导读:本文包含了体外发育论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胚胎,体外,活性氧,细胞,德保,培养液,表观。
体外发育论文文献综述
豆昌凤,周鑫,程小翠,李欢欢,赵彩霞[1]（2019）在《不同葡萄糖浓度对小鼠胚胎体外发育影响》一文中研究指出为更好地了解高糖对胚胎发育的影响,本研究利用小鼠胚胎体外培养方法,体外模拟母体高血糖对胚胎发育的影响,分析了早期胚胎在含有不同浓度葡萄糖0、5.5、27.5 m M的KSOM培养液中的发育,并结合定量PCR方法分析了5个胚胎发育相关基因(PTGFR,PTAFR,EDNRA,TACR3,UTS2R)的表达。5.5 mM为对照组,对照组囊胚形成率73.75%,而在0 mM和27.5 mM葡萄糖的培养液中培养的胚胎囊胚形成率降低分别为51.25%和52.25%;通过定量PCR测定囊胚期相关基因的表达变化,葡萄糖可以显着改变PTGFR,PTAFR,EDNRA,TACR3,UTS2R基因的表达。本研究表明在早期发育期间暴露于高葡萄糖浓度的胚胎发育受到抑制,并会改变胚胎发育中重要基因的表达。(本文来源于《阜阳师范学院学报(自然科学版)》期刊2019年03期）
张艺琳,张森棹,古小彬,杨光友,谢跃[2]（2019）在《犬弓首蛔虫卵体外发育的形态观察》一文中研究指出为了研究犬弓首蛔虫卵的体外发育形态学变化,采用显微自动拍照系统对体外培养的犬弓首蛔虫卵进行了连续21 d观察和记录。结果表明,犬弓首蛔虫卵存在12个体外发育阶段,即1细胞期、 2细胞期、 3细胞期、 4细胞期、早期桑葚期、晚期桑葚期、囊胚期、肠胚期、 1期幼虫前期、 1期幼虫期、 2期幼虫前期和2期幼虫期。观察发现,虫卵在培养24 h后开始出现卵裂,形成2细胞期虫卵;虫卵第3～6天陆续发育形成3～4细胞期、桑葚期、囊胚期以及肠胚期虫卵;第7天,22.5%虫卵发育形成1期幼虫,并表现出一定趋光特性;第8天,10.67%虫卵发育形成感染性2期幼虫;第17天,感染性2期幼虫从虫卵孵出,卵壳塌陷。这些结果补充和完善了犬弓首蛔虫卵的体外发育形态变化资料。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年04期）
谢璐,徐志远,张鲁,吕文发,刘国世[3]（2019）在《OPS玻璃化冷冻对小鼠四倍体胚胎体外发育的影响》一文中研究指出为探究开放式拉长细管(OPS)玻璃化冷冻对四倍体胚胎发育的影响,本实验利用2-细胞胚胎电融合法制备四倍体胚胎,再对四倍体胚胎进行OPS玻璃化冷冻,分别观察记录二倍体胚胎、四倍体胚胎以及冷冻解冻后四倍体胚胎的发育情况。结果表明:2-细胞胚胎电融合效率为96.1%;二倍体胚胎组与电融合后四倍体胚胎组的囊胚率和孵化囊胚率差异不显着;冷冻解冻后四倍体胚胎的囊胚率(100%)与四倍体新鲜组(93.3%)差异不显着,其孵化囊胚率(72.3%)较新鲜组(64.9%)显着增高(P<0.05);四倍体冷冻解冻组的囊胚细胞数(31.96)与新鲜组(32.54)无显着差异;冷冻解冻后的四倍体早期囊胚进行体外培养时其发育速度比对照组更快。可见,冷冻对小鼠四倍体胚胎的囊胚率和囊胚细胞数均无显着影响,但孵化囊胚率显着提高,且OPS玻璃化冷冻后使四倍体胚胎的发育速度更快。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2019年07期）
