导读:本文包含了新生大鼠原代心肌细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:心肌,细胞,大鼠,新生,胶原酶,细胞培养,断头。
新生大鼠原代心肌细胞论文文献综述
邝美丹,陈海霞,廖静,何汶俊,陈奕霖[1]（2019）在《新生大鼠右心室心肌细胞的原代培养及鉴定》一文中研究指出目的:建立一种简便、重复性好的新生大鼠右心室心肌细胞原代培养方法,为右心疾病及肺循环右心相关研究提供可靠的细胞工具。方法:采用出生1～3 d无特定病原体级,SD新生大鼠12只,无菌操作开胸取心脏后,在体视显微镜下分离右心室,用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶联合消化法消化右心室心肌组织,差速贴壁法纯化右心室心肌细胞。用0.4%台盼蓝染色检测右心室心肌细胞存活率,在倒置显微镜下观察右心室心肌细胞的生长特点并记录细胞搏动频率。利用cTnT对右心室心肌细胞进行免疫荧光染色鉴定细胞纯度。结果:采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化右心室心肌组织及差速贴壁法分离所得右心室心肌细胞存活率为(94.96±2.13)%。培养的心肌细胞24 h大部分贴壁并伸出伪足,少数细胞出现自发性搏动;48 h后细胞基本全部贴壁,伪足延长,出现局部同步化搏动;72 h后细胞伪足继续延长并形成细胞簇,搏动基本同步化;96 h后细胞连接成片,呈现完全同步化搏动,搏动频率为(121.2±10.7)次/min。用cTnT染色培养的细胞纯度达(96.71±2.66)%。结论:体视显微镜下分离右心室结合复合酶消化法能成功培养出纯度高、功能较好的新生SD大鼠右心室心肌细胞。(本文来源于《心肺血管病杂志》期刊2019年09期）
赵勇,刘晓伟,林治宇,马雷,徐振宇[2]（2017）在《新生SD大鼠心肌细胞的原代培养》一文中研究指出目的:探讨乳鼠原代心肌细胞的培养方法,简便稳定地获得高存活率和纯度的心肌细胞。方法:无菌条件下取1~3d内新生SD大鼠的心室肌组织,首先用胰蛋白酶消化心肌组织一次,再用I型胶原酶短时多次消化,然后应用差速贴壁分离法和化学试剂抑制法纯化心肌细胞。对心肌细胞进行形态学观察、存活率检测和免疫荧光鉴定。结果:台盼蓝染色检测心肌细胞存活率在95%以上。培养24h后的心肌细胞已贴壁生长,呈梭形及多边形,有自发性搏动,48h后细胞伪足相互交织成网,进而形成细胞簇,呈现同步性搏动。免疫荧光鉴定心肌细胞纯度达96%。结论:此种方法能够可靠地获得较高存活率和纯度的原代乳鼠心肌细胞。(本文来源于《黑龙江医药科学》期刊2017年06期）
胡君,熊存全,周红成,吴争鸣[3]（2016）在《新生SD大鼠心肌细胞的原代分离和培养》一文中研究指出目的:建立简便有效的心肌细胞分离和原代培养方法,获得具有理想数量和活性的原代心肌细胞。方法:无菌条件下取出生72h内的新生SD大鼠心脏,去除心肌结缔组织和心房组织,只保留左心室,采用胰酶和胶原酶Ⅰ联合消化、差速贴壁分离的方法,获得心肌细胞进行体外培养,观察细胞的形态变化,对细胞的搏动频率、搏动细胞数进行统计分析。结果:分离的原代心肌细胞生长良好,核仁清晰可见。高倍镜下观察,心肌细胞接种12h后,少数细胞贴壁生长,且贴壁的少数单个细胞出现自发搏动,之后搏动细胞数以及细胞搏动频率都逐渐增加,接种48h后细胞完全铺展开来并连接成片,自发搏动呈现同步性和岛屿状。结论:本实验方法获得的新生SD大鼠心肌细胞生长状态好,细胞存活率和自发搏动性高,操作简单,重复性好,是一种理想、可靠的原代心肌细胞培养方法。(本文来源于《健康之路》期刊2016年09期）
许晓东,李凯强,王震,张昱,陈波旭[4]（2016）在《乌骨藤提取物对原代新生大鼠心肌细胞的毒性研究》一文中研究指出目的探讨乌骨藤提取物(MTE)对原代新生大鼠新生心肌细胞的毒性影响。方法分离和培养SD大鼠心肌细胞,将MTE组分A溶于二甲基亚砜,分别使用20、40、80、160和320μg/ml的MTE和8 000μg/ml的5-氟尿嘧啶作为阳性对照处理原代大鼠心肌细胞24 h,采用MTS法测定不同浓度MTE对体外培养原代大鼠心肌细胞增殖的影响;采用RTCA Cardio系统建立体外心脏毒性筛选模型,对大鼠心肌细胞增殖、搏动进行检测。结果原代心肌细胞加入不同浓度的MTE后,细胞存活受到显着抑制,半数存活浓度(EC50)为207.3μg/ml,随着MTE浓度的升高组分A抑制率增强(均P<0.05)。原代心肌细胞接种到RTCA Cardio E-Plate96孔板上,24h后出现心肌细胞搏动。MTE处理后,细胞指数(CI)值显着下降,240μg/ml MTE组分A处理后心肌细胞搏动迅速受到抑制,搏动频率由126次/min下降至0次/min,且不可恢复;160μg/ml和80μg/ml处理后分别在12h和6h后抑制作用减弱,搏动频率为40次/min和84次/min;40μg/ml基本无影响。结论 MTE组分A对原代新生大鼠心肌细胞具有细胞毒作用,能够显着影响其搏动功能。(本文来源于《浙江医学》期刊2016年17期）
