微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒的效果

微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒的效果

论文摘要

目的探讨利用生物反应器微载体无血清培养水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)的效果。方法利用生物反应器,将人二倍体细胞2BS培养至在微载体上形成单层后,分别采用BD008无血清培养基及含有2%新生牛血清的MEM维持液按MOI为0. 004~0. 008感染VZV毒种;当细胞呈现70%细胞病变效应(cytopatho-genic effect,CPE)时,无血清培养的细胞沉淀经PBS洗涤1次,含血清培养基培养的细胞洗涤1~3次后收获,分别制备3批VZV原液;噬斑法检测病毒滴度,ELSIA法检测牛血清白蛋白残留量,并对制备的水痘减毒活疫苗(live attenuated varicella vaccine,VarV)进行热稳定性检测。结果洗涤1~3次获得的3批含血清培养VZV原液滴度从5. 00 lgPFU/mL降至4. 12 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为203. 2、120. 3和81. 2 ng/mL,前2批超出合格范围(≤100 ng/mL)。洗涤1次获得的3批无血清培养VZV原液滴度分别为4. 92、5. 00和5. 30 lgPFU/mL;牛血清白蛋白残留量分别为75. 2、82. 3和71. 9 ng/mL,均值低于洗涤1及2次含血清培养VZV原液(P <0. 05)。3批无血清培养的VarV热稳定性均符合要求。结论获得的无血清培养的VZV原液滴度及牛血清白蛋白残留量均符合《中国药典》三部(2015版)标准,本研究为提高VarV质量及生物反应器微载体工艺改进提供了参考。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞及病毒
  •   1.2 主要试剂及仪器
  •   1.3 2BS细胞生物反应器培养
  •   1.4 无血清培养病毒原液制备
  •   1.5 含血清培养病毒原液制备
  •   1.6 病毒滴度及牛血清白蛋白残留量的检测
  •   1.7 病毒滴度稳定性试验
  •   1.8 热稳定性试验
  •   1.9 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 2BS细胞感染观察
  •   2.2 病毒原液滴度及牛血清白蛋白残留量
  •   2.3 病毒滴度稳定性
  •   2.4 热稳定性试验
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 闫磊,王拥军,赵海波,王玮,贺亮,李春明,沈红杰,王磊

    关键词: 微载体,细胞,无血清培养基,水痘带状疱疹病毒,病毒滴度,牛血清白蛋白残余量

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 长春祈健生物制品有限公司,长春生物制品研究所有限责任公司

    分类号: R373

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002927

    页码: 1425-1427+1432

    总页数: 4

    文件大小: 247K

    下载量: 105

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