潘承双,徐芝慧,张欢,李燕,金建远[4]（2019）在《两种商品化培养液对胚胎体外发育和临床结局的影响比较》一文中研究指出目的比较Cook培养液和Vitrolife培养液对胚胎体外发育和临床结局的影响。方法收集行常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)893例和卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)320例新鲜周期的临床数据。根据使用的培养液不同,IVF-ET周期分为Cook组456例和Vitrolife组437例,ICSI-ET周期分为Cook组143例和Vitrolife组177例。分别比较IVF-ET周期和ICSI-ET周期中Cook组和Vitrolife组获卵个数、正常受精率、卵裂率、第3天优质胚胎率、ET个数、种植率、妊娠率。结果 IVF-ET和ICSI-ET周期中,Cook组和Vitrolife组获卵个数、正常受精率、卵裂率、ET个数、种植率、妊娠率比较差异均无统计学意义(均P>0.05),但Vitrolife组第3天优质胚胎率均明显高于Cook组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论无论IVF-ET还是ICSI-ET周期,两种培养液对种植率和妊娠率均没有影响,但Vitrolife培养液可以获得更高的第3天优质胚胎率。(本文来源于《浙江医学》期刊2019年10期）
郭庆[5]（2019）在《黄芩苷对猪卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育能力的影响》一文中研究指出黄芩苷(baicalin)是一种从黄芩植物根部提取的传统中药单体,因其具有抗氧化、抗凋亡、抗炎症等功能,被用于治疗多种由炎症因子引起的疾病,同时在生殖上具有治疗不孕不育,保胎的作用。然而,baicalin对于卵母细胞体外成熟(IVM),胚胎体外发育的影响及其机制尚不清楚。卵母细胞IVM和胚胎体外培养会受到高浓度活性氧(ROS)的破坏作用使其效率降低,这使卵母细胞和胚胎相关机理的研究及二者在辅助生殖技术上的应用都受到很大限制。因此本实验在猪卵母细胞IVM培养液和胚胎IVC培养液中添加baicalin可以通过抑制凋亡显着提高卵母细胞IVM能力、卵母细胞质量、胚胎体外发育能力、胚胎质量。同时,利用成年雄性昆明鼠体内实验验证baicalin对酒精诱导精子损伤的保护作用。一、Baicalin对猪卵母细胞IVM及其后胚胎体外发育能力的影响1.本实验探索不同浓度的baicalin对猪卵母细胞IVM能力的影响,发现0.1μg/mL和0.5 μg/mL的baicalin均可以显着的提高猪卵母细胞IVM 能力(68.1,70.2 vs.59.7;P<0.05)。Baicalin 具有显着的抗氧化能力,因此,通过荧光染色的方法发现0.05,0.1和0.5μg/mL baicalin处理组中卵母细胞内产生活性氧(ROS)水平均显着的低于对照组(P<0.05)。在最小试验药物浓度获得最佳实验效果的原则下,后续实验选择0.1 μg/mL的baicalin作为最佳处理浓度。同时RT-PCR结果显示baicalin处理组中卵母细胞和卵丘细胞的促凋亡相关基因(Bax)mRNA表达量显着低于对照组(P<0.05)。2.荧光染色和RT-PCR方法进一步检测baicain处理后卵母细胞的质量,结果显示0.1μg/mL的baicalin处理组中线粒体潜能性(△Ψm)和ATP含量均显着的高于对照组(P<0.05)。同时,RT-PCR检测到baicalin处理组中卵母细胞成熟相关基因(BMP15,GDF9,CyclinB,CDK1)和卵丘细胞扩增相关基因(PTGS1,PTX3,TNFIP6,SHAS2)的mRNA表达量显着的高于对照组(P<0.05)。3.检测baicalin处理的卵母细胞经孤雌激活(PA)后胚胎的体外发育能力。结果显示处理组获得的胚胎体外发育能力显着的高于对照组(49.5 vs.27.2;P<0.05)。同时,baicalin处理后获得的胚胎发育到囊胚阶段时细胞数也显着的高于对照组(P<0.05)。