论文摘要
为在噬热栖热菌（Thermusthermophilus）中开収无需筛选标记的基于双交换同源重组的基因无痕敲除手段,以大质粒及染色体上的TTP0042与TTC03400341为靶基因,构建含有其两侧同源臂的基因敲除载体幵转化T.thermophilusHB27细胞,将转化混合物涂布于不含筛选物质的培养基上,通过PCR及Southern杂交检验转化子的基因型。结果表明,采用线状的TTP0042基因敲除载体迚行转化,获取表观Δ0042突变体的概率为10–4,而使用闭合环状载体,该概率可达10–3;基因型及表现型分析显示,这些表观Δ0042均为TTP0042无痕敲除型突变体。该敲除手段在染色体上的基因TTC03400341中得到验证,从300个单菌落中成功鉴定出了1个Δ03400341突变株。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李海娟
关键词: 噬热栖热菌,双交换性同源重组,基因无痕敲除
来源: 湖南农业大学学报(自然科学版) 2019年02期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学
单位: 西安文理学院生物与环境工程学院
基金: 国家自然科学基釐项目(31700059),陕西省自然科学基础研究计划项目(2018JQ3037),陕西省高校科协青年人才托举计划项目(20180210)
分类号: Q78;Q93
DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2019.02.006
页码: 143-148
总页数: 6
文件大小: 654K
下载量: 332
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标签：噬热栖热菌论文; 双交换性同源重组论文; 基因无痕敲除论文;