叶绿体核糖体蛋白论文_徐美玲

导读:本文包含了叶绿体核糖体蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:叶绿体,核糖体,蛋白,油菜,桂竹,基因,蛋白酶。

叶绿体核糖体蛋白论文文献综述

徐美玲[1](2011)在《参与拟南芥叶绿体蛋白周转的DEG蛋白酶(DEG2,DEG9)及核糖体蛋白PSRP-4的功能研究》一文中研究指出叶绿体是真核生物光合作用的场所,光系统Ⅱ(PSⅡ)是定位于类囊体膜上的极为重要的色素蛋白复合物,它催化光驱动的水裂解并释放氧和质子。因此,PSⅡ对环境胁迫非常敏感,尤其反应中心的中D1蛋白质最易受环境的胁迫而破坏。被破坏的蛋白质随即被降解并由新合成的蛋白质替换。通过这种周转来保持胁迫条件下D1蛋白的稳定及PSⅡ的功能。已有研究表明,叶绿体内有200多种蛋白酶,然而这些蛋白酶中有哪些参与了D1蛋白的周转以及其作用的机制目前仍不清楚。其中,体外实验证明定位于叶绿体的类囊体膜上DEG2蛋白酶能够对光损伤D1蛋白的初步剪切。然而,在拟南芥deg2突变体中光损伤D1蛋白的降解未受影响。因此推测有其他蛋白酶的共同参与D1蛋白的剪切。通过序列比对,在DEG蛋白酶家族中Deg2与Deg9基因的同源性最高。因此本研究主要阐述这两个蛋白在D1周转过程中的协同作用机制。首先我们从SALK拟南芥突变体库中定购到Deg2和Deg9基因的T-DNA插入突变体,并通过杂交筛选到Deg2和Deg9基因缺失的。利用deg2deg9双突变体研究表明:在正常光照条件下,与对照野生型相比,deg2deg9双突变体Fv/Fm(PSⅡ最大光化学效率)没有明显区别,然而,在高光胁迫条件下,Fv/Fm在突变体中显着降低。同时,利用D1蛋白特异性抗体蛋白免疫印记实验证实,光损伤D1蛋白降解速度deg2deg9双突变体明显减慢,然而,其它的PSⅡ反应中心蛋白的水平在高光条件下则保持相对稳定。进一步利用双分子荧光互补技术(BIFC)证实了DEG2和DEG9两个蛋白酶在体内是相互作用的。从我们的研究结果可以推测DEG2和DEG9蛋白酶在PSⅡ反应中心D1蛋白的降解过程及保护其免受光抑制方面起到了特异性的作用。叶绿体蛋白由核基因和叶绿体基因共同编码完成,完整的叶绿体核糖体是由59个蛋白和23S、16S、5S/4.5S rRNA组成,尽管对核糖体蛋白结构和功能方面已经进行了大量研究,但是所涉及的核糖体蛋白,特别是细胞器核糖体蛋白仍比较少。叶绿体核糖体有6个质体特异蛋白(PSRP-1至6),其中PSRP-4为小的核糖体碱性蛋白,与大肠杆菌及光合细菌的核糖体均无同源性,可能在维持核糖体小亚基晶体结构方面有特殊作用。研究拟南芥中这些由核基因编码的特异蛋白以及它们的作用机制有助于我们进一步认识高等植物核糖体在叶绿体蛋白周转中的功能以及其可能的分子调控机理。在本研究中,我们采用RNAi技术构建了Psrp-4基因突变体。利用psrp-4突变体进行了初步研究,结果表明,在正常条件下和高光条件下,发现psrp-4突变体与野生型生长速度以及Fv/Fm无明显差异。蛋白免疫印记实验表明,D1蛋白周转也没有受到明显影响。(本文来源于《山东大学》期刊2011-05-26)

