导读:本文包含了复制缺陷性逆转录病毒载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:逆转录病毒,人泡沫病毒,载体
复制缺陷性逆转录病毒载体论文文献综述
李治,杨频,刘辉,李文鑫[1]（2002）在《复制缺陷型人泡沫逆转录病毒载体构建和外源基因表达》一文中研究指出在人泡沫逆转录病毒 (humanfoamyvirus ,HFV)原病毒全长克隆pHRSV13的基础上 ,缺失病毒基因组的env基因和bel基因 ,构建了一个表达标记基因neo和报道基因 gfp的重组人泡沫病毒载体质粒pGPSNI GFP。在与辅助质粒 p△GP共转染情况下 ,得到复制缺陷型的重组病毒颗粒GPSNI GFP。该病毒颗粒可以感染多种宿主细胞 ,将携带的外源基因整合于细胞染色体DNA上并实现表达(本文来源于《中国病毒学》期刊2002年02期）
姚欣,畅继武,李文录,马腾骧[2]（2002）在《携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定》一文中研究指出目的 :构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA3’ -端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒 ,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ-AS ,感染NIH3T3细胞 ,测定病毒滴度。分别转染膀胱癌EJ细胞 ,通过Southern -blot和半定量RT -PCR方法评价载体整合及表达效率。结果 :pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ细胞外源基因的整合率为100 %,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35。结论 :构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求 ,能与肿瘤细胞高效整合 ,有效表达。(本文来源于《天津医科大学学报》期刊2002年01期）
刘世全,王薇,张惠蓉,张薇,王申五[3]（2001）在《复制缺陷型逆转录病毒载体介导基因工程化视网膜色素上皮细胞的制备》一文中研究指出目的 制备稳定高表达生物活性神经生长因子 (nervegrowthfactor,NGF)工程视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞 ,拟将转基因基因治疗与视网膜移植技术结合 ,用于视网膜变性疾病的治疗。方法 首先经亚克隆和克隆构建复制缺陷性逆转录病毒质粒重组体pLXSN NGF ,然后经包装细胞pT6 7包装 ,获得含有NGF基因的复制缺陷性逆转录病毒重组体 ;NIH3T3细胞测定其滴度 ,然后转导培养RPE细胞 ;反转录聚合酶链反应和Westernblot分析NGF基因在RPE细胞中的表达 ;PC12细胞测定表达产物的生物活性。结果 复制缺陷性逆转录病毒滴度为1 2× 10 7cfu/ml,在转导RPE细胞及其条件培养液中 ,可检测出NGFmRNA和蛋白的存在 ,PC12细胞经转导RPE细胞条件培养液刺激长出轴突样突触。结论 RPE细胞能高效地被复制缺陷性逆转录病毒转导 ,高水平分泌表达了生物活性NGF ,RPE细胞能成为一种理想的工程细胞。(本文来源于《中华眼科杂志》期刊2001年03期）
复制缺陷性逆转录病毒载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 :构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体。方法 :以逆转录病毒 pRevTRE为载体 ,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA3’ -端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒 ,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体 pRevTβ和 pRevTβ-AS ,感染NIH3T3细胞 ,测定病毒滴度。分别转染膀胱癌EJ细胞 ,通过Southern -blot和半定量RT -PCR方法评价载体整合及表达效率。结果 :pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ细胞外源基因的整合率为100 %,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35。结论 :构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求 ,能与肿瘤细胞高效整合 ,有效表达。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
复制缺陷性逆转录病毒载体论文参考文献
[1].李治,杨频,刘辉,李文鑫.复制缺陷型人泡沫逆转录病毒载体构建和外源基因表达[J].中国病毒学.2002
[2].姚欣,畅继武,李文录,马腾骧.携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定[J].天津医科大学学报.2002
[3].刘世全,王薇,张惠蓉,张薇,王申五.复制缺陷型逆转录病毒载体介导基因工程化视网膜色素上皮细胞的制备[J].中华眼科杂志.2001