导读:本文包含了亚群禽白血病病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:白血病,病毒,细胞,无能,免疫,耐药性,肾上腺素。
亚群禽白血病病毒论文文献综述
吕璐,胡明月,邓菁菁,刘勇,李拓凡[1]（2019）在《K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备》一文中研究指出研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-K Gp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Western blot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年19期）
郑高颖,何书海,张玉利,张亚,袁世玉[2]（2019）在《禽戊型肝炎病毒与J亚群禽白血病病毒共感染诱发鸡大肝大脾病的分析》一文中研究指出为查明山东某种鸡场父母代种鸡出现产蛋下降、死亡率上升以及剖检所见肝脾肿大的原因,对发病鸡进行了PCR检测和组织病理学检查。PCR结果显示:被检10只鸡中8只为禽戊型肝炎病毒(HEV)阳性、5只为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)阳性,HEV与ALV-J双阳性有4只。HEV与ALV-J共感染鸡的组织病理学检查发现:肝细胞坏死和汇管区周围淋巴细胞浸润,肝细胞内可见嗜酸性包涵体,同时部分肝内汇管区周围及肾脏间质可见髓细胞样瘤细胞,脑神经元坏死,肠绒毛脱落、坏死。检测结果提示本次蛋鸡大肝大脾病为HEV与ALV-J共感染引起。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年17期）
陈雪阳,梁雄燕,方春,顾玉芳,杨玉莹[3]（2019）在《禽白血病病毒A亚群分离株感染性克隆的构建》一文中研究指出为探究A亚群禽白血病病毒(ALV-A)的致病机理,对本实验室分离到的一株命名为HB2015012的ALV-A进行感染性克隆构建。采用PCR方法将基因组分为重迭的3段分别扩增该分离株的cDNA,经酶切按顺序连接至pTOPO-Blunt Simpie构建重组质粒TOPO-012-ABC,进而转染易感的DF-1细胞,进行病毒的拯救。经禽白血病抗原检测试剂盒检测,PCR及间接免疫荧光(IFA)鉴定,均表明拯救出了具有感染性的重组A亚群禽白血病病毒(rALV-A),命名为rHB2015012。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年08期）
周静,周德方,杜旭升,成子强[4]（2019）在《J亚群禽白血病病毒感染激活双肾上腺素样激酶-1促进DF-1细胞的增殖》一文中研究指出研究目的:J亚群禽白血病病毒avian leukosis virus subgroup J (ALV-J)于1988年在英国首次从肉鸡中分离得到,属于反转录病毒科甲型反转录病毒属,主要引起包括血管瘤、髓细胞瘤、成红细胞瘤、肉瘤和肾瘤等肿瘤,死亡率通常为1%-5%,高峰期可达到50%,给我国的养禽业带来严重的经济损失。双肾上腺素样激酶-1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)是近些年研究发现的众多肿瘤标志物中的一种,目前研究发现,DCLK1在许多癌症中呈现过表达,包括结肠癌,胰腺癌,肝癌和食管癌等,并且在肿瘤的发生及发展过程中起到一定(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
