导读:本文包含了细胞繁殖论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,综合征,病毒,呼吸,猪繁殖,干细胞,疫苗。
细胞繁殖论文文献综述
王爱萍,陈冰,刘红亮,周景明,陈玉梅[1]（2019）在《猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白B细胞表位的初步筛选》一文中研究指出GP4蛋白是猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的次要结构蛋白,在病毒的复制与侵染中起重要作用。通过合成GP4蛋白的重迭多肽,采用间接ELISA、dot-ELISA的方法对GP4蛋白的B细胞表位进行初步筛选,得到1个免疫显性肽段Ⅰ(50) SCLRHGDSSSPTIRKSS (67),并对其抗体水平进行测定,为PRRSV的抗体检测及其新型表位疫苗的研究奠定基础。(本文来源于《西北农业学报》期刊2019年10期）
简洪禹,张志鹏,麻朝晖,董焕声,潘庆杰[2]（2019）在《不同繁殖季节驴卵母细胞体外成熟与孤雌激活胚胎发育情况研究》一文中研究指出为了研究驴在繁殖与非繁殖季节卵母细胞体外成熟与孤雌激活胚胎发育情况,试验以3—9月份为繁殖季节,其他月份为难繁殖季节,从屠宰场采集驴卵巢,统计分析不同繁殖季节卵巢形状的差异,采用抽吸法和切割法获取卵母细胞,并对卵母细胞进行体外成熟诱导,对成熟的卵母细胞进行孤雌激活,分析激活胚胎的发育情况。结果表明:繁殖季节与非繁殖季节卵巢形状差异明显。在繁殖季节,卵巢内卵泡液增多且卵泡体积变大,导致卵巢体积增大,总卵泡、中卵泡、小卵泡数量显着多于非繁殖季节(P<0.05);繁殖季节卵母细胞回收率为85.38%,非繁殖季节卵母细胞回收率为72.18%,两者差异显着(P<0.05);繁殖季节驴卵母细胞体外培养成熟率为50.10%,非繁殖季节时成熟率为34.74%,两者差异显着(P<0.05);繁殖季节卵裂率为31.0%,非繁殖季节卵裂率为29.0%,两者无显着差异(P>0.05)。说明繁殖季节卵母细胞体外成熟情况优于非繁殖季节,非繁殖季节较难获得成熟卵母细胞,但是获得成熟卵母细胞激活发育后无明显差异。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年20期）
徐丽,温贵兰,管国丹,张升波,李昌红[3]（2019）在《猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析》一文中研究指出为探讨非结构蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制过程中的作用及机制,本研究构建真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬时转染至HEK293T中,同时设置完整NSP2基因序列重组质粒作为对照,转染48 h后分别用不同的抗体进行间接免疫荧光监测。结果显示,转染对照组中细胞核周围可见特异性荧光,而转染真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不仅在细胞核周围,在细胞核内也可以观察到特异性荧光。本研究成功构建真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T细胞中正确表达,为进一步研究NSP2在PRRSV复制过程中的作用提供依据和基础。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2019年05期）
璐璐[4]（2019）在《脑瘤干细胞繁殖有了“干扰素”》一文中研究指出日前,南京医科大学第一附属医院王慧博教授团队发现,一种名为WP1130的小分子抑制剂能够高效抑制胶质瘤干细胞的繁殖,有望成为治疗脑瘤的新药。胶质瘤俗称脑瘤,是中枢神经系统最常见且最难治愈的原发性恶性肿瘤,与造血干细胞类似,肿瘤干细胞就像肿瘤的"种子",胶质瘤干细胞正是脑瘤的罪魁祸首。研究团队发现,一种名为ALDH1A3的蛋白能够让胶质瘤干细胞更有侵袭性和耐药性,进(本文来源于《老同志之友》期刊2019年15期）