袁旭[2](2001)在《叶绿体核糖体蛋白PSRP-1部分cDNA序列的克隆》一文中研究指出在高等植物的叶绿体中,叶绿体核糖体合成了组成4种能量传递复合物的30种蛋白质、约20种核糖体蛋白及核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶等含量丰富的蛋白质,在叶绿体的蛋白质代谢中具有重要地位。几种叶绿体特有的核糖体蛋白质(PSRP)被认为参与了叶绿体基因表达在翻译水平的调控。PSRP-1(S30/S22)是由核基因组编码的叶绿体核糖体特有的蛋白,组成叶绿体核糖体的30S小亚基。通过构建并筛选cDNA文库可以克隆编码PSRP-1的基因,从而进一步研究它在叶绿体核糖体组成、翻译起始及其在基因转录后调控中的功能。 利用CLONTECH公司的cDNA文库构建试剂盒(SMART~(TM) cDNA Library Construction Kit)构建了桂竹香、白菜型油菜、芥蓝、诸葛菜和羽衣甘蓝五种十字花科植物的cDNA文库。所构建的白菜型油菜cDNA文库滴度为1.02×10~6pfu/ml,重组率为82%;利用PCR方法扩增白菜型油菜cDNA文库的插入片段,其长度在500bp~1.5kb之间。桂竹香cDNA文库的滴度为5.72×10~5pfu/ml。在桂竹香平板上随机挑取了7个噬菌斑,分别用噬菌体感染E. coli BM25.8。将噬菌体DNA转变为质粒后,提取质粒,用SfiⅠ酶切检查插入片段,其中有4种质粒含有插入片段,长度在500bp~1.0kb之间。分别将五种植物的cDNA文库进行扩增,扩增后的cDNA文库保存在-70℃。 实验室保存的探针用地高辛系统标记后,进行原位杂交筛选cDNA文库。从桂竹香cDNA文库中经初筛得到12个阳性克隆。再经过第二次筛选,得到一个阳性克隆。将所得到的阳性克隆测序,发现其中的插入片段长506bp。利用BLASTn和BLASTp在GENEBANK数据库中寻找同源序列。该插入片段编码一段含有99个氨基酸残基的多肽,其核苷酸序列分别与菠菜Psrp-1基因的部分序列具有68%的一致性,与拟南芥中可能编码530蛋白的序列具有91%的一致性;由核普酸序列推导的蛋白质序列与菠菜PSRP一具有同源性。从桂竹香中克隆到的这一片段可能是编码桂竹香PSRP吸蛋白梭基端的部分cDNA序列。 利用地高辛标记的探针筛选白菜性油菜CDNA文库,没有得到与编码PSRP一1蛋白的cDNA序列具有同源性的克隆。(本文来源于《四川大学》期刊2001-05-01)

侯丙凯,党本元,周奕华,陈正华[3](2000)在《油菜叶绿体核糖体蛋白基因rps7的克隆和序列分析(英文)》一文中研究指出从甘蓝型油菜 (Brassicanapuscv .H1 65)叶绿体基因组克隆得到了编码核糖体蛋白的基因rps7。经序列分析得知 ,该基因编码区包含 468个核苷酸 ,编码一个分子量为 2 0 1 0 9D、由 1 55个氨基酸组成的蛋白质。该基因的核苷酸和编码的氨基酸序列与烟草对应基因的同源性皆高达 97% ;而与水稻对应基因的同源性分别为 90 %和 84%。该基因不含内含子 ,没有典型的SD序列 ,但在 5’端 - 2 5~- 2 2位发现一个与烟草psbA基因的顺式作用元件RBS2完全相同的TGAT框。与烟草和水稻的同源序列比较 ,该基因在 3’端非编码区变异较大 ,发生了多次插入和缺失。构建了包含该基因在内的一个 1 .0kbDNA的限制性内切酶图谱。所报告的基因序列已登录GenBank。(本文来源于《植物生理学报》期刊2000年04期)

樊卫华,沈燕新,张中林,沈桂芳[4](1997)在《棉花叶绿体70S核糖体S7蛋白基因的克隆和序列分析》一文中研究指出叶绿体基因组具有高度保守性,来源于不同植物的叶绿体基因的同源性很高。应用PCR技术,从棉花叶绿体基因组中扩增并克隆了长度为1.okb的叶绿体DNA片段。该片段含有叶绿体核糖体小亚基S7蛋白基因rps7。采用限制性内切酶消化连接的策略构建亚克隆,并测定了该片段的全部核苷酸序列。结果表明,棉花叶绿体rps7基因与烟草、水稻的相应基因同源性很高,分别为97.9%和89.5%,3’非编码区的同源性分别为96.3%和83.9%。本文首次报道了棉花叶绿体rps7基因的序列,并讨论了它的功能及保守性。(本文来源于《作物学报》期刊1997年04期)

