双价猪流行性腹泻病毒特异性双峰驼源单域抗体的重组表达和特征分析

双价猪流行性腹泻病毒特异性双峰驼源单域抗体的重组表达和特征分析

论文摘要

旨在构建抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)膜蛋白(M)双峰驼源sdAb(sdAb-Mc19/29/30/37)的二价抗体,并比较研究单价和二价sdAb-Mc对温度的敏感性、pH耐受性、血清抗体竞争活性及抗原捕获活性等技术指标。研究结果证实,单价和二价sdAb-Mc在30~70℃和pH 2~10条件下,均可以结合M蛋白,当温度高于80℃和pH大于11时,其与M蛋白的结合活性显著下降。此外,研究发现,重组二价抗体的血清抗体竞争活性和抗原捕获活性强于单价的抗体。研究结果说明,重组表达的二价sdAb-Mc抗体对温度和pH耐受性没有改变,但其与靶抗原结合活性得到显著提高,为研制敏感和特异的PEDV病原学快速检测方法奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材 料
  •   1.2 方 法
  •     1.2.1 PEDV特异性单域抗体结构模拟分析及双价抗体的构建
  •     1.2.2 双价sdAb的表达、纯化与鉴定
  •     1.2.3 重组双价sdAb-Mcs与M蛋白结合活性分析
  •     1.2.4 温度耐受性分析
  •     1.2.5 pH耐受性分析
  •     1.2.6 竞争活性分析
  •     1.2.7 对M蛋白捕获特性分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 PEDV特异性sdAb结构模拟及双价抗体表达质粒构建
  •   2.2 双价sdAb的表达、纯化与鉴定
  •   2.3 重组双价sdAb-Mcs与M蛋白结合活性 分析
  •   2.4 温度耐受性分析
  •   2.5 pH耐受性分析
  •   2.6 竞争活性分析
  •   2.7 对M蛋白捕获特性分析
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李丽,杨顺利,张辛铭,蔡建平,薛慧文,尹双辉

    关键词: 猪流行性腹泻病毒,双峰驼,二价单域抗体

    来源: 西北农业学报 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

    基金: 中国农业科学院农业科技创新工程(CAAS-ASTIP-2014-LVRI-09)~~

    分类号: S852.651

    页码: 1052-1060

    总页数: 9

    文件大小: 1545K

    下载量: 90

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