李杨,王丽,王晓晖,白枫,刘慧荣[5]（2016）在《新生大鼠原代心肌细胞分离方法的改进》一文中研究指出目的对传统的原代乳鼠心肌细胞分离方法进行改良,获得活性好、纯度高、反应性好的原代乳鼠心肌细胞。方法利用断头开胸取心法取新生24 h内的Wistar大鼠心肌组织,无菌剪碎后用0.25%不含EDTA胰酶混合II型胶原酶消化法,采用自制消化组合装置分离消化细胞。逐日在倒置相差显微镜下观察细胞状态。采用心肌细胞特异性蛋白α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)单克隆抗体对培养的心肌细胞进行免疫荧光鉴定。另外使用异丙肾上腺素和去甲肾上腺素作用于细胞,观察细胞反应情况。结果培养后24 h即可观察到部分细胞搏动,可初步确定为心肌细胞;48 h后细胞逐渐展开,连续观察20 d,发现心肌细胞在3~14 d期间搏动频率与形态无明显变化。对比观察发现断头开胸取心法获取的原代心肌细胞中红细胞数量明显减少。免疫荧光鉴定发现,本方法获得的心肌细胞纯度高达95%。此外,分离的原代乳鼠心肌细胞对异丙肾上腺素和去甲肾上腺素反应灵敏。结论断头开胸取心法配以混合酶液消化心脏组织分得的原代乳鼠心肌细胞反应性好、纯度高、有活力,可满足大多数实验的要求。(本文来源于《航天医学与医学工程》期刊2016年03期）
陈希,许瑞,蒋易楠,祝伟娜,王耀辉[6]（2015）在《密度梯度离心法同时分离新生大鼠原代心肌细胞与成纤维细胞》一文中研究指出本文旨在探讨一种改良的同时分离新生大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞的方法,以建立良好的原代心肌细胞及成纤维细胞研究模型。无菌状态下取Wistar乳鼠(出生不超过2天)心室,用II型胶原酶消化,控制消化时间及次数、搅拌速度、离心次数和速度等,结合Percoll密度梯度离心法分离心肌细胞及成纤维细胞,进行体外培养,观察细胞形态,继而用0.2%台盼蓝染色检测细胞存活率,免疫荧光染色法检测心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,c Tn I)、波形蛋白(Vimentin)及α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,分别用于鉴定心肌细胞和成纤维细胞纯度。结果显示,本方法5次分离的心肌细胞平均存活率达92%,纯度达95%以上,细胞生长状态良好,可见贴壁自发搏动;成纤维细胞平均存活率达96%,纯度达94%。本方法能同时获得新生大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞,具有很高的产量、存活率及纯度,且操作简便,耗时短,重复性好,是一种较为理想的原代细胞分离、培养方法,可满足各种后续实验要求。(本文来源于《生理学报》期刊2015年04期）
王新陆,崔琳,王幼平,李彬,谢世阳[7]（2015）在《提高新生大鼠原代心肌细胞纯度方法的探讨》一文中研究指出目的:探讨提高新生大鼠原代心肌细胞纯度的方法。方法:应用0.08%心肌细胞消化液重复消化出生第1-3天乳鼠的心肌组织多次;收集的细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基中和。用差速贴壁分离法分离后,加入红细胞裂解液,以除去红细胞,加入溴脱氧尿嘧啶(Brdu)纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育2天,无血清同步化1天。结果:分离1只乳鼠获得的心肌细胞产量约为1.2×106个,有活力心肌细胞占90%以上,心肌细胞纯度>90%,3-4天后心肌细胞融合成片,并出现自发性节律性搏动。结论:该方法在保证心肌细胞产量和心肌细胞活性的同时,能大幅度提高心肌细胞纯度。(本文来源于《世界科学技术-中医药现代化》期刊2015年02期）
