青鱼TANK基因的克隆及功能初探

论文摘要

鱼类养殖在我国水产养殖业中占有举足轻重的地位。青鱼是我国“四大家鱼”之一,是我国重要的淡水养殖鱼类;但是病原微生物诸如病毒对青鱼养殖业构成了严重威胁。鱼类同时拥有先天免疫系统和获得性免疫系统;然而其主要依赖先天免疫系统来抵抗病原微生物的侵染。因此,研究青鱼抗病毒先天免疫机制对于青鱼的疾病防控和健康养殖具有重要的意义。本研究克隆了青鱼TRAF家族相关NF-κB基因活化因,对青鱼子（the）TANKTRAF基因进family行了重组表达及功member-associated能分析NF-κBa,为系统ctivator,阐明青TANK+ê鱼的先天免疫系统提供了重要数据。具体研究结果如下:在哺乳动物中,TANK与NF-κB转录的调节有关;然而它在干扰素诱导中的作用尚不清楚。目前尚无有关硬骨鱼类TANK研究的报道,为了阐明TANK在硬骨鱼先天免疫中的功能,本文首次对青鱼TANK（bcTANK）在宿主细胞抗病毒先天免疫中的功能进行了鉴定。青鱼TANK基因的开放阅读框（open reading frame,ORF）包含1050个核苷酸;bcTANK蛋白含有350个氨基酸,其中包括DUF460超家族域和TBD超家族结构域。bcTANK的预测分子量为39.61KDa,预测等电点为5.61。实时荧光定量PCR（q-PCR）分析结果显示:bcTANK基因在宿主细胞中的转录水平随着LPS,Poly（I:C）,鲤春病毒血症病毒（spring viremia of carp virus,SVCV）和草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus,GCRV）的刺激而增加。免疫印迹实验表明:bcTANK能在HEK293T细胞和EPC细胞中表达,其电泳迁移条带大小在50KDa左右。免疫荧光实验表明:bcTANK分布于EPC细胞和HeLa中的细胞质区域,清晰证明了bcTANK是一种胞质蛋白。双荧光素酶报告基因分析结果表明:EPC细胞中过表达的bcTANK不诱导干扰素启动子的转录;然而在LPS、Poly（I:C）或病毒处理细胞的条件下,bcTANK对干扰素启动子的转录激活能力明显增强。结晶紫染色和噬斑实验表明:在病毒（GCRV或者SVCV）侵染的条件下,过表达bcTANK的EPC细胞的细胞病变效应（cytopathic effect,CPE）和其培养基中的病毒滴度均明显低于对照细胞,直接证明了在EPC细胞中过表达bcTANK能增强EPC细胞对SVCV和GCRV的抗病毒能力。总之,本研究首次在硬骨鱼类中对TANK基因的功能进行了阐释;本论文的研究数据证明bcTANK在青鱼的抗病毒先天免疫激活中起重要作用。

论文目录

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 封朝亮

导师: 冯浩

关键词: 青鱼,先天性免疫

来源: 湖南师范大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,水产和渔业

单位: 湖南师范大学

分类号: S941;Q78

总页数: 60

文件大小: 2108K

下载量: 39

相关论文文献

• [1].靶向抑制TANK结合激酶1表达对舌及下咽鳞癌细胞增殖及凋亡的影响[J]. 听力学及言语疾病杂志 2019(06)
• [2].鹿儿岛陡倾边坡地区地下水tank模型构模及应用[J]. 岩石力学与工程学报 2008(12)
• [3].TANK结合酶1小分子抑制剂的研究进展[J]. 药学进展 2019(07)
• [4].动态跟踪的实时校正TANK模型在河系预报中的应用[J]. 西南民族大学学报(自然科学版) 2017(01)
• [5].乙型肝炎肝硬化中医证型与TANK基因单核苷酸多态性的关联[J]. 中西医结合肝病杂志 2013(04)
• [6].斑马鱼TANK基因的克隆及功能初探[J]. 生命科学研究 2019(04)
• [7].Matlab在安全气囊气体发生器TANK试验数据处理中的应用[J]. 化学工程与装备 2015(11)
• [8].TANK结合激酶1在抗病毒免疫应答中的作用研究进展[J]. 浙江大学学报(医学版) 2016(05)
• [9].英国时尚类独立杂志的经营策略分析与借鉴——以Tank、The Gentlewoman和Dazed为例[J]. 出版广角 2018(24)
• [10].PK-15细胞敲除TANK结合激酶1基因促进猪伪狂犬病病毒复制的研究[J]. 畜牧兽医学报 2019(06)
• [11].IgA肾病患者TANK结合激酶1基因多态性与临床和病理表型的关系[J]. 上海医学 2014(05)
• [12].基于Java的Tank游戏单机版的设计分析——Tank的显示以及键盘事件的处理[J]. 农业网络信息 2010(06)
• [13].Tank模型及其在边坡水位预测中的应用(英文)[J]. 岩石力学与工程学报 2008(12)

标签：青鱼论文;  先天性免疫论文;