论文摘要
目的探讨利用生物反应器微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)的效果。方法利用生物反应器,将人二倍体细胞2BS培养至在微载体上形成单层后,分别采用BD008无血清培养基及含有2%新生牛血清的MEM维持液按MOI为0. 004~0. 008感染VZV毒种;当细胞呈现70%细胞病变效应(cytopatho-genic effect,CPE)时,无血清培养的细胞沉淀经PBS洗涤1次,含血清培养基培养的细胞洗涤1~3次后收获,分别制备3批VZV原液;噬斑法检测病毒滴度,ELSIA法检测牛血清白蛋白残留量,并对制备的水痘减毒活疫苗(live attenuated varicella vaccine,VarV)进行热稳定性检测。结果洗涤1~3次获得的3批含血清培养VZV原液滴度从5. 00 lgPFU/mL降至4. 12 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为203. 2、120. 3和81. 2 ng/mL,前2批超出合格范围(≤100 ng/mL)。洗涤1次获得的3批无血清培养VZV原液滴度分别为4. 92、5. 00和5. 30 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为75. 2、82. 3和71. 9 ng/mL,均值低于洗涤1及2次含血清培养VZV原液(P <0. 05)。3批无血清培养的VarV热稳定性均符合要求。结论获得的无血清培养的VZV原液滴度及牛血清白蛋白残留量均符合《中国药典》三部(2015版)标准,本研究为提高VarV质量及生物反应器微载体工艺改进提供了参考。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 闫磊,王拥军,赵海波,王玮,贺亮,李春明,沈红杰,王磊
关键词: 微载体,细胞,无血清培养基,水痘带状疱疹病毒,病毒滴度,牛血清白蛋白残余量
来源: 中国生物制品学杂志 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,基础医学
单位: 长春祈健生物制品有限公司,长春生物制品研究所有限责任公司
分类号: R373
DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002927
页码: 1425-1427+1432
总页数: 4
文件大小: 247K
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标签:微载体论文; 细胞论文; 无血清培养基论文; 水痘带状疱疹病毒论文; 病毒滴度论文; 牛血清白蛋白残余量论文;