RT-PCR检测到baicalin处理组中胚胎达到囊胚阶段时全能性相关基因(Nanog,Sox2)和Bcl2基因的mRNA表达量显着的高于对照组(P<0.05),而Ba基因mRNA表达量显着的低于对照组(P<0.05)。同时,Tunel染色发现baicalin处理组囊胚细胞凋亡数显着的低于对照组(P<0.05)。二、Baicalin对PA,体细胞核移植(SCNT)和体外受精(IVF)胚胎发育能力的影响1.检测baicalin对猪PA胚胎体外发育能力的影响。结果表明0.1μg/mL的baicalin处理可以显着提高猪PA胚胎的体外发育能力(21.7 vs.36.7;P<0.05),囊胚细胞数也显着高于对照组(P<0.05)。Tunel染色检测了囊胚的质量,结果显示baicalin处理组囊胚凋亡细胞数显着的低于对照组(P<0.05)。RT-PCR结果表明全能性基因(Oct4,Sox2)的mRNA表达量显着高于对照组(P<0.05)。Bax和Bcl2基因的mRNA表达量显着低于和高于对照组(P<0.05)。2.检测baicalin对猪PA胚胎ROS表达量,Bax和Bcl2基因mRNA表达量,△Ψm,ATP含量的影响。利用荧光染色检测0.1μg/mL baicalin处理对猪PA胚胎质量的影响,结果显示baicalin处理组2/4-cell时期ROS的表达量显着低于对照组和其他浓度处理组(P<0.05)。同时RT-PCR结果显示胚胎在2/4-cell时期Bax基因的mRNA表达量均显着的低于对照组(P<0.05),Bcl2基因在2-cell时期的mRNA表达没有显着的变化,而在4-cell时期mRNA的表达量显着高于对照组(P<0.05)。同时,荧光染色显示baicalin处理组中△Ψm和ATP含量显着高于对照组(P<0.05)。3.检测baicalin处理对猪PA胚胎中sonic hedgehog(SHH)信号途径的影响。RT-PCR结果显示,baicalin处理组中SHH信号途径相关基因(SHH,PTCH1,GdI1,SMO)的mRNA表达量均显着高于对照组(P<0.05)。免疫荧光染色检测发现baicalin处理可以显着的提高SHH信号途径相关蛋白(SHH,GLI1)的表达量。为了进一步检测baicalin处理对胚胎体外发育能力影响的机制,我们将胚胎分为叁个组:对照组;baicalin处理组;baicalin和SHH信号抑制剂(Cyclopamine,Cy)共同处理组,结果显示Cy可以恢复baicalin对胚胎产生ROS和凋亡的抑制作用及baicalin对△Ψm和ATP含量的增加。最后,我们检测叁个处理组胚胎的体外发育能力,结果显示Cy可以抑制baicalin对胚胎体外发育能力的提高。4.检测0.1 μg/mL baicalin对猪SCNT和IVF胚胎的影响。结果表明0.1 μg/mL的biacalin可以显着提高猪SCNT和IVF胚胎的发育能力(14.9 vs.25.9;14.9 vs.25.9;P<0.05)。叁、Baicalin对酒精诱导的成年雄性昆明鼠精子损伤的保护作用1.本实验建立了酒精诱导成年雄性昆明鼠精子损伤模型。实验分为两组,10只同窝出生,表型一致的成年雄性昆明鼠随机分为实验组和对照组,每组各5只。实验组进行每天连续四周酒精灌胃实验,灌胃剂量按酒精质量和小鼠体重比如下:第一周每天2g/kg、第二周每天4g/kg、第叁周每天6 g/kg、第四周每天8 g/kg、对照组饲喂等量的生理盐水。第四周结束时对小鼠进行剖检,检测到小鼠体重下降,死亡率增加,精子密度显着的低于对照组(P<0.05)。2.检测不同浓度baicalin处理对酒精诱导成年雄性小鼠精子损伤的保护作用。实验分为对照组(等量生理盐水)、酒精组、酒精和25 mg/kg baicalin共同处理组、酒精和50 mg/kg baicalin共同处理组(mg/kg即baicalin重量和小鼠体重比值,酒精剂量按照实验一)。