[5]（2019）在《新型抑制剂,能抑制脑瘤干细胞繁殖》一文中研究指出近日从南京医科大学获悉,该校第一附属医院王慧博教授团队发现,一种名为WP1130的小分子抑制剂能够高效抑制胶质瘤干细胞的繁殖,有望成为治疗脑瘤的新药。相关成果近日在线发表于国际顶级医学综合期刊《临床研究杂志》上。(本文来源于《健康人生》期刊2019年05期）
马丽娜[6]（2019）在《新塔花的快速繁殖与细胞悬浮培养体系的建立》一文中研究指出新塔花(Ziziphora bungeana Juz.)属唇形科(Labiatae)新塔花属,为新疆特有药用植物,具广泛药用价值,黄酮类是其主要药效成分。利用离体繁殖获得新植株或次生代谢产物的技术是目前研究的一个重要方向,其主要应用途径包含植物的快繁与细胞的悬浮培养。本研究以新塔花为对象,以无菌苗的茎段为材料,通过诱导并继代增殖腋芽、愈伤组织,胁迫条件下分析细胞的生长与总黄酮含量变化,初步对新塔花的快速繁殖与细胞悬浮培养体系进行研究,为新塔花规模化快速生产提供技术支持,同时为其在细胞水平上大量生产有效药用次生代谢产物奠定基础,提供新的药源途径。主要研究结果如下:(1)筛选适合新塔花种子萌发的基质为MS培养基;2%NaClO消毒时间为4 min;GA_3、6-BA、NAA最佳浓度分别为:200 mg·L~(-1)、0.8 mg·L~(-1)、0.25 mg·L~(-1),萌发率均显着性提高(P<0.05),分别为50.44%、55.56%、57.78%。(2)确定幼嫩茎段诱导腋芽的最适培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA,平均诱导率为90.47%;适宜芽增殖培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+0.3 mg·L~(-1) GA3+35 g·L~(-1)蔗糖,20 d增殖系数达1.95;最佳诱导根生长培养基为1/2MS+0.5 mg·L~(-1) NAA+0.2%AC,生根数量达3.5,组培苗20 d高达4.5 cm。移栽混合基质(营养土:珍珠岩:蛭石=1:1:1)中组培苗成活率为80.45%。(3)适宜愈伤组织诱导的材料为茎段,切割环境为湿润;最佳诱导培养条件为MS+1 mg·L~-11 6-BA+1 mg·L~-11 2,4-D+30 g·L~(-1)蔗糖;适宜增殖继代的培养基为MS+0.6 mg·L~-11 6-BA+0.9 mg·L~-11 2,4-D+0.5 mg·L~-11 GA_3+0.15 mg·L~-11 AgNO_3;适宜光照强度为4.5 klux;NaCl对愈伤增殖影响显着(P<0.05),而对总黄酮影响不着性(P>0.05);SA对愈伤增长与总黄酮积累效果显着(P<0.05);不同浓度MeJA对愈伤鲜重量影响显着(P<0.05),而对总黄酮含量效果不显着(P>0.05)。(4)以疏松的淡黄绿色愈伤组织为材料,确定悬浮培养最佳接种量为0.1g·mL~(-1),适宜激素配比为MS+1.5 mg·L~-11 2,4-D+1 mg·L~-11 NAA+0.2 mg·L~-11 6-BA+1mg·L~-11 KT,悬浮细胞与总黄酮含量显着提高(P<0.05);最佳蔗糖浓度为30 g·L~(-1);最佳转速为100 r/min;最佳继代天数为6~7 d;10 uM SA显着性促进悬浮细胞的生长与总黄酮的积累(P<0.05);但高浓度SA有显着性抑制作用(P<0.05);10 uM MeJA促进细胞的生长(P>0.05)与总黄酮含量的积累(P<0.05)。(本文来源于《新疆大学》期刊2019-05-01）
