斑节对虾TSG101基因的克隆及表达分析

斑节对虾TSG101基因的克隆及表达分析

论文摘要

为探究肿瘤易感基因101(简称TSG101)对斑节对虾(Penaeusmonodon)的免疫应答作用,了解在细菌刺激下斑节对虾的机体发生的变化机制,本研究以哈维弧菌(Vibrioharveyi)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)为实验组,以磷酸缓冲液(PBS)为对照组,通过荧光定量分析展开对斑节对虾对菌刺激的免疫应答作用。结果显示,斑节对虾的TSG101在各组织中均有表达,在肝胰腺中的表达量最高。在金黄色葡萄球菌刺激下,斑节对虾的TSG101在肝胰腺中的表达量与对照组相比呈极显著上调(P<0.01),第12小时的TSG101 mRNA的表达量达到最大(为对照组的21.60倍);在鳃中的表达量与对照组相比呈极显著上调(P<0.01),第6小时斑节对虾TSG101的表达量达到最大值(为对照组的3.64倍)。在注射哈维弧菌第9小时,肝胰腺中的PmTSG101 mRNA表达量极显著上调(P<0.01)且达到最大(为对照组的2.50倍)。实验结果初步表明,斑节TSG101参与斑节对虾的先天免疫反应,在金黄色葡萄球菌和哈维弧菌的刺激的情况下,该基因RNA水平的表达情况发生明显变化。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 实验材料
  •   1.2 细菌刺激实验
  •   1.3 RNA提取和cDNA合成
  •   1.4 斑节对虾TSG101基因克隆和测序
  •   1.5 序列和系统发育分析
  •   1.6 实时荧光定量PCR表达分析
  •   1.7 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 PmTSG101基因的生物信息学分析
  •   2.2 斑节对虾TSG101组织分布的差异表达
  •   2.3 斑节对虾TSG101在金黄色葡萄球菌和哈维弧菌刺激下的表达变化
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王芳,范嗣刚,赵超,王鹏飞,闫路路,邱丽华,闫喜武

    关键词: 斑节对虾,肿瘤易感基因,金黄色葡萄球菌,哈维弧菌

    来源: 海洋科学 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,水产和渔业

    单位: 大连海洋大学水产与生命学院辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心,中国水产科学研究院南海水产研究所,农业农村部水生动物基因组学重点实验室

    基金: 国家自然基金应急管理项目(31741121),院级基本科研业务费重点研究项目(2018HY-ZD0204),海南省重点研发计划项目(ZDYF2018163)~~

    分类号: S917.4;Q78

    页码: 122-131

    总页数: 10

    文件大小: 8381K

    下载量: 59

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