猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白羧基端的噬菌体展示及其诱导仔猪产生中和抗体水平

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白羧基端的噬菌体展示及其诱导仔猪产生中和抗体水平

论文摘要

为了发现并验证猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)保护性抗原GP5蛋白羧基端新的中和性表位,本研究运用生物信息学软件预测PRRSV GP5蛋白羧基端的抗原性,全基因合成GP5蛋白羧基端168~198位氨基酸的编码序列,构建了重组噬菌体M13-GP5aa168~198,以临床阳性血清进行Western blot分析重组噬菌体表面展示的GP5aa168~198多肽的免疫反应原性。以1.0×1013 PFU/mL重组噬菌体混合氢氧化铝佐剂制备免疫抗原,按照灭活疫苗免疫程序肌肉注射免疫PRRSV抗体阴性断乳仔猪2次,间隔2周,分别于末次免疫后的第2,4和6周采血,分离血清,以临床分离PRRSV强毒株进行中和试验。结果显示:重组噬菌体表面展示的GP5aa168~198多肽具有免疫反应原性,免疫仔猪后,能够诱导仔猪产生较高水平的中和性抗体,为构建PRRSV GP5新型多表位疫苗的开发奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株、载体、细胞系和实验动物
  •   1.2 主要试剂和耗材
  •   1.3 表位编码基因的合成
  •   1.4 重组噬菌体的构建与鉴定
  •   1.5 重组噬菌体的Western blot分析
  •   1.6 动物免疫
  •   1.7 中和试验
  • 2 结果
  •   2.1 PRRSV GP5抗原的预测
  •   2.2 重组噬菌体的构建及鉴定
  •   2.3 重组噬菌体的蛋白Western blot分析
  •   2.4 PRRSV中和试验
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王艳梅,顾敬敏,雷连成,冯新,孙长江,韩文瑜

    关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒,噬菌体展示,中和抗体

    来源: 中国兽医学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 吉林大学动物医学学院

    基金: 企业横项课题:猪场疫病检测与防控资助项目(3R2157256201)

    分类号: S852.651

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.04

    页码: 830-834+841

    总页数: 6

    文件大小: 630K

    下载量: 156

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