王立珍[7]（2019）在《细胞穿膜肽TAT介导猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp9纳米抗体Nb6抗病毒感染的研究》一文中研究指出猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)是一种以猪繁殖障碍和呼吸疾病为特征的病毒性传染病,是目前造成全球养猪业巨大经济损失的重要传染病之一。该病由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起。PRRSV以高变性、免疫抑制、持续性感染及抗体依赖性增强为特征,现有疫苗的群体保护力较低,尚无有效的抗病毒药物。PRRSV非结构蛋白Nsp9是RNA依赖的RNA聚合酶,在不同毒株间高度保守,被认为是抗PRRSV药物的一个重要靶标。在先前的研究中,本实验室成功制备出一株PRRSV Nsp9特异性纳米抗体Nb6,并且证明细胞内表达的Nb6可以显着抑制PRRSV在MARC-145细胞中的复制。然而,由于纳米抗体不能有效穿过细胞膜,因此不能进入细胞达到抗病毒的作用。因此,制备安全、有效和无细胞毒性的细胞内递送系统对于提高Nb6的抗病毒活性至关重要。细胞穿透肽(cell penetrating peptides,CPPs)是一类含有约5-30个氨基酸的短肽,可以通过直接易位或内吞作用等方式进入细胞内,且不会引起细胞毒性。目前,CPPs已经被用作向细胞内递送各种货物的工具,例如质粒DNA,siRNA,蛋白质,病毒,成像剂和其他各种纳米颗粒等。TAT蛋白(HIV-1 trans-activator)是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)反式激活因子,是最早被报道的CPPs。目前已有关于TAT与纳米抗体融合蛋白在癌症治疗中的研究报道,结果表明其具有显着的抗癌效果,并有望被开发为新型抗癌药物。然而,关于CPPs在PRRSV防控中的应用尚未有研究报道。基于以上背景,本研究利用原核表达系统成功表达TAT-Nb6融合蛋白,对其穿膜及抗PRRSV功能进行验证,并对Nb6的抗病毒机制进行初步探索,为抗PRRSV纳米抗体药物的研发提供一定的理论基础。主要研究内容及结果如下:1.细胞穿膜肽TAT介导纳米抗体穿膜的研究本研究首先利用原核表达表达系统获得TAT-Nb6融合蛋白。通过Overlap PCR扩增获得TAT-Nb6基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-21b中,构建pET-21b-TAT-Nb6重组表达质粒。该重组质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导后,获得以包涵体形式表达的TAT-Nb6融合蛋白。经Ni-NTA亲和层析柱纯化、复性和浓缩得到高纯度的TAT-Nb6,并通过ELISA方法验证了TAT-Nb6与PRRSV Nsp9重组蛋白具有很强的结合力。然后将TAT-Nb6分别加入到MARC-145细胞和PAMs细胞的培养基中,与细胞进行共孵育,并利用Western blot、间接免疫荧光和流式细胞术检测两种细胞内TAT-Nb6的量。实验结果表明,TAT能够介导纳米抗体Nb6进入两种细胞,并且呈时间和剂量依赖性。随后对细胞活性进行检测,发现TAT-Nb6浓度≤30μM时对两种细胞均没有细胞毒性。我们进一步验证了TAT-Nb6在猪体内的穿膜能力,免疫组织化学实验结果表明,TAT-Nb6在所有的收集的组织中都有分布。本部分研究结果表明,原核表达的TAT-Nb6融合蛋白不仅可以与PRRSV Nsp9重组蛋白发生互作,同时具有进入细胞的能力。2.TAT-Nb6抗PRRSV的研究本研究通过病毒感染实验来研究TAT-Nb6的抗PRRSV功能。结果表明,TAT-Nb6可以抑制PRRSV基因1型(GZ11-G1)与2型(SD16、JX-A1、GD-HD、VR-2332)毒株在MARC-145细胞系或原代PAM细胞上的增殖,并且呈剂量依赖性。同时发现TAT-Nb6对PRRSV的抑制效果在不同毒株间存在差异。为了初步探索Nb6抗PRRSV的机制,我们利用酵母双杂交技术寻找Nb6与Nsp9的结合区域。结果表明,Nb6与Nsp9互作位点位于Nsp9羧基端的两个不连续区域:Nsp9_(aa454-551)和Nsp9_(aa599-646)。进一步对Nsp9 _(aa 454-646)氨基酸同源性进行分析,结果发现基因1型不同毒株间同源性达到92.2%-100%,2型毒株间达到92.7%-100%,而两种基因型之间同源性只有77.7-81.3%。综上所述,本研究成功表达了TAT-Nb6融合蛋白,该蛋白能够进入到PRRSV感染的细胞内,并发挥抗病毒作用,具有开发为抗PRRSV新型药物的潜力。同时对Nb6抗PRRSV的机制进行初步探索,为抗PRRSV纳米抗体药物的研发提供一定的理论基础。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-04-01）
