于《中华血液学杂志》期刊1995年10期)

向正华,钱国桢,周洪堂[8](1993)在《应用半定量原位杂交组化和免疫组化观察老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元》一文中研究指出应用半定量原位杂交组化和免疫组化观察了老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元的变化.结果表明:老年大鼠下丘脑室周核生长抑素mRNA阳性神经元明显减少(P<0.001).每一神经元的mRNA的相对含量变化不显着;生长抑素免疫反应阳性神经元数目也明显下降(P<0.05).正中隆起处生长抑素免疫反应阳性神经纤维变化不明显.提示老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元功能活动低下,细胞丢失,合成分泌生长抑素的功能紊乱.(本文来源于《解剖学杂志》期刊1993年03期)

半定量杂交论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的 建立一种半定量检测人外周血单个核细胞 (PBMC)表达IL 1αmRNA的方法。方法 确定RT PCR反应体系及扩增循环的各项参数 ,确定酶联夹心杂交反应所需的试剂、试剂的配制及杂交反应的温度、时间。选择最适数量的PBMC进行RT PCR并用核酸夹心杂交法检测扩增产物。结果 本方法检测IL 1αmRNA的灵敏度明显高于RT PCR琼脂糖凝胶电泳 ;无非特异性阳性信号出现 ,重复性良好 ,操作简便。结论 本方法是一种较好的定量检测IL 1αmRNA的方法 ,操作简便适合临床实验室

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

半定量杂交论文参考文献

[1].仇丽红,史宏灿,钱建军,陈建民.荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c-erbB-2基因扩增[J].实用临床医药杂志.2007

[2].张黎明,朱珊珊,李素珍,吕建新.核酸夹心杂交法半定量检测人IL-1αmRNA[J].临床检验杂志.2003

[3].武军.HBV、DNA斑点杂交半定量分析之探讨[J].河北医学.2003

[4].邹立林,吕建新.逆转录-聚合酶链反应酶联夹心杂交法半定量检测人白细胞介素-6mRNA[J].中华检验医学杂志.2003

[5].何建国.喉癌组织HPV16/18DNA非同位素原位杂交半定量研究[D].浙江大学.2002

[6].张德华,傅松滨.一种敏感、快速和半定量的适于双杂交体系统的LacZ分析法[J].国外医学.遗传学分册.1998

[7].杨晓林,王申五,郭乃榄,陆道培,王虹.PCR与半定量分子杂交法检测骨髓移植受者巨细胞病毒病[J].中华血液学杂志.1995

[8].向正华,钱国桢,周洪堂.应用半定量原位杂交组化和免疫组化观察老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元[J].解剖学杂志.1993

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