胡保奎,耿召华,祝善俊,刘玉峰[8]（2013）在《新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定》一文中研究指出目的:探讨新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,培养存活率高和纯度高的心肌细胞。方法:无菌条件下取出出生1～2 d的SD大鼠心脏,用2.5 g/L胰蛋白酶和2.0 g/LⅡ型胶原酶等量混合液在37℃条件下分次消化心肌组织。以差速贴壁并将时间延长至90 min纯化心肌细胞,48 h后换液。结果:将心肌细胞24 h贴壁生长,于2～3 d心肌细胞伸出伪足,形成细胞簇,同步搏动,频率约80～130次/min,存活率为(93.9±2.8)%,纯度为(91.9±2.2)%。结论:以本实验的方法培养的心肌细胞存活率高、纯度高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。(本文来源于《心脏杂志》期刊2013年06期）
胡保奎,耿召华,祝善俊,刘玉峰[9]（2013）在《新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定》一文中研究指出目的:探讨新生大鼠心肌细胞原代培养的方法,培养存活率高和纯度高的心肌细胞。方法:无菌条件下取出出生1~2 d的SD大鼠心脏,用2.5 g/L胰蛋白酶和2.0 g/LⅡ型胶原酶等量混合液在37℃条件下分次消化心肌组织。以差速贴壁并将时间延长至90 min纯化心肌细胞,48 h后换液。结果:将心肌细胞24 h贴壁生长,于2~3 d心肌细胞伸出伪足,形成细胞簇,同步搏动,频率约80~130次/min,存活率为(93.9±2.8)%,纯度为(91.9±2.2)%。结论:以本实验的方法培养的心肌细胞存活率高、纯度高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。(本文来源于《全国第十叁届心脏学会、第十六届心功能专业委员会和《心脏杂志》编委会联合学术大会会议纪要》期刊2013-09-06）
黄丹丹,许立[10]（2013）在《新生大鼠原代心肌细胞的培养与鉴定》一文中研究指出目的:探索简单易行、成功率高的心肌细胞培养方法。方法:取新生大鼠心脏心尖部剪成1 mm×1 mm×1 mm大小进行体外组织块贴壁培养。结果:成功培养出原代心肌细胞,并能够传代。心肌细胞台盼蓝染色显示存活率>87%,免疫组化染色鉴定纯度>90%。结论:通过上述方法可获得较高存活率及纯度的心肌细胞,该培养方法简单易行,重复性好,符合实验需求。(本文来源于《皖南医学院学报》期刊2013年03期）
新生大鼠原代心肌细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨乳鼠原代心肌细胞的培养方法,简便稳定地获得高存活率和纯度的心肌细胞。方法:无菌条件下取1~3d内新生SD大鼠的心室肌组织,首先用胰蛋白酶消化心肌组织一次,再用I型胶原酶短时多次消化,然后应用差速贴壁分离法和化学试剂抑制法纯化心肌细胞。对心肌细胞进行形态学观察、存活率检测和免疫荧光鉴定。结果:台盼蓝染色检测心肌细胞存活率在95%以上。培养24h后的心肌细胞已贴壁生长,呈梭形及多边形,有自发性搏动,48h后细胞伪足相互交织成网,进而形成细胞簇,呈现同步性搏动。免疫荧光鉴定心肌细胞纯度达96%。结论:此种方法能够可靠地获得较高存活率和纯度的原代乳鼠心肌细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
新生大鼠原代心肌细胞论文参考文献
[1].邝美丹,陈海霞,廖静,何汶俊,陈奕霖.新生大鼠右心室心肌细胞的原代培养及鉴定[J].心肺血管病杂志.2019
[2].赵勇,刘晓伟,林治宇,马雷,徐振宇.新生SD大鼠心肌细胞的原代培养[J].黑龙江医药科学.2017
[3].胡君,熊存全,周红成,吴争鸣.新生SD大鼠心肌细胞的原代分离和培养[J].健康之路.2016
[4].许晓东,李凯强,王震,张昱,陈波旭.乌骨藤提取物对原代新生大鼠心肌细胞的毒性研究[J].浙江医学.2016
[5].李杨,王丽,王晓晖,白枫,刘慧荣.新生大鼠原代心肌细胞分离方法的改进[J].航天医学与医学工程.2016
[6].陈希,许瑞,蒋易楠,祝伟娜,王耀辉.密度梯度离心法同时分离新生大鼠原代心肌细胞与成纤维细胞[J].生理学报.2015
[7].王新陆,崔琳,王幼平,李彬,谢世阳.提高新生大鼠原代心肌细胞纯度方法的探讨[J].世界科学技术-中医药现代化.2015
[8].胡保奎,耿召华,祝善俊,刘玉峰.新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定[J].心脏杂志.2013
[9].胡保奎,耿召华,祝善俊,刘玉峰.新生大鼠心肌细胞的原代培养及鉴定[C].全国第十叁届心脏学会、第十六届心功能专业委员会和《心脏杂志》编委会联合学术大会会议纪要.2013
[10].黄丹丹,许立.新生大鼠原代心肌细胞的培养与鉴定[J].皖南医学院学报.2013
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