王玉全,李程程,苏路路,管博文,卢延华[8]（2019）在《FOXO3A基因敲除小鼠繁殖鉴定及骨髓造血干细胞表型初步分析》一文中研究指出目的繁育和鉴定FOXO3A基因敲除小鼠,选育的FOXO3A基因敲除杂合型小鼠用于保种,纯合型小鼠用于实验。初步分析FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞表型的影响,为后续FOXO3A基因对造血细胞损伤的调节研究奠定基础。方法杂合型雌鼠与野生型雄鼠交配,选育出杂合型雌鼠和杂合型雄鼠,采用一雄一雌或一雄两雌同笼合养方式进行繁育获得纯合型小鼠;繁育的幼鼠剪趾标号,剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定,鉴定获得100 bp/186 bp两条条带的为杂合型小鼠(FOXO3A+/-),鉴定获得186 bp条带的为纯合型小鼠(FOXO3A-/-),鉴定获得100 bp条带的为野生型小鼠(FOXO3A+/+,WT);采用流式细胞术对鉴定出的野生型和纯合型小鼠进行骨髓细胞分型分析。结果 FOXO3A基因敲除小鼠已成功繁殖鉴定,子代基因敲除纯合型小鼠与杂合型小鼠长势正常,与野生型FVB/N小鼠相比外观、生长发育未见明显差异;已得到一定数量的纯合型小鼠用于后续实验;骨髓细胞计数结果显示,FOXO3A基因敲除纯合型小鼠骨髓有核细胞计数与野生型小鼠相比[(6. 167±1. 424) vs.(10±1. 732)],未见明显差异(P=0. 1625);流式分析结果显示:FOXO3A基因敲除小鼠骨髓中造血祖细胞(lin-scal-1~-ckit~+,HPC)比例明显升高(P<0. 05),造血干细胞(lin-scal-1~+ckit~+,HSC)比例没有明显差异;造血干细胞和造血祖细胞数目未发现有明显差异(P>0. 05)。结论经基因型鉴定已成功获得FOXO3A基因敲除小鼠。初步探讨FOXO3A基因敲除对小鼠骨髓细胞计数及分型未见明显影响,FOXO3A基因敲除对小鼠造血细胞的影响需要进一步的实验加以证明。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2019年01期）
韩伟,周建民,郝霖雨,潘文,潘京学[9]（2018）在《猪乙型脑炎病毒在Vero细胞上的繁殖特性及其灭活疫苗的免疫原性研究》一文中研究指出试验旨在对猪乙型脑炎病毒(JEV,SA14-14-2株)在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究,确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒,通过接种时间、接毒量、吸附时间、吸附温度、维持液pH、维持培养温度及培养时间7个条件的优化,将繁殖的病毒液冻融一次,采用病毒蚀斑数测定方法测定病毒滴度。按照优化好的条件繁殖一批毒液,经β-丙内酯灭活,与双相佐剂混合,制备成猪乙型脑炎灭活疫苗。两次免疫(间隔14d)接种乙型脑炎抗体阴性仔猪,首次免疫前(0d)、免疫后第7、14、21、28、35、42天采集血清,检测血清中和抗体。二免后第28天进行乙型脑炎P3强毒的攻击,攻毒前(0d)、攻毒后第1、2、3、5、7、9天采集血浆,攻毒后第14天剖杀免疫猪,采集脑组织,检测血浆和脑组织中JEV。结果显示,用细胞培养瓶进行培养,将Vero细胞培养至48h进行病毒接种,接种量为1 000PFU/mL,病毒吸附温度为37℃,吸附时间为90min,吸附后用pH 7.6～8.8维持液继续培养,培养温度为35℃,培养96h后收获毒液,冻融一次,可获得较高滴度的病毒。仔猪免疫制备的灭活疫苗后血清抗体水平迅速升高,血浆和脑组织中均未检测出JEV,免疫组试验猪能抵抗强毒攻击,可获得有效免疫保护。本试验结果为猪乙型脑炎疫苗的生产提供了参考依据。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年12期）
