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海洋低温葡萄糖氧化酶细菌选育及其酶学性质研究

2020-12-12阅读(238)

海洋低温葡萄糖氧化酶细菌选育及其酶学性质研究

论文摘要

为获得产低温葡萄糖氧化酶（glucose oxidase,GOD）的细菌,提高其产酶能力,研究GOD酶学性质,通过平板显色法从海泥样品中筛选低温GOD生产菌株,经形态特征、生理生化鉴定及分子生物学鉴定确定菌株分类。经诱变育种获得高产GOD菌株,并对所产GOD进行酶学性质研究。研究获得1株编号8-III的高产低温GOD细菌,鉴定为柠檬酸杆菌属（Citrobacters sp. 8-III）,产GOD酶活力为0. 75 U/m L。经诱变得到可稳定遗传的突变菌株8-III-a44,产GOD酶活力为1. 77 U/m L,为原始菌株的2. 36倍。最适p H为6. 5,最适作用温度为15℃,在0～35℃有较高酶活力,为低温酶。并且添加K+、Ni2+对GOD活性有明显促进作用。该研究为其在海产品保鲜、饲料防腐方面的应用奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 样品
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 培养基
  •     1.1.4 仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 产GOD细菌初步筛选
  •     1.2.2 产GOD优势细菌株的重复筛选及其酶活性检测
  •     1.2.3 菌株鉴定
  •     1.2.4 紫外诱变
  •     1.2.5 化学诱变
  •     1.2.6 复合诱变
  •     1.2.7 优良突变菌株的传代试验
  •     1.2.8 粗酶液制备
  •     1.2.9 酶学性质研究
  • 2 结果与分析
  •   2.1 产低温GOD菌株的筛选
  •   2.2 菌株8-III的鉴定
  •     2.2.1 形态特征鉴定
  •     2.2.2 生理生化特性鉴定
  •     2.2.3 分子生物学鉴定
  •   2.3 菌株诱变结果
  •     2.3.1 紫外诱变结果
  •     2.3.2 化学诱变
  •     2.3.3 复合诱变结果
  •   2.4 突变菌株遗传稳定性
  •   2.5 酶学性质分析
  •     2.5.1 酶最适作用温度
  •     2.5.2 酶的热稳定性
  •     2.5.3 酶最适作用pH值
  •     2.5.4 酶的pH值稳定性
  •     2.5.5 金属离子及螯合剂对酶活的影响
  • 3 结论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘春莹,胡善松,张庆芳,李美玉,于爽,迟乃玉

    关键词: 海洋细菌,低温葡萄糖氧化酶,诱变育种,酶学性质

    来源: 食品与发酵工业 2019年13期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 大连大学生命科学与技术学院,辽宁省海洋微生物工程技术研究中心(大连大学)

    基金: 国家自然科学基金(2018YFC0311100),辽宁省科学技术基金(20180551160)

    分类号: TQ925

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.020359

    页码: 52-58

    总页数: 7

    文件大小: 946K

    下载量: 169

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