何书海,郑高颖,周德方,李根,朱明君[5]（2019）在《祖B细胞克隆无能与J亚群禽白血病病毒诱导的免疫耐受相关》一文中研究指出(目的)本研究旨在探索J亚群禽白血病病毒(ALV-J)诱发鸡发生免疫耐受致病机制。(方法)在本研究中,通过使用ALV-J先天性感染模型,在形态学和功能上研究了感染ALV-J的B细胞及其祖细胞的发育,分化和免疫能力。(结果)结果显示,与孵化后感染相比,先天性ALV-J感染导致鸡出现严重的免疫耐受;其免疫器官特别是法氏囊发育不良,表现为不分化为明显的皮层和髓质;此外免疫器官中Ig M和Ig G阳性细胞数以及血液中总免疫球蛋白水平显着降低。流式细胞术分析进一步证实ALV-J阻断了法氏囊中CD117+祖B细胞的分化。此外,通过评估感染鸡抗SRBC和MDV疫苗的抗体滴度、脾脏生发中心B细胞对LPS刺激的增殖性反应、祖B细胞体外应对LPS和IL-4刺激后增殖分化及免疫球蛋白基因转换重组的能力,发现体内外B细胞及其祖细胞的免疫应答能力都被显着抑制。(结论)这些发现表明ALV-J先天性感染鸡体内B细胞的无能是由祖B细胞分化停滞和功能障碍引起的,这是ALV-J诱导的免疫耐受的重要因素。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
俞燕,周生,徐步,邵红霞,钱琨[6]（2019）在《K亚群禽白血病病毒分离株全基因组测序及序列分析》一文中研究指出K亚群禽白血病病毒(ALV-K)是近年来从地方品种鸡分离鉴定的新亚群ALV。本试验在对江苏某原种鸡场保存的琅琊鸡开展禽白血病净化过程中,分离并鉴定1株ALV-K,命名为JS13LY19。为探明其基因组来源及特征,对JS13LY19分离株前病毒DNA进行了分段克隆和测序,获得全长基因组序列,并与各亚群ALV参考株进行比对分析。结果显示,JS13LY19分离株符合复制完整型C型反转录病毒特征,缺乏肿瘤基因。其gp85基因相较于其他亚群ALV,与ALV-K参考株遗传进化关系最为接近,与ALV-K原型株JS11C1一致性最高(99.2%);而gag、pol、gp37、LTR、UTR及JS13LY19与内源性ALV显示出更高的一致性(92.0%～99.4%);其LTR U3区比大部分外源性ALV LTR少了1个CAAT enhancer盒、PRE盒、CArG盒及Y盒。JS13LY19分离株极有可能是JS11C1与内源性ALV重组产生,且具有内源性ALV LTR及U3区转录调控元件的部分缺失,可能使JS13LY19转录能力下降而致病性降低。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年06期）
何书海[7]（2019）在《J亚群禽白血病病毒诱导鸡免疫耐受的致病机制研究》一文中研究指出J亚群禽白血病病毒(ALV-J)是一种致瘤性逆转录病毒,在临床上主要诱发肉鸡和蛋鸡发生髓系细胞白血病和其它各种类型的肿瘤性疾病。自1991年该病毒被发现以来,ALV-J在全世界范围内的各种鸡群中广泛流行并呈现间歇性爆发之势,曾对世界范围内的养鸡业造成了毁灭性打击。目前,ALV-J在我国各品系鸡群中的感染相当普遍,给家禽养殖业带来了巨大的经济损失。除了造成鸡的生产性能下降和诱发肿瘤外,一个更为严重但也容易被忽视的问题是ALV-J感染会造成被感染鸡出现严重的免疫耐受,且免疫耐受是肿瘤形成和机会性感染的必要条件。遗憾的是,迄今为止人们对ALV-J诱导免疫耐受的根本原因和机制知之甚少,所以阐明ALV-J诱导宿主免疫耐受的发病机制对防控该病具有现实而重要的意义。本研究通过建立ALV-J免疫耐受感染实验模型,从发育学、细胞学、免疫学及分子生物学角度明确ALV-J感染鸡的免疫状况及其与免疫耐受形成之间的内在联系;利用现代生命科学前沿技术,检测和分析了ALV-J感染细胞内相关蛋白的表达差异,明确其在B细胞发育和功能相关信号通路中的作用,并对ALV-J的分子致病机制进行理论概括。为研究先天性感染与后天感染诱导免疫耐受的差异,本研究分别通过胚内注射ALV-J模拟先天感染和雏鸡注射ALV-J模拟后天感染的方式建立了实验模型。研究发现,ALV-J胚内感染可造成被感染鸡出现持续性病毒血症但没有抗体反应(即免疫耐受),而雏鸡时感染ALV-J则只有一部分鸡表现为免疫耐受。通过ELISA检测发现免疫耐受鸡血液中总免疫球蛋白(Ig M和Ig G)水平显着降低。进一步运用免疫组织化学法检测了免疫耐受鸡免疫器官中Ig M+和Ig G+B细胞的数量和发育动态,检测和评价了被感染鸡脾脏B细胞应对胸腺非依赖型抗原脂多糖(LPS)刺激后的活化与增殖能力。