响应面法优化重组亚油酸异构酶产酶条件

响应面法优化重组亚油酸异构酶产酶条件

论文摘要

共轭亚油酸(CLA)广泛存在于多种食物中,具有减肥、抗癌、抗动脉粥状硬化和抗糖尿病等诸多生理活性。为了获得活性CLA高产,本文将突变的亚油酸异构酶克隆到大肠杆菌中表达,单因素试验确定最优产酶条件为发酵时间18 h、IPTG诱导浓度0.2mmol/L、20%装液、培养基初始p H7、诱导前菌体生物量OD600=0.4、LA浓度0.5mg/m L、离子浓度0.02%;在此基础上采用响应曲面法优化重组大肠杆菌培养条件提高生产亚油酸异构酶的能力,根据响应面法实验结果分析显示,发酵时间、诱导前生物量和LA浓度对重组亚油酸异构酶的表达有显著影响且均为正效应。三个影响因素最佳组合为发酵时间19.5h、诱导前生物量OD600=0.47和LA浓度0.57 mg/mL,此时预测亚油酸异构酶催化LA转化为CLA最大量为143.33μg/m L。验证显示,发酵CLA的产量为141.75±0.14μg/m L,与预测产量相符;通过优化设计,提高了107.5%。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料、试剂与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 菌种与质粒
  •     1.2.2 亚油酸异构酶液的制备
  •     1.2.3 紫外法测定CLA含量
  •     1.2.4 Plackett-Burman (P-B)实验设计
  •     1.2.5 最陡爬坡实验设计
  •     1.2.6 中心组合实验设计
  •     1.2.7 模型的验证
  •     1.2.8 数据统计分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 P-B设计
  •   2.2 最陡爬坡实验
  •   2.3 中心组合实验结果
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张斯璇,刘瑛,时旭,史海粟,杜阿楠,武俊瑞,岳喜庆,乌日娜,洛雪

    关键词: 共轭亚油酸,亚油酸异构酶,响应面法,生物转化

    来源: 现代食品科技 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 沈阳农业大学食品学院

    基金: 国家自然科学基金-青年基金项目(31701623,31601493)

    分类号: TS201.4

    DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.8.026

    页码: 174-179+330

    总页数: 7

    文件大小: 1470K

    下载量: 126

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