2型猪链球菌血清杀菌试验的建立及其与ELISA的相关性分析

论文摘要

猪链球菌（Streptococcus suis,SS）是革兰氏阳性菌,能引起人兽共患病。导致肺炎、败血症、脑膜炎、关节炎和心内膜炎等严重症状,该病可在全球广泛流行,并导致严重疫情。血清型2是毒力最强的猪链球菌。猪链球菌致病过程包括黏附、侵袭、经血液传播、突破血脑屏障等。在血液扩散过程能够引发菌血症。目前,可以通过酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA）检测猪链球菌抗体,此检测方法只能检测与抗原特异性结合的免疫球蛋白,而血清杀菌试验（Serum bactericidal assay,SBA）是测量杀伤各种细菌的功能性抗体滴度的方法,可以直接检测抗体的杀菌活性,进而更准确的评价免疫的保护效果。在本研究中,在病猪的心脏中分离了一株可疑的菌株。经细菌培养观察,革兰氏染色并显微镜观察,生化试验,聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction,PCR）,鉴定了该分离菌株是2型猪链球。通过梯度试验,以2型猪链球菌全菌疫苗免疫的藏猪血清作为阳性血清进行实验,此外,以阴性血清进行补体对照试验,建立了2型猪链球菌的血清杀菌试验,并证实了该方法的特异性和重复性良好。用商品ELISA试剂盒和血清杀菌试验测定了80日龄的未携带2型猪链球菌的藏猪免疫全菌疫苗后的一免血清和二免血清的抗体,36份免疫血清样本的两种方法测定的结果符合显著线性相关关系,相关性较好（r=0.841,P<0.001）。

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缩略词表

第一章绪论

1.1 研究来源

1.2 猪链球菌简述

1.2.1 病原学

1.2.2 流行病学

1.2.3 致病机制

1.3 猪链球菌检测方法

1.3.1 微生物学方法

1.3.2 分子生物学方法

1.3.3 免疫学方法

1.4 目的与意义

第二章 SS2的鉴定及药敏试验

2.1 前言

2.2 材料与方法

2.2.1 材料

2.2.2 方法

2.3 结果

2.3.1 细菌的分离培养结果

2.3.2 显微镜检查结果

2.3.3 生化反应结果

2.3.4 PCR鉴定结果结果

2.4 讨论

第三章建立SS2的血清杀菌试验

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.2.1 材料

3.2.2 方法

3.3 结果

3.3.1 确定最佳的补体的结果

3.3.2 不同菌液浓度的杀菌结果

3.3.3 不同血清-靶菌作用时间的杀菌结果

3.3.4 特异性试验结果

3.3.5 重复性试验结果

3.4 讨论

第四章免疫血清的SBA和 ELISA检测结果相关性分析

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.2.1 材料

4.2.2 方法

4.3 结果

4.4 讨论

结论与展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间取得的研究成果

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 林玲

导师: 徐志宏

关键词: 猪链球菌,血清杀菌试验,酶联免疫吸附试验,抗体

来源: 仲恺农业工程学院

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 仲恺农业工程学院

分类号: S852.61

总页数: 49

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