结果显示,免疫耐受鸡体内的B细胞向Ig M+和Ig G+抗体生成细胞(特别是Ig G型细胞)发育和分化的能力受到严重的抑制;脾脏生发中心B细胞应对有丝分裂原刺激后活化与扩增能力也被抑制。为了解ALV-J先天感染与后天感染鸡对特异性抗原刺激的免疫应答能力的差异,进一步检测了宿主应对绵羊红细胞(SRBC)及马立克氏病病毒(MDV)减毒1型疫苗刺激所产生的Ig M型和Ig G型抗体滴度。结果显示,先天感染鸡所产生的抗原特异性Ig M型和Ig G型抗体滴度显着降低;然而,虽然后天感染鸡体内抗原特异性Ig G型特异性抗体滴度显着降低,但Ig M型抗体滴度基本正常,这些数据提示ALV-J后天感染对鸡体内B细胞的早期发育影响不大。综合以上实验结果可知,ALV-J先天感染抑制了B细胞的发育及成熟,并抑制了B细胞免疫球蛋白的生成和抗体类别转换能力。为了进一步探明ALV-J先天感染诱导免疫耐受的细胞学机制,本研究检测了自鸡胚发育到雏鸡的各时段法氏囊B细胞发育动态。细胞形态学检测结果显示,ALV-J胚内感染鸡法氏囊发育严重不良且大部分淋巴滤泡不能分化为明显的髓质和皮质,提示这些淋巴滤泡处于幼稚状态;然而孵化后感染ALV-J的鸡法氏囊发育虽然也受到抑制,但大部分淋巴滤泡能够形成皮质部。这些结果证实ALV-J先天感染对鸡法氏囊B细胞的发育影响更大。流式细胞分析结果进一步发现ALV-J胚内感染会造成更高的B细胞感染率(约27%),且免疫组化结果显示这些gp85抗原阳性B细胞体积和核桨比例较大,大多处于发育早期阶段。以上结果说明,ALV-J的先天感染会导致了胚胎B细胞的后期发育抑制,并因此造成B细胞抗体生成障碍。流式细胞分析结果证实ALV-J阻断了法氏囊中CD117+祖B细胞的分化,并且体外实验进一步证实ALV-J抑制了CD117+B细胞体外增殖能力和应答LPS和IL-4刺激所发生的免疫球蛋白基因类别转换重组能力。综合分析以上体内外实验数据,提示ALV-J诱导的免疫耐受与B细胞发育受阻和功能障碍密切相关,而导致B细胞出现这种“无能”状态的关键原因就是ALV-J选择性作用于早期发育的B细胞并抑制它们的进一步发育和成熟。相关ALV-J感染细胞的蛋白质组学检测结果显示,ALV-J感染改变了DF-1细胞中酪氨酸激酶Lyn的蛋白表达水平。Lyn是B细胞BCR信号通路中的核心因子,其参与了B细胞增殖、分化、成熟或耐受等相关生物学过程。因此,为明确ALV-J诱导B细胞无能的分子机制,本研究进一步分析了ALV-J对B细胞中Lyn的表达调控及对BCR信号转导的影响。Western-blot及免疫组织化学检测结果显示,ALV-J胚内感染鸡法氏囊细胞中的Lyn表达水平上升。因体内实验显示ALV-J感染鸡B细胞中Lyn表达异常,本研究进一步在体外实验中研究了ALV-J对Lyn表达的影响。通过激光共聚焦显微镜观察发现,ALV-J感染B细胞后其病毒gp85蛋白主要分布于细胞浆,同时也有一部分B细胞的胞浆和胞核均有病毒gp85的阳性信号。q RT-PCR和Western-blot检测结果与体内实验结果一致,即ALV-J感染导致B细胞内Lyn的m RNA转录水平和蛋白合成水平均被上调。Lyn在BCR信号转导中同时具有正调控和负调控作用,而这种正负调控作用取决于其不同磷酸化位点的活化水平。为明确Lyn在ALV-J感染组B细胞中发挥的主导作用,本研究进一步检测了BCR信号激活后Lyn蛋白的磷酸化水平及其下游直接底物Syk蛋白的磷酸化水平。流式细胞术分析结果显示,当激活BCR信号后,感染组B细胞中Tyr397位点(激活正调控作用)和Tyr507位点(激活负调控作用)的磷酸化水平均不同程度的增强。此时,作为BCR信号转导的核心激酶同时也是Lyn的直接底物Syk的磷酸化水平就显得尤为重要。流式细胞分析结果显示,此时Syk的磷酸化水平显着下降,提示Lyn在感染组B细胞中主要发挥了抑制BCR信号转导的作用。为了确证这种作用,本研究进一步对B细胞中的Lyn进行了sh RNA干扰并检测了相关蛋白的磷酸化水平。检测结果显示,对感染组B细胞实施Lyn的sh RNA干扰后,其下游蛋白Syk的磷酸化水平显着回升。以上实验数据进一步说明Lyn在感染B细胞中发挥了抑制BCR信号转导的作用,从而导致了B细胞BCR信号级联反应受阻。综上所述,ALV-J诱导的免疫耐受与B无能有关,其根本原因在于ALV-J阻滞了CD117+祖B细胞的发育和分化;而导致B细胞发育和分化障碍的分子机制是ALV-J激活了Lyn在BCR信号转导中的抑制性作用。总之,本研究从细胞和分子两个维度全面解析了ALV-J诱导免疫耐受机制,为禽白血病的防控及揭示相关病毒诱导免疫耐受的机制研究提供了理论依据。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-06-05）