结果显示,50 mg/kg的biacalin灌胃量对酒精诱导的小鼠精子密度下降和精子畸形率升高等具有部分保护作用(P<0.05)。3.检测不同浓度baicalin对酒精诱导的成年雄性昆明鼠睾丸组织凋亡和炎症因子相关基因mRNA表达量的影响。结果显示,酒精处理会显着的增加睾丸组织中凋亡基因(Caspse3,Bax)和炎症因子(IL-6,TNF-a)mRNA表达量,同时降低Bcl2基因mRNA的表达量(P<0.05)。相比于酒精组,50 mg/kg的biacalin处理可以显着降低caspase3,Bax,IL-6,TNF-a基因的mRNA表达量,同时提高Bcl2基因的mRNA表达量(P<0.05)。结论:本研究确定了 0.1 μg/mL baicalin可以显着提高猪卵母细胞IVM和PA,IVF及SCNT胚胎体外发育能力。主要表现为降低卵母细胞和胚胎中ROS水平,提高△Ψm和ATP含量等。同时证明baicalin是通过激活SHH信号途径来影响猪胚胎体外发育潜能。此外,本研究也进一步利用体内实验证明了 baicalin对酒精诱导雄性昆明鼠精子损伤具有潜在的保护作用。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-30）
罗肇博[6]（2019）在《RepSox和LBH589联合处理对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响》一文中研究指出体细胞核移植胚胎在体外发育时,因为供体细胞核过低多能性及异常表观重编程而出现胚胎发育阻滞现象。继而导致体细胞克隆胚胎发育异常和哺乳动物体细胞核移植效率低下。目前关于同时提高胚胎发育的多能性和表观遗重编程能力少有研究。RepSox是在诱导多能干细胞中发现的一种可以促进细胞产生多能性的小分子化合物。本实验的目的是结合RepSox和组蛋白去乙酰化抑制剂处理猪体细胞克隆胚胎,提高胚胎发育多能性的同时又改善表观遗传修饰,从而提高猪体细胞克隆胚胎体外发育能力及克隆效率。通过分析早期胚胎体外发育能力筛选出最佳的去乙酰化抑制剂及RepSox的最佳处理浓度。通过检测早期胚胎不同发育时期多能性基因的表达情况,分析胚胎发育的全能性;通过免疫荧光染色检测早期胚胎乙酰化和甲基化水平,判断其表观重编程能力;并通过凋亡染色确定胚胎质量。本实验得到以下分析结果:1.50nmol/LLBH589处理24小时组体外发育能力显着高于5 μmoI/LM344处理6小时组、0.2μmol/L MGCD0103处理6小时组、2mmol/L VPA处理24小时组和对照组(P<0.05)。2.不同浓度RepSox处理猪体细胞克隆胚胎,12.5、25 μmol/L组2-细胞率、4-细胞率、囊胚率、囊胚平均细胞数和对照组没有显着性差异,但显着高于50、100μmol/L 处理组(P<0.05)。3.12.5 μmol/L RepSox和50 nmol/L LBH589共处理胚胎体外发育能力显着高于对照组,多能性基因NANOG、POU5FI、SOX2表达量在4-细胞期、囊胚期显着高于对照组和LBH589处理组,且共处理组表观重编程水平优于对照组和LBH589处理组。结论:RepSox和LBH589共处理可以提高猪体细胞克隆胚胎早期发育能力和胚胎质量,提高多能性基因的表达及表观重编程水平。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-18）