叶绿体核糖体蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

在高等植物的叶绿体中,叶绿体核糖体合成了组成4种能量传递复合物的30种蛋白质、约20种核糖体蛋白及核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶等含量丰富的蛋白质,在叶绿体的蛋白质代谢中具有重要地位。几种叶绿体特有的核糖体蛋白质(PSRP)被认为参与了叶绿体基因表达在翻译水平的调控。PSRP-1(S30/S22)是由核基因组编码的叶绿体核糖体特有的蛋白,组成叶绿体核糖体的30S小亚基。通过构建并筛选cDNA文库可以克隆编码PSRP-1的基因,从而进一步研究它在叶绿体核糖体组成、翻译起始及其在基因转录后调控中的功能。 利用CLONTECH公司的cDNA文库构建试剂盒(SMART~(TM) cDNA Library Construction Kit)构建了桂竹香、白菜型油菜、芥蓝、诸葛菜和羽衣甘蓝五种十字花科植物的cDNA文库。所构建的白菜型油菜cDNA文库滴度为1.02×10~6pfu/ml,重组率为82%;利用PCR方法扩增白菜型油菜cDNA文库的插入片段,其长度在500bp~1.5kb之间。桂竹香cDNA文库的滴度为5.72×10~5pfu/ml。在桂竹香平板上随机挑取了7个噬菌斑,分别用噬菌体感染E. coli BM25.8。将噬菌体DNA转变为质粒后,提取质粒,用SfiⅠ酶切检查插入片段,其中有4种质粒含有插入片段,长度在500bp~1.0kb之间。分别将五种植物的cDNA文库进行扩增,扩增后的cDNA文库保存在-70℃。 实验室保存的探针用地高辛系统标记后,进行原位杂交筛选cDNA文库。从桂竹香cDNA文库中经初筛得到12个阳性克隆。再经过第二次筛选,得到一个阳性克隆。将所得到的阳性克隆测序,发现其中的插入片段长506bp。利用BLASTn和BLASTp在GENEBANK数据库中寻找同源序列。该插入片段编码一段含有99个氨基酸残基的多肽,其核苷酸序列分别与菠菜Psrp-1基因的部分序列具有68%的一致性,与拟南芥中可能编码530蛋白的序列具有91%的一致性;由核普酸序列推导的蛋白质序列与菠菜PSRP一具有同源性。从桂竹香中克隆到的这一片段可能是编码桂竹香PSRP吸蛋白梭基端的部分cDNA序列。 利用地高辛标记的探针筛选白菜性油菜CDNA文库,没有得到与编码PSRP一1蛋白的cDNA序列具有同源性的克隆。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

叶绿体核糖体蛋白论文参考文献

[1].徐美玲.参与拟南芥叶绿体蛋白周转的DEG蛋白酶(DEG2,DEG9)及核糖体蛋白PSRP-4的功能研究[D].山东大学.2011

[2].袁旭.叶绿体核糖体蛋白PSRP-1部分cDNA序列的克隆[D].四川大学.2001

[3].侯丙凯,党本元,周奕华,陈正华.油菜叶绿体核糖体蛋白基因rps7的克隆和序列分析(英文)[J].植物生理学报.2000

[4].樊卫华,沈燕新,张中林,沈桂芳.棉花叶绿体70S核糖体S7蛋白基因的克隆和序列分析[J].作物学报.1997

论文知识图

烟草叶片蛋白质双向电泳图谱打顶前和打顶后差异蛋白质点核糖体小亚基蛋白上叶绿体特异区...插入片段酶切结果一5数据库搜索得分示意图、LAPI抗原的表达与纯化

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叶绿体核糖体蛋白论文_徐美玲
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