张明珠[8]（2019）在《禽白血病病毒A/B/J亚群多重PCR检测方法的建立及应用》一文中研究指出禽白血病是由反转录病毒科禽反转录病毒属的禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)引起的,以造血细胞增生为主要代表性症状的一类肿瘤性疾病。ALV可引起鸡只生长缓慢,产蛋量下降,孵化率低,死亡率增高等不良反应出现。近几年禽白血病的流行和爆发给我国养禽业带来了严重的经济损失,根据病毒的干扰模式、宿主范围和囊膜糖蛋白等情况的不同,将ALV分为A-J 10个亚群,其中感染鸡的ALV包含A、B、C、D、E、J 6个亚群。A和B亚群是在商品蛋鸡养殖过程中最常见的外源性ALV,出现的时间最早,J亚群虽然被发现的时间晚,但其传染性、致病性都比A、B亚群高,因此,A、B和J亚群在ALV中为优势毒种。对于ALV的防控,由于至今都没有有效的临床ALV疫苗及药物,只能对检测出病毒阳性的禽只进行严格淘汰,控制、纯净种群,从而阻断ALV传播,因此,准确、实用、高效的检测方法对禽白血病的防控显得尤为重要。目前,适用于禽白血病检测的方法大多成本高,不易分型,本研究建立了一种简便、快捷而且能够同时检测A、B和J叁个亚群的禽白血病多重PCR检测方法。通过网站和软件对A、B、J叁个亚群进行了序列比对,在叁个亚群均特异的gp 85范围内设计一个共同上游引物5’-3’:GCCAAACGGATTTCTGCCTT,分别不同的下游引物,分别为A型5’-3’:AACCCAGATACCAAGGAACC,B型5’-3’:GCCTCTGGTGGGAGAATCGT,J型5’-3’:ATTGTTCCACAACACCTCTG。然后将这四个引物同时放在同一个PCR反应体系中,扩增出不同长度的片段,用于检测区分A、B、J叁个不同的亚群,A亚群目的片段为375 bp,B亚群为766 bp,J亚群为683 bp。然后对该PCR检测方法的检测体系和PCR程序退火温度进行优化,得到该PCR检测方法特异性强、敏感性高,可应用于临床检测。由于我省养鸡业存在诸多问题,如不加节制的引种,缺乏禽白血病分型的标准检测方法以及种鸡育种过程的泛滥等,使得区域内鸡禽白血病的流行更加复杂化、扩大化,流行性逐步呈上升趋势。为了了解我省禽白血病的流行情况,填补我省禽白血病流行病学调查的空白,为制定禽白血病的防治措施及净化工作提供依据,我们对我省禽养殖较为普遍的代表性地区进行流行病学调查。在我省9个地区中共抽检了1660份病料,检测到ALV的感染率为57.71%,长春感染率最高,地区差异不显着。在祖代、父母代、商品代的抽检过程中,发现商品代ALV感染率显着高于祖代和父母代。叁个亚群感染情况,其中J亚群感染率远高于A、B亚群,存在混合感染情况,以A、B亚群混合感染为主。这都说明ALV在我省感染情况普遍,ALV-J感染率最高,而鸡群的感染率和饲养条件、养殖密度、疫病防控水平、净化成本等等都有关系。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