彭巍[7]（2019）在《牦牛冷暖季卵巢差异分析及添加褪黑素对牦牛卵母细胞体外成熟、胚胎体外发育的影响》一文中研究指出(1)试验利用组织学和转录组学技术,对在暖季(W-yak)和冷季(C-yak)的牦牛卵巢状态变化进行研究。收集的卵巢样品分为W-yak和C-yak两组,分别测定其黄体数量、卵泡发育和RNA-Seq分析。结果表明:(1)W-yak牦牛黄体数量明显高于C-yak(P<0.05),其中8月和9月的牦牛排卵最为集中;(2)C-yak(11月)卵巢中卵泡发育过程中断,与W-yak(7月)相比,这是由于窦卵泡的异常积聚所导致;(3)多囊泡现象代表C-yak卵巢窦卵泡内颗粒细胞功能紊乱;(4)RNA-seq数据显示,如FST,CYP1A1,GNAI2和PI3K等雌激素分泌和代谢信号通路在C-yak卵巢中是紊乱的,本研究获得W-yak和C-yak之间卵巢形态变化和不同基因表达,并提供了与卵巢状态相关的试验数据。卵巢功能的这些重要变化与繁殖能力紧密相关。结果表明季节和气候变化不利于雌性生殖健康,并为长期营养缺乏和低温胁迫下可能导致卵巢功能障碍提供理论依据。(2)研究在卵母细胞成熟和/或胚胎培养液中添加不同浓度的褪黑素对牦牛卵母细胞体外成熟和胚胎体外发育的影响;结果表明,在试验1中,与对照组相比,IVC+10~(-9)组和IVC+10~(-11)组,卵母细胞成熟率显着提高(67.9%vs 82.4%,78.4%),囊胚率形成显着提高(36.8%,34.4%vs 26.3%),成熟卵母细胞降低ROS水平、细胞凋亡率和纺锤体错位与染色体异常的发生率,提高线粒体膜电位;在试验2中,在胚胎体外培养中,与对照组相比,IVC+10~(-9)组和IVC+10~(-11)组囊胚率显着提高(26.3%vs 35.4%,31.8%)。此外,与对照组相比,在IVC+10~(-9)组中观察到囊胚中凋亡细胞的数量和百分比降低(6.9±0.6;5.5%vs 3.5±0.4;3.0%)。在试验3中,IVC+10~(-9)组减少囊胚凋亡细胞数,抗氧化基因(SOD2)和热休克蛋白(HSPB1)mRNA表达量升高,促凋亡基因p53、Bax和capase-3的表达量降低,抗凋亡基因BCL2L1、Survivin的表达水平显着高于对照组;与IVM+10~(-9)相比,IVM/IVC+10~(-9)处理组的活性氧物质产量升高。总之,添加10~(-9)M浓度的褪黑素在牦牛胚胎体外生产阶段直接影响胚胎发育能力和质量。(3)褪黑素作为一种抗氧化剂在多种细胞中扮演着重要的角色,保护细胞内的分子免受氧化应激,褪黑素在牦牛胚胎中的抗氧化作用机制尚不清楚。在H_2O_2氧化应激下,通过对牦牛胚胎培养过程中添加不同浓度的褪黑素,考察牦牛胚胎发育过程中卵裂及囊胚形成的影响,并通过检测受精卵内活性氧水平、线粒体膜电位、抗氧化酶活性、细胞数量及内细胞团(ICM)/细胞总数(TCN)的比值等指标,考察褪黑素在牦牛胚胎中的抗氧化作用机制,结果表明,牦牛受精卵暴露于褪黑素的环境下,保护牦牛胚胎发育免受过氧化氢(H_2O_2)诱导的氧化应激损伤,保持受精卵线粒体功能稳定,T-AOC、GSH-Px、CAT活性升高,降低了H_2O_2诱导的细胞内ROS水平,进一步证明褪黑素通过保存抗氧化酶来保护着床前胚胎免受氧化损伤。这些结果共同证实了褪黑素对牦牛胚胎发育过程中的抗氧化作用,显着提高了牦牛胚胎体外生产中囊胚的数量和质量。(4)褪黑素减少了牦牛SCNT胚胎的细胞凋亡和ROS水平,增加了细胞数量,ICM细胞数量,以及ICM与TCN的比例;基因表达分析表明,褪黑素抑制促凋亡基因p53和Bax的表达,并刺激SCNT囊胚中抗氧化基因SOD2和Gpx4,抗凋亡基因BCL2L1和多能性相关基因SOX2的表达。在囊胚期添加褪黑素,SCNT-T组胚胎的全基因组H3K9ac水平高于SCNT组胚胎。结论,外源性褪黑素可以影响与细胞凋亡,抗氧化功能和发育相关的基因的表达,减少牦牛SCNT胚胎的细胞凋亡和ROS水平,提高胚泡质量,从而最终提高牦牛的克隆效率。(5)探讨褪黑素处理成纤维细胞后,将其作为供体细胞对牦牛体细胞核移植隆牦牛胚胎体外发育能力和质量的影响。