PERK在肝癌中的表达及其对肝癌细胞侵袭和索拉菲尼抵抗的影响

PERK在肝癌中的表达及其对肝癌细胞侵袭和索拉菲尼抵抗的影响

论文摘要

目的观察蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)在肝细胞癌和对应癌旁组织中的表达,探究PERK基因在肝癌细胞侵袭和索拉菲尼抵抗中的作用。方法免疫组化法检测PERK在人肝癌组织中的表达水平并分析其表达差异与临床病理特征之间的关联性;利用脂质体转染干扰序列至肝癌细胞,分为3组:对照组、si-NC转染组、si-PERK转染组,Western blot分析HepG2细胞基质金属蛋白酶-2(MMP2)和基质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达变化, Transwell小室法检查肝癌细胞的侵袭性能;HepG2细胞转染干扰序列后作用于索拉菲尼,分为4组:对照组、索拉菲尼组、索拉菲尼+si-NC转染组、索拉菲尼+si-PERK转染组,流式细胞术分析各组凋亡细胞比率。结果相比于癌旁组织,PERK在肝癌组织中明显高表达,同时PERK高表达与肿瘤的血管侵犯具有关联性;相比于对照组和si-NC转染组,si-PERK转染组MMP2和MMP9的蛋白表达明显降低、侵袭的细胞数目减少;PERK的沉默显著提高HepG2细胞在索拉菲尼诱导下发生的凋亡。结论 PERK蛋白在肝癌组织中高表达且与肿瘤的侵袭能力和索拉菲尼抵抗密切相关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 肝细胞癌组织标本
  •   1.2 肝癌细胞株
  •   1.3 主要试剂
  •   1.4 实验方法
  •     1.4.1 免疫组织化学染色检测PERK的表达
  •     1.4.2 细胞培养
  •     1.4.3 细胞转染干扰RNA序列
  •     1.4.4 Western blot法检测MMP2和MMP9的表达
  •     1.4.5 Transwell小室法检查肝癌细胞在体外的侵袭性能
  •     1.4.6 流式细胞术检测凋亡细胞比率
  •   1.5 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 免疫组织化学染色检测肝细胞癌组织中PERK的表达
  •   2.2 Western blot检测干扰PERK的表达对HepG2细胞MMP2、MMP9的蛋白表达的影响
  •   2.3 Transwell小室体外检测PERK沉默对细胞侵袭能力的影响
  •   2.4 流式细胞术检测PERK影响HepG2细胞对索拉菲尼的敏感性
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 周琲,鲁倩倩,范璐璐,孙国平

    关键词: 肝细胞癌,蛋白激酶样内质网激酶,侵袭,索拉菲尼抵抗

    来源: 安徽医科大学学报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 安徽医科大学第一附属医院肿瘤科

    基金: 国家自然科学基金(编号:81872047)

    分类号: R735.7

    DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.12.011

    页码: 1893-1898

    总页数: 6

    文件大小: 4014K

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