李秋辰[9]（2019）在《J亚群禽白血病病毒在体内药物选择压下的准种演变及耐药性的产生》一文中研究指出由人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染导致的人获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)是目前全世界最为关注的疾病之一,目前对其控制主要通过使用齐多夫定Zidovudine和拉米夫定Lamivudine等逆转录酶抑制剂药物(NRTIs)来实现,NRTIs的使用一方面显着降低了AIDS的发病率,但在药物选择压下HIV耐药性的产生又成为全世界高度关注的热点问题。人的特殊性决定了我们无法在人活体内开展定向的观察来研究HIV体内耐药性的形成机制,目前主要通过病人用药前后对大量样品的序列分析来进行比较性研究或通过某些动物模型和体外细胞模型来研究。禽白血病病毒(Avain leukosis virus,ALV)是第一个证明能诱发肿瘤的病毒,此外,逆转录酶首先在ALV发现并获得1975年诺贝尔医学奖。ALV与HIV同属逆转录病毒并具有极其相似的基因组结构,通常我们将ALV作为研究HIV基因变异和准种演变的极佳模型。前期研究发现ALV在含有NRTIs的体外连续培养传代过程中产生了耐药性,通过对大量毒株实施高通量测序发现了与耐药性产生可能相关的pol基因变异位点,并通过感染性克隆和点突变反向证实相关位点突变后导致ALV产生了耐药性。那么,不同途径感染ALV的SPF鸡体内持续给药后ALV是否容易形成耐药性?在体内决定其耐药性产生的pol基因关键突变位点有哪些?这些突变位点与体外模型所发现的突变位点是否一致?这些问题的一一解答有助于回答ALV是如何通过pol基因突变在SPF鸡体内躲避NRTIs“追杀”并阐述其准种演变规律。为了避免现有ALV-J感染性克隆的基因单一性,本研究首先从山东某发生血管瘤的海兰褐鸡场中分离鉴定了6株血管瘤相关ALV-J野毒株并完成了其基因组测序,6株病毒全长均在7610-7630nt,与参考毒株相其gp85基因与ALV-J的氨基酸同源性在90%左右,而pol基因的核苷酸同源性在97.1%以上。为了进一步研究ALV-J在体内通过基因突变产生耐药性的机制,本研究以SDAU1701株在6胚龄时鸡胚卵黄囊接种病毒,孵化后持续注射逆转录酶抑制类药物Zidovudine建立了病毒持续性感染和体内药物选择的SPF鸡模型,经过长期的监测证实SDAU1701株产生了对Zidovudine的耐药性,通过高通量测序技术对药物的靶基因pol的两段高度变异区pol-A(273 bp)和pol-B(266bp)进行测序分析。结果显示经过长期的Zidovudine选择压力作用,ALV的pol基因出现了两个可能与耐药性相关的基因突变位点T196A(p<0.05)和V447A(p<0.05)。然后通过构建pol基因突变的突变株感染性克隆rSDAU1701(T196A/V447A)对其在体外的耐药性进行验证。结果显示在体外突变株SDAU1701(T196A/V447A)明显产生对Zidovudine的耐药性,并且其逆转录酶的活性比原始毒株有明显的提高。本研究对SPF鸡体ALV-J在抗逆转录病毒药物Zidovudine选择压力作用下产生耐药性的机制进行了研究,发现了病毒在动物体内经过长期药物作用后产生的关键基因突变位点,为解析逆转录病毒在动物体内耐药机制的机制和建立良好的病毒模型奠定了良好的基础。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27）
胡卫国[10]（2019）在《A亚群禽白血病病毒（ALV-A）胶体金检测试纸条的研制》一文中研究指出A亚群禽白血病是由A亚群禽白血病病毒(subgroup A of avian leukosis virus,ALV-A)引发的传染性肿瘤性疾病,主要引起感染鸡长期病毒血症、生长缓慢、免疫抑制、生产性能下降、多组织肿瘤甚至死亡等。该病在我国鸡群中感染率非常高,仅次于J亚群禽白血病,每年对我国的养鸡业造成巨大的经济损失。对该病尚无有效的药物和疫苗,采用淘汰阳性鸡、实施种鸡净化是目前控制该病的主要方法。建立特异、灵敏、快速检测ALV-A的方法是这一防控措施的关键核心技术。现有的检测ALV-A方法繁琐、需要特异设备、耗时长,很难满足临床大批量检测需要。本研究基于胶体金免疫结合和层析原理,通过制备ALV-A的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),优化反应条件,研制ALV-A胶体金检测试纸条,对该试纸条性能进行比较分析,结合临床样品检测评价其适用性,为临床应用提供科学依据。