在10~(-9) M褪黑素浓度下,显着增强成纤维细胞(PFF)的增殖,供体细胞甲基化水平H3K9me3、H3K9me2、和H3K18ac显着升高,促凋亡基因p53、Bax的表达水平明显降低,抗凋亡基因BCL2L1的表达水平明显增加,并且在10~(-9) M褪黑素处理的供体细胞组中囊胚率显着增加,细胞总数和ICM细胞数以及囊胚的ICM:TCN的比率显着提高;降低囊胚期胚胎凋亡细胞的发生率和细胞内ROS水平,提高的全基因组H3K9ac和H3K18ac乙酰化水平;囊胚中发育相关基因OCT4和多能性相关基因SOX2,抗氧化基因SOD2、Gpx4和热应激蛋白HSPB1的表达水平在SCNT-T组中显着上调,促凋亡基因p53和Bax的表达水平显着低于SCNT组,抗凋亡基因BCL2L1和Survivin表达水平显着高于对照组和SCNT组。本研究确定了供体细胞的经褪黑素处理可以促进牦牛克隆胚胎的发育。10~-99 M褪黑素的最佳浓度处理的重构胚,可以增强牦牛SCNT囊胚的形成和改善胚胎质量。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-05-01）
王华清,高青山,姜文杰,赵予晗,金庆国[8]（2019）在《Psammaplin A对牛老化卵母细胞体外发育的影响》一文中研究指出为探讨组蛋白去乙酰化抑制剂Psammaplin A(PsA)对牛老化卵母细胞体外发育的影响,本试验将卵母细胞随机分为对照组、老化组和50mmol/L PsA处理的老化组(PsA组)。应用免疫荧光染色和JC-1检测牛卵母细胞孤雌激活后的囊胚率、囊胚中的细胞数、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和胚胎线粒体膜电位强度。结果显示,老化组囊胚率显着低于PsA组及对照组(P<0.05),PsA组囊胚率与对照组间无显着差异(P>0.05)。对照组及PsA组囊胚内细胞数显着高于老化组(P<0.05),PsA组囊胚内细胞数与对照组间无显着差异(P>0.05);老化组细胞凋亡率显着高于对照组及PsA组(P<0.05),PsA组细胞凋亡率显着高于对照组(P<0.05)。老化组MⅡ期卵母细胞的GSH水平显着低于对照组与PsA组(P<0.05),对照组与PsA组的GSH水平无显着差异(P>0.05)。老化组1细胞期胚胎ROS水平显着高于对照组和PsA组(P<0.05),PsA组ROS水平显着高于对照组(P<0.05)。老化组4-8细胞早期胚胎的线粒体膜电位强度显着低于对照组和PsA组(P<0.05),对照组线粒体膜电位强度显着高于PsA组(P<0.05)。综上所述,PsA可有效延缓牛卵母细胞的老化并提高卵母细胞和胚胎质量。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年02期）
王雪梅,郭燕京,高瑞阁,李静,刘昕媛[9]（2019）在《乐芮(Luveris)与果纳芬(Gonal-F)对牛未成熟卵母细胞体外发育潜力的影响》一文中研究指出目的:探讨黄体生成素乐芮药物(Luveris,L)及卵泡刺激素果纳芬药物(Gonal-F,G)对体外未成熟牛卵母细胞成熟培养的影响。方法:购买商品化的牛未成熟卵母细胞2 000枚,分为2组,Luveris组及Gonal-F组,每组1 000枚。每组根据药物浓度0、5、10、20、40IU/mL再分组培养,培养24、48h后,解剖显微镜下评估COCs扩展程度,倒置显微镜下对卵母细胞核成熟(GV,MI,MⅡ)及第一极体排出情况进行评估。结果:Luveris及Gonal-F均随剂量依赖性显着性促进COCs的扩展。L与G培养24h和48h卵母细胞MⅡ成熟率分别是20IU/mL L为33.3%和37.5%,40IU/mL L为33.3%和53.6%;20IU/mL G为15.1%和16.2%;40IU/mL G为38.9%和39.5%。结论:黄体生成素可以像卵泡刺激素一样在卵泡发育早期促进体外牛卵母细胞的成熟发育,可以延迟卵母细胞GVBD。(本文来源于《海南医学院学报》期刊2019年03期）