丁尊俄,胡兴义,张双翔,周碧君,王开功[10]（2018）在《猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗不同免疫程序对细胞因子分泌的影响》一文中研究指出为分析仔猪首次免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)弱毒疫苗对血清细胞因子分泌水平的影响,本试验筛选PRRSV抗原与抗体均为阴性的7日龄仔猪40头,平均分为4组,其中试验A、B、C组均为14日龄首次免疫经典弱毒疫苗,试验A组35日龄二免用高致病性灭活疫苗,试验B组35日龄二免用经典弱毒疫苗,试验C组35日龄注射生理盐水,对照组均注射生理盐水。分别于首免后1,2,3周和二免后1,2,3,4,5,6周前腔静脉采血分离血清,采用细胞因子ELISA方法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10和IL-12细胞免疫水平。结果显示,仔猪14日龄首次免疫弱毒疫苗后能迅速分泌细胞因子,首免3周以内,试验组IFN-γ分泌量均高于对照组,差异极显着(P<0.01);试验组TNF-α分泌量高于对照组,差异极显着(P<0.01),且试验A组>试验B组>试验C组,其差异不显着(P>0.05);试验组IL-2分泌量高于对照组,试验A组最高,其差异显着(P<0.05);试验组IL-10分泌量高于对照组,试验C组最高,其差异显着(P<0.05);试验组IL-12分泌量高于对照组,试验A组最高,其差异显着(P<0.05)。35日龄二免弱毒疫苗或灭活疫苗3周后,除IFN-γ外,试验A组的TNF-α、IL-2、IL-10和IL-12分泌水平均高于试验B组和试验C组。结果表明,14日龄首免PRRSV弱毒疫苗和35日龄二免PRRSV灭活疫苗的免疫效果优于仅单独2次免疫PRRSV弱毒疫苗或1次免疫PRRSV弱毒疫苗。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年12期）
细胞繁殖论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究驴在繁殖与非繁殖季节卵母细胞体外成熟与孤雌激活胚胎发育情况,试验以3—9月份为繁殖季节,其他月份为难繁殖季节,从屠宰场采集驴卵巢,统计分析不同繁殖季节卵巢形状的差异,采用抽吸法和切割法获取卵母细胞,并对卵母细胞进行体外成熟诱导,对成熟的卵母细胞进行孤雌激活,分析激活胚胎的发育情况。结果表明:繁殖季节与非繁殖季节卵巢形状差异明显。在繁殖季节,卵巢内卵泡液增多且卵泡体积变大,导致卵巢体积增大,总卵泡、中卵泡、小卵泡数量显着多于非繁殖季节(P<0.05);繁殖季节卵母细胞回收率为85.38%,非繁殖季节卵母细胞回收率为72.18%,两者差异显着(P<0.05);繁殖季节驴卵母细胞体外培养成熟率为50.10%,非繁殖季节时成熟率为34.74%,两者差异显着(P<0.05);繁殖季节卵裂率为31.0%,非繁殖季节卵裂率为29.0%,两者无显着差异(P>0.05)。说明繁殖季节卵母细胞体外成熟情况优于非繁殖季节,非繁殖季节较难获得成熟卵母细胞,但是获得成熟卵母细胞激活发育后无明显差异。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞繁殖论文参考文献
[1].王爱萍,陈冰,刘红亮,周景明,陈玉梅.猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白B细胞表位的初步筛选[J].西北农业学报.2019
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[10].丁尊俄,胡兴义,张双翔,周碧君,王开功.猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗不同免疫程序对细胞因子分泌的影响[J].中国兽医学报.2018
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