本研究首先通过原核表达方法制备ALV-A gp85重组蛋白,纯化后免疫接种兔,四次免疫后取血清,制备pAb,ELISA方法检测抗体滴度和IFA法检测抗体特异性。用实验室制备的ALV-A单克隆杂交瘤细胞株A14GZ接种于Balb/c小鼠,制备腹水,获得ALV-A mAb,检测抗体滴度和抗体特异性。优化反应条件,利用一定大小的胶体金颗粒与mAb制备纳米胶体金标记抗体溶液。pAb包被试纸条硝酸纤维素膜(NC膜),按照胶体金检测试纸条制备方法研制ALV-A胶体金检测试纸条。用已知的ALV-A/B/J/K毒株检测胶体金检测试纸条的特异性,用一定量含ALV-A病毒稀释液和gp85蛋白检测试纸条的灵敏度,在4℃、25℃、37℃条件下分别保存试纸条6个月,用已知ALV-A病毒溶液检测试纸条的稳定性。收集ALV-A病毒感染种鸡的血液、泄殖腔棉拭子、蛋清样品,用研制的胶体金试纸条与IDEXX公司的ALV p27抗原ELISA检测试剂盒进行比较检测,评价试纸条的适用性,分析结果。结果显示:(1)制备的ALV-A gp85蛋白的大小为46 KDa,获得的pAb和mAb的抗体滴度分别为1:10~6和1:2~(13),IFA和Western-blot结果显示两种抗体均特异性的结合ALV-A和gp85包膜蛋白。(2)采用氯金酸和柠檬酸叁钠还原法制备胶体金溶液的胶体金颗粒大小为20 nm;用mAb和pAb分别作为标记抗体和检测抗体,胶体金-抗体复合物反应体系的最佳pH值为8.3,抗体的最佳工作浓度为16.8μg/mL。(3)该试纸条能特异性识别ALV-A,但不能识别ALV-B/J/K;对ALV-A的检测下限为64 TCID_(50)/mL,对ALV-A gp85蛋白的检测下限为80 ng/mL;在4℃保存180 d、25℃保存60 d以及37℃保存15 d都具有较好的反应性。(4)该胶体金检测试纸条与国际商业化ALV抗原ELISA检测试剂盒比较结果显示,二者泄殖腔棉拭子样本阳性和阴性重合率为94.06%(190/202),血液样本为95.2%(119/125),蛋清样本为95.31%(61/64);而PCR结果显示,试纸条的假阳性率远低于ELISA。同时,所研制的试纸条具有检测快速、成本低廉、不需特殊设备等优点。以上结果表明:成功研制ALV-A的纳米胶体金检测试纸条,具有特异、灵敏、快速检测ALV-A的特性,可适用于ALV-A的临床批量样本检测。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27）
亚群禽白血病病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为查明山东某种鸡场父母代种鸡出现产蛋下降、死亡率上升以及剖检所见肝脾肿大的原因,对发病鸡进行了PCR检测和组织病理学检查。PCR结果显示:被检10只鸡中8只为禽戊型肝炎病毒(HEV)阳性、5只为J亚群禽白血病病毒(ALV-J)阳性,HEV与ALV-J双阳性有4只。HEV与ALV-J共感染鸡的组织病理学检查发现:肝细胞坏死和汇管区周围淋巴细胞浸润,肝细胞内可见嗜酸性包涵体,同时部分肝内汇管区周围及肾脏间质可见髓细胞样瘤细胞,脑神经元坏死,肠绒毛脱落、坏死。检测结果提示本次蛋鸡大肝大脾病为HEV与ALV-J共感染引起。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
亚群禽白血病病毒论文参考文献
[1].吕璐,胡明月,邓菁菁,刘勇,李拓凡.K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备[J].中国家禽.2019
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[4].周静,周德方,杜旭升,成子强.J亚群禽白血病病毒感染激活双肾上腺素样激酶-1促进DF-1细胞的增殖[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
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