吕玲燕,陆杏蓉,孙俊铭,陈宝剑,吴永绍[10]（2018）在《5-Aza-CdR对德保黑猪手工克隆重构胚胎体外发育效果的影响》一文中研究指出为了探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对德保黑猪手工克隆(HMC)重构胚胎体外发育效果的影响,本研究分别从供体细胞和重构胚入手,比较了5个不同处理浓度(0、5、10、20和40nmol/L)5-Aza-CdR处理HMC重构胚的体外发育效果,筛选最佳处理浓度;在最佳浓度下比较5个不同处理时间(0、24、48、72和96h)对HMC重构胚的体外发育效果,筛选最佳处理时间;用4个不同浓度(0、0.25、0.5和1μmol/L)5-Aza-CdR结合最佳浓度和最佳时间处理供体和重构胚,比较其体外发育潜能。结果显示,与空白对照组相比,5、10、20和40nmol/L5-Aza-CdR处理72h对重构胚卵裂率均无显着差异(P>0.05),20nmol/L 5-Aza-CdR处理能显着提高重构胚的囊胚率(P<0.05),10和20nmol/L 5-Aza-CdR处理均能显着提高囊胚细胞数(P<0.05),其中以20nmol/L 5-AzaCdR效果最佳;与空白对照组相比,利用20nmol/L 5-Aza-CdR处理HMC重构胚72h能显着提高重构胚的囊胚率和囊胚细胞数(P<0.05),其余处理时间对重构胚卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数均无显着影响(P>0.05);在囊胚的最佳处理浓度(20nmol/L)和最佳处理时间(72h)下,结合供体的4个处理浓度(0、0.25、0.5和1μmol/L),同时处理重构胚和供体,各处理组HMC重构胚的发育潜能均有提高,但效果均不显着(P>0.05),其中0.25～0.5μmol/L 5-Aza-CdR处理效果较佳。综上表明,适宜浓度(0.25～0.5μmol/L)的DNA甲基化酶抑制剂5-AzaCdR处理供体细胞72h并结合20nmol/L 5-Aza-CdR处理重构胚72h均能有效提高德保黑猪HMC重构胚胎的体外发育潜能,该结果可为今后研究德保黑猪HMC胚胎DNA甲基化调控机制提供参考。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2018年11期）
体外发育论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究犬弓首蛔虫卵的体外发育形态学变化,采用显微自动拍照系统对体外培养的犬弓首蛔虫卵进行了连续21 d观察和记录。结果表明,犬弓首蛔虫卵存在12个体外发育阶段,即1细胞期、 2细胞期、 3细胞期、 4细胞期、早期桑葚期、晚期桑葚期、囊胚期、肠胚期、 1期幼虫前期、 1期幼虫期、 2期幼虫前期和2期幼虫期。观察发现,虫卵在培养24 h后开始出现卵裂,形成2细胞期虫卵;虫卵第3～6天陆续发育形成3～4细胞期、桑葚期、囊胚期以及肠胚期虫卵;第7天,22.5%虫卵发育形成1期幼虫,并表现出一定趋光特性;第8天,10.67%虫卵发育形成感染性2期幼虫;第17天,感染性2期幼虫从虫卵孵出,卵壳塌陷。这些结果补充和完善了犬弓首蛔虫卵的体外发育形态变化资料。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外发育论文参考文献
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